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2019
02-18

透析袋分子量的選擇如何選擇合適的透析袋
透析是一個簡單的擴(kuò)散過程，溶質(zhì)中小分子物質(zhì)從高濃度溶液通過半透性膜擴(kuò)散到低濃度溶液中，直至滲透壓達(dá)到平衡。由于多孔膜的選擇性，使得溶質(zhì)中小分子物質(zhì)可以通過，而較大物質(zhì)則被截留，從而分離出不同大小分子量的物質(zhì)，依據(jù)分子量大小截留，可用于分離工藝，改變或控制透析的條件，可在多種透析應(yīng)用中得到預(yù)期效果，通過截留分子量（MWCO）可使目標(biāo)分子得到分離。所以透析袋分子量的選擇就決定了實驗的成敗。這篇文章就詳細(xì)介紹了如何選擇合適的透析袋。透析膜的材質(zhì)透析膜可用動物膜和玻璃紙等，但用的多的還是用纖維素制成的透
2019
02-18

透析袋的使用方法
透析只需要使用的半透膜即可完成。通常是將半透膜制成袋狀，這種由半透膜制成的袋狀容器即透析袋。將生物大分子樣品溶液置入袋內(nèi)，將此透析袋浸入水或緩沖液中，樣品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋內(nèi)，而鹽和小分子物質(zhì)不斷擴(kuò)散透析到袋外，直到袋內(nèi)外兩邊的濃度達(dá)到平衡為止。保留在透析袋內(nèi)未透析出的樣品溶液稱為“保留液”，袋（膜）外的溶液稱為“滲出液”或“透析液”。透析袋預(yù)處理：透析袋一般制成管狀，其扁平寬度為16mm～50mm不等。為防干裂，已用10％的甘油處理過，并含有極微量的硫化物、重金屬和一些具有
2018
07-12

培養(yǎng)基的配置原則
1、選擇適宜的營養(yǎng)物質(zhì)總體而言，所有微生物生長繁殖均需要培養(yǎng)基含有碳源、氮源、無機(jī)鹽、生長因子、水及能源，但由于微生物營養(yǎng)類型復(fù)雜，不同微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的需求是不一樣的，因此首先要根據(jù)不同微生物的營養(yǎng)需求配制針對性強(qiáng)的培養(yǎng)基。自養(yǎng)型微生物能從簡單的無機(jī)物合成自身需要的糖類、脂類、蛋白質(zhì)、核酸、維生素等復(fù)雜的有機(jī)物，因此培養(yǎng)自養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基*可以(或應(yīng)該)由簡單的無機(jī)物組成。例如，培養(yǎng)化能自養(yǎng)型的氧化硫硫桿菌(Thiobacillusthiooxdans)的培養(yǎng)基組成見表3.9。在該培養(yǎng)基配制
2017
10-10

蛋白電泳 SDS-PAGE及WESTERN BLOT
蛋白電泳SDS-PAGE原理SDS是一種陰離子表面活性劑，能打斷蛋白質(zhì)的氫鍵和疏水鍵，并按一定的比例和蛋白質(zhì)分子結(jié)合成復(fù)合物，使蛋白質(zhì)帶負(fù)電荷的量遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過其本身原有的電荷，掩蓋了各種蛋白分子間天然的電荷差異。因此，各種蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物在電泳時的遷移率，不再受原有電荷和分子形狀的影響，而只是棒長的函數(shù)。這種電泳方法稱為SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳（簡稱SDS—PAGE）。實驗使用過程中，還加入DTT或者巰基乙醇，以打開蛋白間的二硫鍵，破壞蛋白質(zhì)的四級結(jié)構(gòu)。SDS—PAGE常采用垂直板不連續(xù)系統(tǒng)（
2017
09-25

蛋白質(zhì)含量測定法
蛋白質(zhì)含量測定法，是生物化學(xué)研究中常用、基本的分析方法之一。目前常用的有四種古老的經(jīng)典方法，即定氮法，雙縮尿法（Biuret法）、Folin－酚試劑法（Lowry法）和紫外吸收法。另外還有一種近十年才普遍使用起來的新的測定法，即考馬斯亮藍(lán)法（Bradford法）。其中Bradford法和Lowry法靈敏度高，比紫外吸收法靈敏10～20倍，定氮法雖然比較復(fù)雜，但較準(zhǔn)確，往往以定氮法測定的蛋白質(zhì)作為其他方法的標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)。值得注意的是，這后四種方法并不能在任何條件下適用于任何形式的蛋白質(zhì)，因為一種蛋白
2017
09-18

