在現(xiàn)代科研領(lǐng)域,尤其是細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)以及材料科學(xué)等研究方向,光學(xué)顯微鏡高分辨率成像對(duì)樣本細(xì)節(jié)的精準(zhǔn)呈現(xiàn)至關(guān)重要。433802-9010-000-- 蔡司 ZEISS 無(wú)熒光鏡油 Zeiss Immersol 518 F 憑借其光學(xué)設(shè)計(jì)、穩(wěn)定的化學(xué)性能以及無(wú)熒光特性,成為科研工作者實(shí)現(xiàn)高質(zhì)量顯微觀察的可靠工具。
一、光學(xué)原理與核心技術(shù)基礎(chǔ)
(一)折射率匹配優(yōu)化光線傳播
Zeiss Immersol 518 F 鏡油的核心光學(xué)原理基于折射率匹配。在光學(xué)顯微鏡成像中,光線從樣本經(jīng)載玻片進(jìn)入物鏡時(shí),空氣(折射率約 1.00)與玻璃(載玻片和物鏡玻璃折射率約 1.52)間存在較大折射率差,會(huì)導(dǎo)致光線折射、散射,使部分光線偏離物鏡有效接收范圍,降低成像分辨率和亮度。而 Zeiss Immersol 518 F 鏡油的折射率精準(zhǔn)設(shè)定為 1.518,與玻璃材質(zhì)高度匹配。將其填充于載玻片與物鏡之間后,光線能夠以近乎直線的路徑傳播,顯著減少光線折射損耗,大幅提高光線進(jìn)入物鏡的比例,從而增強(qiáng)成像的亮度與對(duì)比度,為高分辨率觀察奠定基礎(chǔ) 。
(二)數(shù)值孔徑提升與分辨率增強(qiáng)
數(shù)值孔徑(NA)是衡量物鏡聚光能力和分辨率的關(guān)鍵參數(shù),其計(jì)算公式為 NA = n×sinθ(n 為介質(zhì)折射率,θ 為物鏡孔徑角的一半)。Zeiss Immersol 518 F 鏡油通過提高介質(zhì)折射率,有效提升物鏡數(shù)值孔徑。以油鏡為例,在空氣介質(zhì)中其數(shù)值孔徑通常約為 0.95,使用該鏡油后,數(shù)值孔徑可提升至 1.3 - 1.4。更高的數(shù)值孔徑使物鏡能夠收集更多光線,同時(shí)根據(jù)瑞利判據(jù)(分辨率公式:d = λ / 2NA,λ 為照明光波長(zhǎng)),在固定光源波長(zhǎng)條件下,可分辨的最小距離 d 減小,進(jìn)而實(shí)現(xiàn)更高分辨率成像。這使得科研人員能夠清晰觀察到細(xì)胞內(nèi)線粒體嵴的細(xì)微結(jié)構(gòu)、納米材料的表面形貌等精細(xì)樣本特征 。
二、化學(xué)成分與性能特性
(一)特制配方確保性能穩(wěn)定
Zeiss Immersol 518 F 鏡油采用特制的碳?xì)浠衔锱浞剑愿呒兌然A(chǔ)油為主體,添加了多種功能性添加劑。基礎(chǔ)油分子結(jié)構(gòu)穩(wěn)定,具有極低的揮發(fā)性,在使用過程中能有效避免因揮發(fā)導(dǎo)致的折射率變化,維持成像穩(wěn)定性。添加劑中包含防霧劑和抗氧化劑,防霧劑可防止鏡油因環(huán)境溫度變化或樣本水分影響產(chǎn)生霧氣,確保長(zhǎng)時(shí)間觀察視野清晰;抗氧化劑能抑制鏡油與空氣接觸發(fā)生氧化反應(yīng),延長(zhǎng)鏡油使用壽命,減少因氧化對(duì)光學(xué)性能的不良影響 。
(二)物理化學(xué)性能的優(yōu)異表現(xiàn)
在物理性能方面,該鏡油具有良好的溫度適應(yīng)性,可在較寬溫度范圍(4℃ - 40℃)內(nèi)保持穩(wěn)定液態(tài)和光學(xué)性能。無(wú)論是在細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)(37℃)進(jìn)行實(shí)時(shí)觀察,還是對(duì)低溫保存(如 4℃)的組織切片樣本進(jìn)行檢測(cè),鏡油都不會(huì)出現(xiàn)凝固、變稠或折射率顯著改變的情況 ?;瘜W(xué)兼容性上,Zeiss Immersol 518 F 鏡油與常見的載玻片清潔劑(如乙醇、異丙醇)、樣本染色劑以及封片劑等化學(xué)試劑均無(wú)不良反應(yīng),不會(huì)發(fā)生溶解、沉淀或化學(xué)反應(yīng),避免對(duì)樣本和物鏡造成污染,保障實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性 。
