如何用PBS緩沖液清洗細胞？

來源：浙江聯(lián)碩生物科技有限公司 2023年06月30日 14:45

一：取材

撕取洋蔥鱗莖內(nèi)表皮2～3mm2置于載玻片上，用吸管加6mmoI的PBS緩沖液兩滴，使材料充分浸入到液體中，處理約5分鐘。

二：去垢處理

用吸水紙吸凈浸泡材料的PBS緩沖液，加2～3滴37°C預溫的去垢劑1%TritonX-100，使液體充分浸泡材料，并立即放入37C水浴鍋中處理15分鐘。

三：沖洗

吸去 1%Triton，用6mmol的PBS緩沖液輕輕沖洗，反復兩至三次。

四：固定

用吸水紙吸盡PBS緩沖液，加2滴3%戊/二/q固定約20分鐘。

五：沖洗

吸去3%戊二/醛固定液，用6mmol的PBS緩沖液輕輕沖洗，反復兩至三次。

六：染色

吸去PBS緩沖液，滴幾滴0.2%考馬斯亮藍R250染料，染色約10分鐘。

七：制片

加蓋蓋玻片，用吸水紙吸去多余染料。

八：觀察

觀察將制好的玻片置于低倍鏡下，可見到規(guī)則排列的多邊形洋蔥表皮細胞輪廓，在細胞質(zhì)中可見到被染成藍色的粗細不等的分枝狀或點狀結構，這就是細胞骨架。然后轉高倍鏡繼續(xù)觀察，調(diào)節(jié)細準焦螺旋可見到細胞骨架的立體結構。

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