脫落酸的原理及配制方法
脫落酸是植物體內(nèi)產(chǎn)生的一種抑制植物生長發(fā)育的倍半萜類的植物激素。脫落酸有調(diào)節(jié)蒸騰的作用。此外，脫落酸還有抑制營養(yǎng)器官的生長，促進(jìn)葉片等器官的衰老和棉花幼果的脫落等作用。脫落酸在植物界廣泛分布，它抑制種子的萌發(fā)，調(diào)節(jié)芽的休眠，促進(jìn)離層形成與器官的衰老、脫落。脫落酸的原理：脫落酸分子式是C15H20O4，分子量是264.31，PKa4.5，難溶于水或苯，易溶于甲醇、丙酮、乙醇、乙酸乙酯或堿性水溶液。它含有一個不對稱的碳原子(C-1′)，形成兩種光學(xué)異構(gòu)體。天然ABA呈現(xiàn)右旋旋光性，標(biāo)志為(+)-AB
2017
08-30

生化試劑的種類介紹
生化試劑,是研究生物的重要工具。大致有以下種類：電泳試劑、色譜試劑、離心分離試劑、免疫試劑、標(biāo)記試劑、組織化學(xué)試劑、透變劑和致癌物質(zhì)、殺蟲劑、培養(yǎng)基、緩沖劑、電鏡試劑、蛋白質(zhì)和核酸沉淀劑、縮合劑、超濾膜、臨床診斷試劑、染色劑、抗氧化劑、防霉劑、去垢劑和表面活性劑、生化標(biāo)準(zhǔn)品試劑、分離材料等等。舉例說明幾種：1.臨床診斷試劑主要供醫(yī)療系統(tǒng)中的病理診斷、生化診斷、液晶診斷、同位素診斷與一般化學(xué)診斷等診斷檢查中所用的一大類化學(xué)試劑。2.工業(yè)用化學(xué)品包括試制開發(fā)的工業(yè)用化學(xué)品，有四千種以上，還在不斷增加
2017
08-23

標(biāo)準(zhǔn)品和對照品的概念區(qū)分
標(biāo)準(zhǔn)品系指用于生物檢定、抗生素或生物藥品中含量或效價測定的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。對照品系指用于生物制品理化等方面測定的特定物質(zhì)，由生產(chǎn)單位采用與制品生產(chǎn)工藝相同的方法制備。對照品應(yīng)盡可能與制品原液配方一致，穩(wěn)定性較差的，可加不含對測定有干擾物質(zhì)的適宜的穩(wěn)定劑。對照品由國家藥品檢定機(jī)構(gòu)審查認(rèn)可，其標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)不低于制品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。國家藥品標(biāo)準(zhǔn)品、對照品系指國家藥品標(biāo)準(zhǔn)中用于鑒別、檢查、含量測定、雜質(zhì)和有關(guān)物質(zhì)檢查等標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，它是國家藥品標(biāo)準(zhǔn)不可分割的組成部分。國家藥品標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)是國家藥品標(biāo)準(zhǔn)的物質(zhì)基礎(chǔ)，它是用來檢查藥
2017
08-16

Mpipet系列智能移液管控制器的優(yōu)勢
智能移液管控制器Mpipette貨號規(guī)格品牌單位價格（元）6013110.1-10ml中文操作羅恩支3600.00產(chǎn)品優(yōu)勢:1.操作空間減少75%5%針對生物安全柜空間狹小的問題，減少移液管操作空間，優(yōu)化傳統(tǒng)輔助吸液器U型結(jié)構(gòu)的不足，智能移液管控制器創(chuàng)新使用V型旋轉(zhuǎn)結(jié)構(gòu)，大程度減少空間浪費(fèi)。移液管接口可360°立體旋轉(zhuǎn)，移液角度隨意調(diào)整，即使在狹窄的安全柜內(nèi)也能自如操作。2.5種模式，移液Mpipe具備自由模式、定量模式、分液模式、多級抽樣、混合模式。*支可以設(shè)置吸液、分液參數(shù)的移液管控制器。3
2017
07-28

