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鯉魚卵黃蛋白原ELISA試劑盒標本及采集、貯運因素

來源:北京雅安達生物技術(shù)有限公司   2014年10月31日 10:01  

鯉魚卵黃蛋白原ELISA試劑盒標本及采集、貯運

 

1鯉魚卵黃蛋白原ELISA試劑盒嚴重溶血,以HRP 為標記的ELISA 測定中,殘留在孔內(nèi)的血紅蛋白具有過氧化物酶樣活性,催化底物顯色造成假陽性; 
2)混有紅細胞的血清 易沉淀或附著在聚乙烯孔內(nèi)不易洗凈;
3)如有細菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會產(chǎn)生假陽性反應; 
4)標本凝固不全,有時為了爭取時間快速檢測,常在血液還未開始凝固時即強行離心分離血清,使血清中仍殘留部分纖維蛋白原,在ELISA 測定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊,易造成假陽性結(jié)果; 
5)采血試管洗滌不*、反復使用易交叉污染; 
6)塑料試管能吸附抗原物質(zhì) ,樣本久置在塑料管內(nèi)會使樣本內(nèi)抗原含量下降造成假陰性。 
ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD+23SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以PN值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于21為陽性;PN值小于21,但大于15為可疑;PN小于15為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。

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