體內(nèi)堿性彗星試驗在化合物遺傳毒性評價中的應(yīng)用日益廣泛。ICH S2(R1) 已將肝臟彗星試驗列為第 2 個組織/終點的體內(nèi)試驗；體內(nèi)哺乳動物堿性彗星試驗的指導(dǎo)原則（TG489）也已頒布。體內(nèi)堿性彗星實驗?zāi)軌驒z測 DNA 鏈斷裂、堿性不穩(wěn)定位點、不完整切除修復(fù)引起的 DNA 鏈的斷裂，能夠制成合適細胞懸液的組織 DNA 損傷。與其他試驗相比其檢測的是單細胞水平的 DNA 損傷，因此該試驗敏感性較高，操作簡單，經(jīng)濟省時。

一、彗星試驗原理

彗星試驗（Comet Assay），亦稱單細胞凝膠電泳試驗，是一種通過檢測DNA鏈損傷判斷遺傳毒性的技術(shù)。它能有效地檢測并定量分析細胞中DNA單、雙鏈缺口損傷的程度。當(dāng)各種內(nèi)源性和外源性DNA損傷因子誘發(fā)細胞DNA鏈斷裂時，其超螺旋結(jié)構(gòu)受到破壞，在細胞裂解液作用下，細胞膜、核膜等膜結(jié)構(gòu)受到破壞，細胞內(nèi)的蛋白質(zhì)、RNA以及其他成分均擴散到細胞裂解液中，而核DNA由于相對分子質(zhì)量太大只能留在原位。

在中性條件下，DNA片段可進入凝膠發(fā)生遷移，而在堿性電解質(zhì)的作用下，DNA發(fā)生解螺旋，損傷的DNA斷鏈及片段被釋放出來。由于這些DNA的相對分子質(zhì)量小且堿變性為單鏈，所以在電泳過程中帶負電荷的DNA會離開核DNA向正極遷移，從而形成彗星狀圖像，而未受損傷的DNA部分則保持球形。因此，可根據(jù)電泳緩沖液PH值不同，進一步分為中性彗星試驗（PH=8.4）和堿性彗星試驗（PH>13），前者主要用于檢測DNA雙鏈的斷裂損傷，后者則具有更高的靈敏性，可用于檢測更少量的單鏈和雙鏈的斷裂損傷。

通常，DNA受損越嚴重，其產(chǎn)生的斷鏈和斷片就越多，長度也越小，在相同電泳條件下遷移的DNA量就越多，遷移距離也越長。因此，可通過測定DNA遷移部分的光密度或長度來判定單個細胞的DNA損傷程度，從而確定受試物的作用劑量與DNA損傷效應(yīng)的關(guān)系。

陰性對照

陽性對照

二、IPHASE產(chǎn)品

IPHASE作為體外研究生物試劑引·領(lǐng)者，針對堿性彗星試驗成功開發(fā)彗星試驗試劑盒及其相應(yīng)載玻片，省去了客戶溶液配制時間，大大縮短了試驗周期，且試劑盒各組分均經(jīng)過嚴格的質(zhì)量檢測和多次試驗驗證，符合堿性彗星試驗要求。

產(chǎn)品名稱               規(guī)格

彗星試驗試劑盒         20/50 Test

彗星試驗載玻片，2孔    2/25 張

便捷性

提供單細胞凝膠電泳所需試劑和耗材，可以直接使用，大大縮短了實驗周期。

準(zhǔn)確性

試劑盒各成分均經(jīng)過嚴格的質(zhì)量檢測，實驗結(jié)果準(zhǔn)確、可靠、重現(xiàn)性高。

穩(wěn)定性

本試劑盒穩(wěn)定性強、易于運輸和保存。

應(yīng)用廣

應(yīng)用范圍廣，可用于食品、化學(xué)品、農(nóng)藥、消毒劑、食品添加劑、化妝品、醫(yī)療器械等多個方面的遺傳毒理學(xué)檢測。

IPHASE/匯智和源憑借多年的研發(fā)經(jīng)驗，推出了多領(lǐng)域、多種類的高·端科研試劑，為藥物早期研發(fā)提供篩選工具，為生命科學(xué)領(lǐng)域的探索提供新材料、新方法和新手段，為遺傳毒性研究提供便捷產(chǎn)品。此外，IPHASE/匯智和源可提供特殊產(chǎn)品的定制服務(wù)，望廣大科研工作者咨詢。

發(fā)    文    章    得    獎    勵

凡使用本公司產(chǎn)品，在國內(nèi)及國際刊物上發(fā)表論文（論文發(fā)表日起一年內(nèi)），并注明產(chǎn)品屬于IPHASE BIOSCIENCES/匯智和源生物技術(shù)（蘇州）有限公司所有，即可申請獎勵。根據(jù)發(fā)表刊物影響因子不同，給予不同金額獎品：

非SCI論文及IF≤5分，500元禮品；

5分＜IF≤8分 800元；

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注：禮品卡也可兌換同等金額產(chǎn)品購買抵用券；

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