移液器的兩種移液方法
移液之前，要保證移液器、槍頭和液體處于相同溫度。吸取液體時，移液器保持豎直狀態(tài)，將槍頭插入液面下2－3毫米。在吸液之前，可以先吸放幾次液體以潤濕吸液嘴（尤其是要吸取粘稠或密度與水不同的液體時）。兩種移液方法：一是前進(jìn)移液法。用大拇指將按鈕按下至*停點，然后慢慢松開按鈕回原點。接著將按鈕按至*停點排出液體，稍停片刻繼續(xù)按按鈕至第二停點吹出殘余的液體。后松開按鈕。二是反向移液法。此法一般用于轉(zhuǎn)移高粘液體、生物活性液體、易起泡液體或極微量的液體，其原理就是先吸入多于設(shè)置量程的液體，轉(zhuǎn)移液體的時候不用吹
2017
07-13

馬鈴薯淀粉的作用及培養(yǎng)基的配置
馬鈴薯淀粉是由土豆，包括土豆皮，煮熟后，干燥并精細(xì)磨碎。馬鈴薯淀粉應(yīng)用廣泛，尤其是在食品市場上成為國內(nèi)外淀粉深加工行業(yè)的產(chǎn)品。但是我們今天要說的是在實驗室中，馬鈴薯淀粉又有哪些作用呢？馬鈴薯淀粉的作用：PDA培養(yǎng)基是馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基的簡稱，其做法是馬鈴薯去皮，切成塊加水，煮沸30min（注意火力的控制，可適當(dāng)補(bǔ)水），用紗布過濾，濾液加糖，補(bǔ)足水至100ml，裝入三角瓶，高溫蒸汽滅菌。馬鈴薯培養(yǎng)基可提供微生物培養(yǎng)所需要的碳源、氮源、生長因子（維生素）還有無機(jī)鹽。宜培養(yǎng)酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌
2017
07-13

索萊寶抗體新品發(fā)布（四）
YAP1AntibodyRabbitpolyclonal丨CatalogNo:K000334PApplications:WBIHCIFIPFC丨Reactivity:HumanMouseWesternblotanalysisofextractsofvariouscells,usingYAP1antibody.ImmunofluorescenceanalysisofA549cellsusingYAP1antibody.Blue:DAPIfornuclearstaining.Immunoprecip
2017
07-06

吖啶橙染色原理
吖啶橙熒光染色法基本原理：吖啶橙（acridineorange，AO）是一種常用熒光染料，吖啶橙與原代細(xì)胞內(nèi)的DNA、RNA都有親和力，但有一定的特異性，即結(jié)合后發(fā)不同顏色的熒光，DNA呈亮綠色，而RNA呈橘紅色至火紅色。此法簡便快捷，既可染活原代細(xì)胞又可染固定原代細(xì)胞。用于直接染色觀察活原代細(xì)胞或固定染色觀察原代細(xì)胞均可。吖啶橙對活原代細(xì)胞毒性小，配成1×10-4-2×10-4可用于直接染色活原代細(xì)胞和進(jìn)行熒光顯微鏡觀察，但不持久，用固定染色觀察法效果更好。材料：1.蓋片單層培養(yǎng)原代細(xì)胞；2.
2017
06-21

佛波酯PMA應(yīng)用實例（僅作參考）
PMA（同義名：TPA）是一種廣泛用于體內(nèi)外實驗的佛波酯(phorbolester)PKC激活劑。PMA結(jié)合PKC(Ki=2.6nM)并激活其功能，在細(xì)胞和組織中都呈現(xiàn)出極其廣的抑制譜。PMA可以抑制Fas誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡，但又可以誘導(dǎo)HL-60細(xì)胞的凋亡。PMA在肝細(xì)胞中可以誘導(dǎo)iNOS的表達(dá)。PMA可以增強(qiáng)forskolin誘導(dǎo)的cAMP形成。PMA是一種的腫瘤促進(jìn)劑，可以促進(jìn)小鼠皮膚瘤的形成。盡管PMA毒性較強(qiáng)，但是在人體內(nèi)仍顯示出抗白血病和抗中性白細(xì)胞減少的活性。應(yīng)用實例（僅作參考）：為研
2017
06-21

DNA聚合酶和RNA聚合酶的異同點有哪些
DNA聚合酶是細(xì)胞復(fù)制DNA的重要作用酶，目前為止已發(fā)現(xiàn)有5種DNA聚合酶，分別為DNA聚合酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ，都與DNA鏈的延長有關(guān)。DNA聚合酶RNA聚合酶的相同點：都能以DNA為模板，從5'向3'進(jìn)行核苷酸或脫氧核苷酸的聚合反應(yīng)。DNA聚合酶RNA聚合酶的不同點：1、作用底物不同。RNA聚合酶底物是NTP；DNA聚合酶底物是dNTP。2、RNA聚合酶作用不需要引物，而DNA聚合酶作用需要引物。3、RNA聚合酶本身具有一定的解旋功能，而DNA聚合酶沒有，當(dāng)需要解開雙鏈的時候要解旋酶和拓?fù)洚?
2017
06-16

