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研域(上海)化學(xué)試劑有限公司
中級會(huì)員 | 第18年
2015年ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)技術(shù)總結(jié)2015/04/29
根據(jù)我公司進(jìn)口ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)技術(shù)部多年的經(jīng)驗(yàn)以及客戶們的咨詢問題總結(jié),整理分析出了幾個(gè)需要嚴(yán)格注意的方面,實(shí)驗(yàn)者們隨我公司來看一看吧(供參考)。1.采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉:曾用洗瓶直接沖洗板。ELISA試劑盒后來雖然也用槍逐孔洗板,但對此注意不夠。2.加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡:終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。3.讀板時(shí)板底不清潔:難免洗板后板底有水漬,這也可能導(dǎo)致讀數(shù)不準(zhǔn)。4.加樣板過多、加樣速度慢,造成各孔反應(yīng)時(shí)間不均一:但溫度高時(shí),加樣時(shí)間過長將導(dǎo)致各孔時(shí)間的反應(yīng)時(shí)間不
ELISA高手整理出地實(shí)驗(yàn)小妙招2015/04/27
常有剛剛接觸ELISA實(shí)驗(yàn)的新手說操作復(fù)雜,步驟化很多,不易實(shí)驗(yàn)。其實(shí)當(dāng)我們掌握了其中的技巧與注意避免之后就會(huì)簡單很多。我公司高手分析出操作要點(diǎn)提示,這些個(gè)實(shí)驗(yàn)技巧得記牢:1.嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。2.所有液體組分使用前充分搖勻。3.實(shí)驗(yàn)前,產(chǎn)品應(yīng)保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶,這屬于正?,F(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶*溶解后再使用?!ぴu價(jià)的方法1.發(fā)質(zhì)控物進(jìn)行調(diào)查,這是目前國內(nèi)外常見的形式,采用定期發(fā)放質(zhì)控物至各實(shí)驗(yàn)室,各實(shí)驗(yàn)室在規(guī)
我司公布實(shí)驗(yàn)條例之用水常識2015/04/24
水是實(shí)驗(yàn)室內(nèi)一個(gè)常常被忽視但至關(guān)重要的試劑.實(shí)驗(yàn)室用水有那些種類?能達(dá)到什么級別?不同實(shí)驗(yàn)對水的要求有那些?為澄清這些模糊的概念,我公司根據(jù)客戶要求,結(jié)合公司實(shí)驗(yàn)室具體操作方法現(xiàn)對實(shí)驗(yàn)室用水常識做以下分解,為更多科研實(shí)驗(yàn)工作者做參考意見:一、實(shí)驗(yàn)室常見的水的種類:1、蒸餾水(DistilledWater):實(shí)驗(yàn)室zui常用的一種純水,雖設(shè)備便宜,但極其耗能和費(fèi)水且速度慢,應(yīng)用會(huì)逐漸減少.蒸餾水能去除自來水內(nèi)大部分的污染物,但揮發(fā)性的雜質(zhì)無法去除,如二氧化碳、氨、二氧化硅以及一些有機(jī)物.新鮮的蒸餾
ELISA高手分析出的這些個(gè)實(shí)驗(yàn)技巧得記牢2015/04/22
常有剛剛接觸ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的新手說操作復(fù)雜,步驟化很多,不易實(shí)驗(yàn)。其實(shí)當(dāng)我們掌握了其中的技巧與注意避免之后就會(huì)簡單很多。我公司ELISA高手分析出操作要點(diǎn)提示,這些個(gè)實(shí)驗(yàn)技巧得記牢:1.嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。2.所有液體組分使用前充分搖勻。3.實(shí)驗(yàn)前,產(chǎn)品應(yīng)保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶,這屬于正?,F(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶*溶解后再使用。評價(jià)的方法1.發(fā)質(zhì)控物進(jìn)行調(diào)查,這是目前國內(nèi)外常見的形式,采用定期發(fā)放質(zhì)控物至各實(shí)驗(yàn)室
酶聯(lián)免疫法基本原理及注意事項(xiàng)2015/04/20
