熒光顯微鏡是一種利用紫外線作為光源,使被檢物體發(fā)出熒光,進而在觀察物體形狀和位置的特殊顯微鏡。它常用于研究細胞內物質的吸收、運輸、化學物質的分布及定位等。它的成像依賴于熒光染料或熒光抗體對樣品的標記,當樣品被激發(fā)光(如紫外線或藍光)照射時,熒光物質會吸收光子并重新發(fā)射出波長較長的光子,形成熒光現(xiàn)象。
熒光顯微鏡的各組成部件發(fā)揮著關鍵作用,下面將介紹它們的功能和特點。
1、光源系統(tǒng)
采用高功率LED光源,壽命>10,000小時。光譜范圍365-770nm,覆蓋常用熒光染料。配備智能調光系統(tǒng),光強穩(wěn)定性±0.5%??焖偾袚Q濾光片,切換時間<50ms。集成光強記憶功能,便于實驗重復。
2、物鏡系統(tǒng)
高數(shù)值孔徑物鏡,NA值可達1.49。工作距離0.13-0.22mm,適應不同樣品需求。配備校正環(huán),補償蓋玻片厚度差異。采用特殊鍍膜,透光率>90%。支持油鏡、水鏡、干鏡多種類型。
3、濾光片組
采用高精度干涉濾光片,帶寬≤10nm。配備多組激發(fā)/發(fā)射濾光片,適應常用熒光染料。快速轉輪設計,切換時間<100ms。集成ND濾光片,光強調節(jié)范圍0.1-100%。支持自定義濾光片組合。
4、檢測系統(tǒng)
高靈敏度CCD相機,量子效率>80%。制冷溫度-30℃,暗電流<0.01e-/pixel/s。分辨率可達2048×2048像素。配備EMCCD模塊,適用于微弱熒光檢測。集成光譜拆分系統(tǒng),支持多色熒光分離。
5、載物臺系統(tǒng)
電動掃描載物臺,定位精度±0.1μm。行程范圍75×50mm,適應常規(guī)玻片尺寸。配備多孔板適配器,支持高通量篩選。集成Z軸聚焦系統(tǒng),分辨率10nm。支持多點定位和自動掃描。
6、控制系統(tǒng)
采用專業(yè)圖像分析軟件,支持3D重構。配備自動曝光功能,優(yōu)化圖像質量。集成熒光漂白校正模塊。支持多通道熒光疊加。數(shù)據(jù)存儲容量≥2TB,支持遠程訪問。
熒光顯微鏡通過以上精密部件的協(xié)同工作可實現(xiàn)高分辨率、多色熒光成像,了解各部件功能特點,有助于優(yōu)化實驗方案,提高成像質量。
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