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高效液相色譜儀（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）是一種廣泛應(yīng)用于各個(gè)領(lǐng)域的分析技術(shù)，其工作原理是基于樣品在固定載體上的分離和純化。HPLC采用了流動(dòng)相和固定相相互作用的分離機(jī)制，能夠?qū)悠分胁煌煞指綦x開(kāi)來(lái)。其中，固定相主要分為分子篩、SPE固相萃取柱、反相柱、正相柱、離子交換柱等類(lèi)型。流動(dòng)相則通常為有機(jī)溶劑、水或緩沖液等。
高效液相色譜儀的樣品混合物被噴入固定相上的柱子中，隨著流動(dòng)相的不斷流動(dòng)，樣品混合物逐漸被固定相表面吸附或溶解，并不斷與固定相交換。而不同成分的吸附和溶解速度也不同，這樣不同成分在流動(dòng)相的推動(dòng)下，就會(huì)分離開(kāi)來(lái)，依次出現(xiàn)在柱床傳感器處，形成各自的峰。峰的高度和面積反映了樣品中各組分的相對(duì)含量和純度。HPLC可以采取吸附譜和反射譜兩種方式進(jìn)行檢測(cè)。
使用環(huán)境的要求：
1.安全性：高效液相色譜儀使用有機(jī)溶劑和流動(dòng)相，這種液體在使用和操作過(guò)程中燃燒性、揮發(fā)性都很強(qiáng)，特別容易引發(fā)火災(zāi)或爆炸。因此，必須在安全通風(fēng)的實(shí)驗(yàn)室環(huán)境下操作，避免點(diǎn)火、電氣火災(zāi)等危險(xiǎn)。
2.穩(wěn)定性：涉及到流動(dòng)相的壓力控制、流量控制、柱溫控制等多種參數(shù)，使用環(huán)境需要穩(wěn)定性高，電力和水邏輯穩(wěn)定、溫度控制恒定等。
3.凈化度：工作所需的樣品純度通常要求高，和其他較為復(fù)雜的分析儀器相比，取樣、試劑、儀器本身需要保持一定的凈化度。
4.系統(tǒng)兼容性：不同的HPLC類(lèi)型、不同的柱子、流動(dòng)相和探測(cè)器等均存在系統(tǒng)兼容性問(wèn)題。因此使用方在選擇配套設(shè)備時(shí)需要注意設(shè)備兼容性。
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