①使抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性。②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標(biāo)抗原或抗體,這種酶標(biāo)抗原或抗體既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在測定時(shí),把受檢標(biāo)本(測定其中的抗體或抗原)和酶標(biāo)抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)分開,zui后結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)顏色反應(yīng)的深淺來進(jìn)行定性或
2015年ELISA試劑盒相應(yīng)的抗體結(jié)合2015/04/15
酶免疫測定(enzymeimmunoassay)可分為均相(homogenous)和非均相(heterogenous)兩種類型。在均相EIA中可不需進(jìn)行游離的和結(jié)合的標(biāo)記物的分離而直接測定標(biāo)記物。ELISA試劑盒例如在某種條件下,抗原抗體反應(yīng)后形成的酶標(biāo)記抗原抗體復(fù)合物中的酶失去其對底物作用的活力,因而測出的酶活力直接反映游離的酶標(biāo)記物。均相EIA在臨床檢驗(yàn)中較少應(yīng)用。非均相EIA需先進(jìn)行游離的和結(jié)合的標(biāo)記物的分離。如前所述,固相載體可用作一種分離手段。這種固相酶免疫測定方法在1971年zui初
ELISA檢測試劑盒的組成2015/04/13
1.抗體在ELISA檢測試劑盒中應(yīng)用的抗體可分為多克隆抗體(多抗)和單克隆抗體(單抗)。多抗取白免疫動(dòng)物的抗血清,制備較簡單,但抗血清成分復(fù)雜,除含針對抗原(多個(gè)表位)的抗體外,還含有多種其他抗體,親和力和特異性相對要低于單抗,且制備周期長,批間差異較大。而單抗僅針對抗體的單一表位,親和力和特異性均較多抗高,且制備技術(shù)成熟,產(chǎn)量大,批間差異小,但結(jié)合位點(diǎn)的單一也正是其弱點(diǎn)之所在,在雙抗體夾心法中,如包被和指示抗體使用同一單抗,則由于結(jié)合位點(diǎn)的缺乏,容易造成假陰.性結(jié)果。在使用雙單抗一步法時(shí),應(yīng)注
血清是Z常用的ELISA試劑盒標(biāo)本2015/04/10
ELISA試劑盒檢測中血漿一般可視為與血清同等的標(biāo)本,標(biāo)本中干擾性物質(zhì)是引起檢測后結(jié)果偏高或偏低的主要原因,干擾性物質(zhì)分為內(nèi)源性物質(zhì)和外源性物質(zhì)兩大類:1.內(nèi)源性物質(zhì)常見的干擾物質(zhì)有:類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、嗜異性抗體、嗜靶抗原自身抗體、醫(yī)源性誘導(dǎo)的抗鼠Ig(s)抗體、交叉反應(yīng)物質(zhì)和其它物質(zhì)等。(1)類風(fēng)濕因子:血清中IgM、IgG型類風(fēng)濕因子(RF)在ELISA試劑盒檢測中,可與ELISA試劑盒系統(tǒng)中的捕獲抗體及酶標(biāo)記二抗的FC段直接結(jié)合,從而導(dǎo)致檢測OD值偏高。(2)補(bǔ)體:ELISA試劑盒系統(tǒng)中固
顯色反應(yīng)避光對ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的重要性2015/04/08
這類反應(yīng)的定性結(jié)果可以用肉眼判斷。目視標(biāo)本也無色或近于無色者判為陰性,顯色清晰者為陽性。但在ELSIA試劑盒中,正常人血清反應(yīng)后??沙霈F(xiàn)呈色的本底,此本底的深淺因ELISA試劑盒的組成和實(shí)驗(yàn)的條件不同而異,因此實(shí)驗(yàn)中必須加測陰性對照。陰性對照的組成應(yīng)為不含受檢物的正常血清或類似物(見3.6)。在用肉眼判斷結(jié)果時(shí),更宜用顯色深于陰性對照作為標(biāo)本陽性的指標(biāo)。此時(shí)酶催化無色的底物生成有色的產(chǎn)物。反應(yīng)的溫度和時(shí)間仍是影響顯色的因素。在一定時(shí)間內(nèi),陰性孔可保持無色,而陽性孔則隨時(shí)間的延長而呈色加強(qiáng)。適當(dāng)提
ELISA試劑盒幫助細(xì)胞命運(yùn)由時(shí)間決定2015/04/07
遺傳因子*相同的細(xì)胞既能根據(jù)明確的細(xì)胞外觸發(fā)因素、ELISA試劑盒也能根據(jù)細(xì)胞內(nèi)明顯是隨機(jī)所產(chǎn)生的刺激做出不同的細(xì)胞命運(yùn)決定?;虮磉_(dá)中的背景噪音是細(xì)胞程序中的一個(gè)“漏洞”還是它的一個(gè)關(guān)鍵組成部分?這項(xiàng)研究(RichardLosick和JohanPaulsson兩個(gè)實(shí)驗(yàn)室的一個(gè)聯(lián)合研究項(xiàng)目)顯示,ELISA試劑盒偶然性在此起一定作用,至少對“枯草桿菌”是如此?!翱莶輻U菌”的細(xì)胞需要做一個(gè)非常重要的細(xì)胞命運(yùn)決定:在孤立、運(yùn)動(dòng)狀態(tài)與多細(xì)胞的、成鏈的狀態(tài)之間的轉(zhuǎn)變。ELISA試劑盒作者發(fā)現(xiàn),該細(xì)胞是按
