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ELISA 是如何工作的?

來源:浙江聯(lián)碩生物科技有限公司   2023年12月14日 15:56  

ELISA基于特異性抗原抗體反應(yīng),通常用到的是固相酶聯(lián)免疫吸附方法,這里以*使用的夾心法為例,其基本步驟為:

將包被抗體固定在微孔板表面

從板上洗去未被結(jié)合抗體

加入質(zhì)控抗原或含有目標(biāo)物的樣本

洗去其他雜蛋白,加入標(biāo)記的檢抗

添加酶特異性底物,產(chǎn)生有色產(chǎn)物,使用酶標(biāo)儀進(jìn)行比色測定即可

辣根過氧化物酶(HRP)或堿性磷酸酶是ELISA中常用的酶,而底物包括四甲基聯(lián)苯胺(TMB)或2, 2'-疊氮基-雙-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(ABTS)。通常選擇重復(fù)或三次采樣,并且使用不同濃度的樣品以確保生物學(xué)上可接受的檢測范圍。


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