如果使用了含有抗原的樣品，那就需要一個具有選擇性的包被板，因?yàn)楦鞣N抗原都會結(jié)合，而不僅僅是那些感興趣的。然而，如果像用于抗體檢測的豚鼠ELISA試劑盒間接法那樣使用純化抗原，或像豚鼠ELISA試劑盒夾心法那樣使用捕獲抗體，那么我們已經(jīng)準(zhǔn)備了一個具有選擇性的包被板。

       包被板的類型大多數(shù)是聚苯乙烯或聚苯乙烯衍生物，其具有不同的結(jié)合特性，這取決于目標(biāo)物質(zhì)和檢測的性質(zhì)。一些目標(biāo)物質(zhì)，包括重度糖基化的蛋白質(zhì)、碳水化合物、DNA、脂類、短肽和有洗滌劑的蛋白質(zhì)，是不能很好吸附的。在這些情況下，建議使用經(jīng)過處理允許共價連接到表面的包被板。

2、孵育

       將試劑加入豚鼠ELISA試劑盒板后，必須進(jìn)行孵育，以便有時間進(jìn)行結(jié)合或反應(yīng)。每次孵育的溫度和時間將取決于檢測步驟和正在進(jìn)行的操作。通常在樣品應(yīng)用之后，與37℃下孵育1小時。然而，像阻斷這樣的步驟可以在冰箱中過夜，測定過程中的孵育通常在室溫下進(jìn)行，時間短得多。

3、洗滌

       洗板是在應(yīng)用在檢測每個組成部分之間，直到結(jié)果測定的一個重要步驟。溶液從孔中排空后，通常使用磷酸鹽緩沖鹽水-20（PBST）做為緩沖液清洗孔，以去除任何殘留的未結(jié)合抗原、抗體或試劑。這可以用多通道移液器手工完成，或使用自動洗板機(jī)。不充分的清洗可能會導(dǎo)致高背景信號，而過多的清洗會導(dǎo)致樣品信號低。不一致的清洗可能會導(dǎo)致整個板塊的不一致，從而導(dǎo)致不可靠的結(jié)果。

4、阻斷

在用蛋白質(zhì)包被豚鼠ELISA試劑盒板后，阻斷通常是必要的，以防止在接下來方案步驟中測定抗體的任何非特異性結(jié)合。