小鼠ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)條件的選擇2015/03/27
在小鼠ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中,進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,其中包括:(1)固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。(2)包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,小
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理分析管理2015/03/24
Engvall和Perlmann于1971年應(yīng)用將酶附著于抗原或者抗體,通過化學(xué)反應(yīng)的測定終產(chǎn)物顏色的方法進(jìn)行了IgG的定量測定,并命名為"enzymelinkedimmunosorbentassay(ELISA)"也就是我們所說的即酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),這種固相酶免疫測定方法已經(jīng)在科研領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用。ELISA檢測試劑盒方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定,具有靈敏度高,操作簡單等優(yōu)點(diǎn),但是在具體實(shí)驗(yàn)過程中影響因素較多,并且要按照嚴(yán)格的說明要求,在臨床檢驗(yàn)中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常可見到一些錯(cuò)誤結(jié)
實(shí)驗(yàn)室常用elisa試劑盒的種類與區(qū)別2015/03/20
1、細(xì)胞因子檢測試劑盒:如白介素、選擇素、集落刺激因子,腫瘤壞死因子,干擾素,轉(zhuǎn)化生長因子,趨化因子,細(xì)胞因子受體,粘附分子,生長因子,凋亡因子等等2、肝纖維化檢測elisa試劑盒:如纖維連接蛋白,透明質(zhì)酸,膠原,基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子,elisa試劑盒基質(zhì)金屬蛋白酶,層粘蛋白等等3、心肌梗塞檢測elisa試劑盒:如肌鈣蛋白,肌紅蛋白,C-反應(yīng)蛋白等等4、內(nèi)分泌檢測elisa試劑盒如甲狀腺,胰腺,性激素,孕酮,睪酮,生長激素,生長抑素,內(nèi)皮素,皮質(zhì)醇,骨鈣素,催乳素,促腎上腺皮質(zhì)激素,促卵泡素,
關(guān)于大鼠ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中誤差的解決辦法2015/03/17
大鼠ELISA試劑盒是用于體外定性檢測人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎(HEV)病毒IgM抗體ELISA檢測。ELISA試劑盒試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。但是您知道嗎?大鼠ELISA試劑盒如果您在實(shí)驗(yàn)過程中犯了以下幾個(gè)小錯(cuò)誤的話也會(huì)出現(xiàn)實(shí)驗(yàn)誤差的哦!1.做實(shí)驗(yàn)時(shí)少說話,防止唾液掉進(jìn)酶標(biāo)條中。2.加入一抗二抗需要放入37°。3.如果同時(shí)做多個(gè)板子,多個(gè)板子別羅一起;盡量少用排槍。4.加
2015年ELISA檢測試劑盒定性檢測規(guī)則2015/03/11
ELISA檢測試劑盒的結(jié)果判定分為定性和定量兩種,在間接法和夾心法ELSIA中,陽性孔呈色深于陰性孔。在競爭法ELISA中則相反,陰性孔呈色深于陽性孔。那么兩類結(jié)果如何判斷呢?南京森貝伽生物技術(shù)為您解析:(1)間接法和夾心法這類反應(yīng)的定性結(jié)果可以用肉眼判斷。目視標(biāo)本也無色或近于無色者判為陰性,顯色清晰者為陽性。但在ELSIA中,正常人血清反應(yīng)后常可出現(xiàn)呈色的本底,此本底的深淺因試劑的組成和實(shí)驗(yàn)的條件不同而異,因此實(shí)驗(yàn)中必須加測陰性對照。陰性對照的組成應(yīng)為不含受檢物的正常血清或類似物。在用肉眼判斷
實(shí)用ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)對照信然有方法2015/03/09