三、產(chǎn)品核心性能優(yōu)勢(shì)
(一)極低熒光背景實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)熒光檢測(cè)
Zeiss Immersol 518 F 鏡油的突出優(yōu)勢(shì)在于其極低的熒光背景。在熒光顯微觀察中,鏡油自身的熒光特性會(huì)嚴(yán)重干擾樣本熒光信號(hào)檢測(cè)。該鏡油通過特殊的提純工藝和配方優(yōu)化,在常見熒光激發(fā)波長(zhǎng)范圍(如 488nm、561nm、640nm)下,自發(fā)熒光強(qiáng)度遠(yuǎn)低于樣本熒光信號(hào)。在免疫熒光染色實(shí)驗(yàn)中,能夠幫助科研人員更清晰準(zhǔn)確地分辨目標(biāo)熒光標(biāo)記物,避免因鏡油熒光背景導(dǎo)致的假陽(yáng)性結(jié)果,提高熒光信號(hào)檢測(cè)的靈敏度和準(zhǔn)確性,為熒光定量分析提供可靠數(shù)據(jù) 。
(二)高光學(xué)均一性保障成像質(zhì)量穩(wěn)定
蔡司對(duì) Zeiss Immersol 518 F 鏡油的生產(chǎn)有著嚴(yán)格的質(zhì)量控制體系,確保產(chǎn)品具有高光學(xué)均一性。每一批次產(chǎn)品的折射率波動(dòng)范圍嚴(yán)格控制在極小區(qū)間(±0.0003),保證不同區(qū)域、不同時(shí)間使用的鏡油對(duì)光線折射作用一致。在進(jìn)行大視野拼接成像、長(zhǎng)時(shí)間連續(xù)觀察實(shí)驗(yàn),或是多組平行樣本對(duì)比觀察時(shí),這種高精度光學(xué)均一性可有效避免因鏡油光學(xué)性能差異導(dǎo)致的圖像變形、亮度不均等問題,使科研人員獲得穩(wěn)定、高質(zhì)量的顯微圖像數(shù)據(jù) 。
(三)良好的物鏡兼容性與便捷清潔性
Zeiss Immersol 518 F 鏡油與蔡司多種類型物鏡(如復(fù)消色差物鏡、平場(chǎng)物鏡等)具有良好的兼容性,不會(huì)腐蝕物鏡鍍膜,對(duì)物鏡的光學(xué)涂層無(wú)損害,能夠有效延長(zhǎng)物鏡使用壽命。使用后,該鏡油可被常規(guī)有機(jī)溶劑(如二甲苯、無(wú)水乙醇)快速溶解清除,其特殊分子結(jié)構(gòu)使其在物鏡表面不易殘留??蒲腥藛T只需使用干凈擦鏡紙蘸取適量溶劑輕輕擦拭,即可清潔物鏡,操作便捷,同時(shí)降低了因鏡油殘留對(duì)后續(xù)實(shí)驗(yàn)造成干擾的風(fēng)險(xiǎn) 。
四、實(shí)驗(yàn)應(yīng)用場(chǎng)景與操作規(guī)范
(一)生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域應(yīng)用
在細(xì)胞生物學(xué)研究中,Zeiss Immersol 518 F 鏡油配合高倍油鏡,可清晰呈現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)復(fù)雜亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)。例如在研究細(xì)胞凋亡過程時(shí),能夠通過高分辨率成像觀察凋亡小體的形態(tài)變化、線粒體膜電位改變等細(xì)節(jié) 。在病理學(xué)領(lǐng)域,對(duì)組織切片進(jìn)行 HE 染色、免疫組化染色后,使用該鏡油可更細(xì)致地分辨細(xì)胞形態(tài)、組織結(jié)構(gòu)以及病變特征,為疾病診斷和病理機(jī)制研究提供清晰準(zhǔn)確的圖像依據(jù) 。此外,在熒光標(biāo)記蛋白表達(dá)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)中,其低熒光背景特性能夠精準(zhǔn)呈現(xiàn)熒光蛋白的定位與表達(dá)水平,助力科研人員深入探究細(xì)胞生命活動(dòng)機(jī)制 。