LB培養(yǎng)基和MS培養(yǎng)基的比較與區(qū)別
我們都只lb培養(yǎng)基與ms培養(yǎng)基成分和用途都有很大不同。那么他們區(qū)別到底在哪呢，下面就給你詳細(xì)介紹。一、LB培養(yǎng)基LB一般被解釋為Luria-Bertani培養(yǎng)基，根據(jù)其發(fā)明人貝爾塔尼（GiuseppeBertani）的說法，這個名字來源于英語的lysogenybroth，即溶菌肉湯。1．用途一般用該培養(yǎng)基來預(yù)培養(yǎng)菌種，使菌種成倍擴(kuò)增，達(dá)到使用要求，可分為液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基。2．LB培養(yǎng)基的配方胰蛋白胨（Tryptone)）10g/L國產(chǎn)的胰蛋白胨一般是以新鮮牛肉和牛骨經(jīng)胰酶消化而得到，與進(jìn)口
2017
06-15

索萊寶抗體新發(fā)布（NFKB1 Antibody）
NFKB1AntibodyRabbitPolyclonal|Catalognumber:K002146PApplications:WBIHCIFIP|Speciesspecificity:HumanWesternblotanalysisofextractsofvariouscelllines,usingNFKB1antibody.Immunoprecipitationanalysisof150ugextractsofMCF-7cellsusing3ugNFKB1antibody.Westernb
2017
04-26

原位雜交實驗操作步驟
一質(zhì)粒制備1質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化和擴(kuò)增1.1制備XL1-Blue感受態(tài)細(xì)菌1.取400uLXL1-Blue菌種加入到含200mllb培養(yǎng)基的錐形瓶中，37℃、100rpm培養(yǎng)4h，離心，倒置，以冰冷的0.1mol/LCaCl_2重懸細(xì)菌，冰浴30min，離心，棄上清，倒置，再加4ml(含15%甘油)冰冷的CaCl2重懸細(xì)菌，分裝(200μ/tube)，-80℃保存。2.轉(zhuǎn)化：在冰浴中將1管XL1-Blue感受態(tài)菌解凍，將濃度為2ng/μ1的質(zhì)粒dna4μ1加入到8Oμ1感受態(tài)菌中。3.輕輕搖勻，冰浴30m
2017
04-19

瓊脂糖凝膠中回收基因片段
實驗原理限制性內(nèi)切酶切割后的DNA*片斷經(jīng)過電泳后，按分子量大小被分開，排列在瓊脂糖凝膠中，可以將特定的某條DNA帶所在的凝膠切下來，加熱或用特殊的試劑熔解凝膠，使DNA溶回到溶液中，再經(jīng)過乙醇沉淀或過柱即可獲得目的DNA酶切片段。實驗試劑1.電泳緩沖液2.熒光染料3.電泳級瓊脂糖粉4.10′加樣緩沖液5.DNA分子量標(biāo)準(zhǔn)(DL2000)6.DNA凝膠回收試劑盒實驗設(shè)備1.旋渦混合器2.微量移液取樣器3.移液器吸頭4.1.5ml微量離心管5.雙面微量離心管架6.臺式離心機(jī)7.瓊脂糖凝膠電泳系統(tǒng)8
2017
04-06

基因診斷的概念、常用技術(shù)與應(yīng)用
基因診斷的概念一、基本概念：1．人類的絕大多數(shù)疾病都與基因有關(guān)，基因變異引起疾病兩種類型：1)內(nèi)源基因變異：由于先天遺傳和后天內(nèi)外環(huán)境因素的影響，人類的基因結(jié)構(gòu)及表達(dá)的各個環(huán)節(jié)都可發(fā)生異常，從而導(dǎo)致疾病。分基因結(jié)構(gòu)突變和表達(dá)異常。2)外源基因的入侵：各種病原體感染人體后，其特異的基因被帶入人體并在體內(nèi)增殖引起各種疾病?；蚋淖円鸶鞣N表型改變，從而引起疾病，從基因水平探測分析病因和疾病的發(fā)病機(jī)制，并采用針對性的手段矯正疾病是近年基礎(chǔ)和臨床的方向。２．基因診斷：利用現(xiàn)代生物學(xué)和分子遺傳學(xué)的技術(shù)方法

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