由于是單細(xì)胞水平檢測,ELISPOT比ELISA更靈敏,能從20萬-30萬細(xì)胞中檢出1個(gè)分泌該蛋白的細(xì)胞。捕獲抗體具有高親和力、高特異性、低內(nèi)毒素的單抗,ELISA試劑盒在研究者以刺激劑激活細(xì)胞時(shí),不會(huì)影響活化細(xì)胞分泌細(xì)胞因子。目前ELISA法仍在研究當(dāng)中占有著主流地位,ELISA試劑盒的普遍應(yīng)用使得實(shí)驗(yàn)更加方便、經(jīng)濟(jì)和準(zhǔn)確,ELISPOT技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)也決定了它的發(fā)展?jié)摿?。LISPOT法來源于ELISA,相比較傳統(tǒng)的ELISA法有所突破,是定量ELISA技術(shù)的延伸和發(fā)展。由于游離的循環(huán)抗體或CK的
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)操作中常見問題明細(xì)2015/03/05
血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集,應(yīng)留意避免溶血,紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)開釋出具有過氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP為標(biāo)記的ELISA測定中,溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異性顯色。如在冰箱中保留過久,其中的可發(fā)生聚合,在間接法ELISA中可使本底加深。本文將敘述板式ELISA試劑盒各個(gè)操縱步驟的留意要點(diǎn),珠式、管式及磁性球ELSIA,國外試劑均與特殊儀器配合應(yīng)用,嚴(yán)格遵照劃定操縱,必能得出正確的結(jié)果。加樣時(shí)應(yīng)將所加物加在LEISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并留意不可濺出,不可產(chǎn)氣憤泡。有此測定(如間接法ELISA)需
2015年實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)與ELISA試劑盒質(zhì)量高低取決關(guān)系2015/03/02
標(biāo)準(zhǔn)ELISA試劑盒質(zhì)量高低取決于哪兩點(diǎn)?標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清為什么需要更多的呵護(hù),它的質(zhì)量高低取決于那兩個(gè)因素,下面詳細(xì)介紹。*、標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清使用需更多的呵護(hù)清目前一般主要是用作細(xì)胞培養(yǎng),在這個(gè)過程中zui為重要的就是保證培養(yǎng)不受污染,有時(shí)候需要一定的滅活處理。在對胎牛血清滅活這個(gè)問題中很多人存在不同的見解。專家認(rèn)為,ELISA試劑盒在生產(chǎn)的過程中很容易有細(xì)菌殘留很容易造成培養(yǎng)樣本的污染;在對胎牛血清進(jìn)行滅活的時(shí)候稍微操作不當(dāng)很容易將血清中的營養(yǎng)物質(zhì)殺死,反而對實(shí)驗(yàn)沒有益處,只要選擇質(zhì)量信得過的廠家的
ELISA試劑盒免疫酶技術(shù)的優(yōu)勢2015/02/26
ELISA試劑盒免疫酶技術(shù)是什么?免疫酶技術(shù)就是用酶(如辣根過氧化物酶)標(biāo)記已知抗體(或抗原),然后與組織標(biāo)本在一定條件下反應(yīng),如果組織中含有相應(yīng)抗原(或抗體),抗原抗體相互結(jié)合形成的復(fù)合物中所帶酶分子遇到底物時(shí),能催化底物水解、氧化或還原,產(chǎn)生顯色反應(yīng),這樣就可以識別出標(biāo)本抗原(抗體)分布的位置和性質(zhì),通過圖像分析并可達(dá)到定量的目的。ELISA試劑盒免疫酶技術(shù)與免疫熒光技術(shù)免疫熒光技術(shù)雖已廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)的研究與診斷,但是熒光抗體染色標(biāo)本不能長期保存,對組織細(xì)胞的細(xì)微結(jié)構(gòu)分辨不清,免疫酶技術(shù)則
ELISA試劑盒醫(yī)學(xué)研究用途2015/02/23
臨床診斷由于生命科學(xué)面廣、發(fā)展快,因此該類試劑品種繁多、性質(zhì)復(fù)雜。主要有色譜試劑、離心分離試劑、免疫試劑、ELISA試劑盒標(biāo)記試劑和致癌物質(zhì)、殺蟲劑、培養(yǎng)劑、緩沖劑、蛋白質(zhì)和核酸沉淀劑、臨床診斷試劑、染色劑、抗氧化劑、防霉劑、去垢劑和表面活性劑、生化質(zhì)控品試劑、分離材料等等。ELISA試劑盒是:又叫做酶聯(lián)免疫試劑盒,自從60-70年代ELISA試劑盒問世以來,得到科研檢測工作者的認(rèn)可和推崇。目前在中國和歐美都有廣泛的使用。尤其zui近十幾年,國產(chǎn)ELSIA試劑盒在中國的長足發(fā)展,雖然和進(jìn)口ELI
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