(二)材料科學(xué)領(lǐng)域應(yīng)用
在材料科學(xué)研究中,Zeiss Immersol 518 F 鏡油適用于觀察納米材料、半導(dǎo)體器件等樣本微觀結(jié)構(gòu)。對(duì)于納米顆粒的尺寸測(cè)量、表面形貌分析,以及半導(dǎo)體芯片中電路結(jié)構(gòu)檢測(cè),該鏡油輔助下的高分辨率光學(xué)成像可提供關(guān)鍵表征數(shù)據(jù)。例如在研究二維材料(如二硫化鉬)的層數(shù)、邊緣結(jié)構(gòu)和缺陷分布時(shí),能夠清晰呈現(xiàn)材料的原子級(jí)臺(tái)階和晶格結(jié)構(gòu),為材料性能研究和制備工藝優(yōu)化提供直觀有效的圖像信息 。
(三)標(biāo)準(zhǔn)操作流程
使用前準(zhǔn)備:使用 Zeiss Immersol 518 F 鏡油前,需確保載玻片和蓋玻片表面潔凈,無(wú)灰塵、污漬等雜質(zhì),避免影響成像質(zhì)量。將顯微鏡物鏡切換至高倍油鏡(通常為 100×),調(diào)節(jié)載物臺(tái)高度,使物鏡接近但不接觸樣本 。
添加鏡油:使用移液槍或滴管吸取適量鏡油,滴加 1 - 2 滴于蓋玻片中央樣本區(qū)域上方,緩慢旋轉(zhuǎn)物鏡轉(zhuǎn)換器,使油鏡鏡頭浸入鏡油中,確保鏡油在物鏡與蓋玻片之間形成均勻接觸層 。
觀察與調(diào)整:通過微調(diào)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋進(jìn)行對(duì)焦,觀察樣本成像效果。若出現(xiàn)亮度不均、圖像模糊等情況,可檢查鏡油層是否均勻,必要時(shí)補(bǔ)充鏡油或調(diào)整物鏡位置 。
使用后清潔:觀察結(jié)束后,立即使用干凈擦鏡紙蘸取二甲苯或無(wú)水乙醇,輕輕擦拭物鏡表面殘留鏡油,直至物鏡清潔干凈。清潔后,將物鏡轉(zhuǎn)離載玻片,妥善保存顯微鏡和剩余鏡油 。
(四)注意事項(xiàng)
避免交叉污染:不同批次或不同品牌鏡油光學(xué)性能可能存在差異,嚴(yán)禁混合使用,防止影響成像效果。使用過程中,需避免鏡油污染樣本,建議使用專用滴管或移液槍添加鏡油,且每滴加一次更換新槍頭 。
儲(chǔ)存條件:Zeiss Immersol 518 F 鏡油應(yīng)儲(chǔ)存于陰涼、干燥、避光環(huán)境中,避免高溫和陽(yáng)光直射,防止鏡油氧化變質(zhì)或揮發(fā)。儲(chǔ)存溫度建議控制在 10℃ - 25℃,開封后的鏡油需密封保存,盡快使用完畢 。
安全防護(hù):鏡油中含有的有機(jī)溶劑具有一定毒性和揮發(fā)性,操作時(shí)需在通風(fēng)良好環(huán)境中進(jìn)行,佩戴手套和口罩,避免皮膚接觸和吸入揮發(fā)氣體。使用后的擦鏡紙和廢棄鏡油需按照實(shí)驗(yàn)室危險(xiǎn)廢棄物處理規(guī)范進(jìn)行處置 。
433802-9010-000-- 蔡司 ZEISS 無(wú)熒光鏡油 Zeiss Immersol 518 F 憑借其先進(jìn)的光學(xué)技術(shù)、穩(wěn)定可靠的性能以及完善的使用規(guī)范,在科研領(lǐng)域的光學(xué)顯微鏡成像中發(fā)揮著重要作用??蒲腥藛T通過正確掌握其原理和操作要點(diǎn),能夠充分發(fā)揮該鏡油的性能優(yōu)勢(shì),獲取高質(zhì)量顯微圖像數(shù)據(jù),推動(dòng)各學(xué)科領(lǐng)域的研究不斷深入發(fā)展。