薄膜過濾器操作步驟:
1.打開預先滅菌的過濾器支架或將過濾器座、漏斗和漏斗蓋在沸水中浸沒一分鐘作消毒。若沒有沸水,用95%酒精噴灑于漏斗和漏斗蓋,然后將其點燃,在火熄滅以后,讓過濾器冷卻至40℃以下,如果必須使用酒精,漏斗必須用耐火材料制造。
2.用水煮過或火焰滅菌鉗子,將無菌過濾器的底座部分安裝于過濾燒瓶或真空管道上。
3.用火燒過的鑷子放一張無菌薄膜在過濾器底座上,根據(jù)測試目的,使用特定的過濾膜:總菌數(shù)/大腸桿菌數(shù):0.45um薄膜,酵母菌和霉菌:0.80um薄膜。
4.用水煮過或火焰滅菌鉗子,將過濾器漏斗和漏斗蓋放置于底座上。如漏斗蓋帶有管口,則在管口處裝上過濾器,或予以封住。待過濾器的溫度低于40℃后才可加樣品。
5.重復以上步驟,直到所有樣品都完成過濾。
6.將樣品直接倒入消毒和冷卻的過濾器漏斗中。蓋上過濾器漏斗的蓋子。若使用勺,須將勺放在95%的酒精的燒杯中。
7.打開真空泵,使樣品通過薄膜。打開裝有PH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液的玻璃瓶,先用火燒螺紋處,然后倒入約20毫升PH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液于過濾漏斗內,進行沖洗。施加真空,使PH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液通過薄膜。在過濾完樣品或PH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液后,不要讓真空施加時間連續(xù)超過30秒以上。
8.用火焰滅菌鉗子從過濾器底座上取下薄膜。輕微提起裝有吸收墊和培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿的蓋子,并放下薄膜,直到鑷子相對側的薄膜邊靠到吸收墊邊為止。將薄膜貼在吸收墊上滾動,以排除氣泡。蓋上蓋子,在工作臺上輕輕拍打培養(yǎng)皿,以驅除薄膜下面的氣泡。
薄膜過濾器儀器清潔
將過濾器支架或過濾器座、漏斗和漏斗蓋、濾芯用純化水清洗干凈。使用前進行高溫滅菌。
薄膜過濾器注意事項
1.試驗過程中,應保持濾膜前后的完整性。
2.使用前,必須對過濾器進行潔凈處理,所選濾膜應浸泡過夜。
3.消毒時將濕態(tài)膜貼在支撐板上,蓋上密封墊圈,將貯液杯和支座螺紋稍旋緊,待消毒后在旋緊,以紗布包裹進行熱壓消毒,以免微孔濾膜破裂。
4.器蓋上有孔,可套針頭過濾器用以過濾外界空氣,以免污染。
5.本品不耐酸、堿及其他化學品。
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