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免疫組化染色呈陰性結果的原因有哪些?

來源:上海心語生物科技有限公司   2015年08月04日 15:40  

免疫組化染色呈陰性結果的原因有哪些?上海心語生物科技有限公司技術李給您幾點建議:

1、抗體濃度和質量問題以及抗體來源選擇錯誤。不知抗體是進口的還是國產(chǎn)的工作液,怎么這么高稀釋度也沒能做出陽性結果?另外,不是抗體濃度越高就越易出現(xiàn)陽性結果,抗原抗體反應有前帶和后帶效應,必須摸索*濃度。

2、抗原修復不全,對于甲醛固定的組織必須用充分抗原修復來打開抗原表位,以利于與抗體結合;建議微波修復用高火4次*6min試試。有人做過實驗,這是*的時間和次數(shù)。若不行,還可高壓修復。

3、組織切片本身這種抗原含量低;

4、血清封閉時間過長。

5、DAB孵育時間過短。

6、細胞通透不全,抗體未能充分進入胞內參與反應。

7、開始做免疫組化,我建議你一定要首先做個陽性對照片,排除抗體等外的方法問題。

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