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研域（上海）化學(xué)試劑有限公司
中級會員 | 第19年
在ELISA試劑盒實驗中Z可能出現(xiàn)問題以及解決方法2013/11/20
我們常說到的ELISA試劑盒是酶聯(lián)接免疫吸附劑測定的簡稱，它是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來的一種免疫酶技術(shù)。ELISA試劑盒技術(shù)自70年代初問世以來，發(fā)展十分迅速，到目前為止已經(jīng)被廣泛用于生物學(xué)和醫(yī)學(xué)科學(xué)的許多領(lǐng)域之中。而在ELISA試劑盒實驗中常常會出現(xiàn)一些問題，那么今天恒遠elisa試劑盒供應(yīng)商為大家解說的就是在ELISA試劑盒實驗中zui可能出現(xiàn)問題以及解決方法。在試驗中可能會出現(xiàn)所有孔都沒有顯色，那么原因就有可能是微孔加入抗體后，洗板不*，微孔中存在游離的抗體。也可能是用錯試劑。
ELISA試劑盒蛋白質(zhì)純化與結(jié)晶的培養(yǎng)原理2013/11/19
ELISA試劑盒獲得蛋白質(zhì)的晶體結(jié)構(gòu)的*個瓶頸，就是制備大量純化的蛋白質(zhì)（10mg），其濃度通常在10mg/ml以上，并以此為基礎(chǔ)進行結(jié)晶條件的篩選。運用重組基因的技術(shù)，將特定基因以選殖（clone）的方式嵌入表現(xiàn)載體（expressionvector）內(nèi)，此一載體通常具有易于調(diào)控的特性。之后再將帶有特定基因的載體送入可快速生長的菌體中，如大腸桿菌（Escherichiacoli），在菌體快速生長的同時，也大量生產(chǎn)表現(xiàn)載體上的基因所解譯出之蛋白質(zhì)。一般而言純度越高的蛋白質(zhì)比較有機會形成晶體，因此
用elisa試劑盒檢測樣本的原理和步驟2013/11/18
1.elisa試劑準(zhǔn)備：所有試劑都必須在使用前達到室溫，使用后請立即按照說明書要求保存。實驗操作中必須使用一次性吸頭，避免交叉污染。2．加樣：加樣時，要控制加樣速度，避免*孔與zui后一孔之見的時間間隔過大，否則將會導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時間，從而影響實驗的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性；一般加樣時間控制在10分鐘內(nèi)，如果樣本數(shù)量過多，可使用多道移液器。3.孵育：樣品要在密閉的容器內(nèi)進行孵育，嚴(yán)格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進行。4.洗滌：洗滌過程中反應(yīng)孔中的殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干，同時要消除板底殘留的
ELISA試劑盒實驗重復(fù)性差的原因分析及解決方法2013/11/15
1、ELISA試劑盒樣品數(shù)量不一，加樣時間長短不一；重復(fù)某一樣品時，加樣時間盡可能與*次接近。2、樣品加入后未混勻；加樣后在混勻器上充分混勻。3、酶標(biāo)儀濾光片不對或輸入波長不對；TMB顯色用450/630波長.4、酶標(biāo)儀測定重復(fù)性差；校對酶標(biāo)儀。5、洗滌不正確；洗滌液注滿各孔但不要溢出。洗板時反應(yīng)板面向下，垂直用力甩凈內(nèi)容物（可多甩幾次），在干凈、無或少塵的吸水材料上拍干。洗板機洗板時不應(yīng)有堵孔，洗滌應(yīng)充分。6、溫育條件不一致（一次用水育，一次用恒溫箱）恒溫箱溫育較水浴顯色深，OD值高出0.1-
酶聯(lián)免疫試劑盒的基本原理2013/11/14
酶聯(lián)免疫試劑盒的基本原理①使抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面，并保持其免疫活性。②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標(biāo)抗原或抗體，這種酶標(biāo)抗原或抗體既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在測定時，把受檢標(biāo)本（測定其中的抗體或抗原）和酶標(biāo)抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)分開，zui后結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)顏
ELISA試劑盒實驗操作中常見問題明細2013/11/13
由于ELISA試劑盒具有靈敏度較高、特異性好的特點，已廣泛應(yīng)用于各種傳染性疾病的篩查如肝炎、愛滋、優(yōu)生優(yōu)育等。雖然洗板只是ELISA實驗重要環(huán)節(jié)中的一個，但作為專業(yè)的洗板機生產(chǎn)廠家，我們必須對影響ELISA實驗結(jié)果各因素有一定的認(rèn)識。的試劑，良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠的必要條件。如不注意，就易出現(xiàn)白板、花板、色弱和假陽性等現(xiàn)象。尤其是花板現(xiàn)象（就是空白、陰性、陽性對照以及室內(nèi)質(zhì)控孔結(jié)果正常，而標(biāo)本孔的OD值卻明顯偏高）是各個廠家洗板機調(diào)試中經(jīng)常遇到的問題?，F(xiàn)將ELIS
ELISA試劑盒液體標(biāo)本的收集2013/11/12
ELISA試劑盒液體類標(biāo)本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。1、血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。2、血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。3、尿液：[1]用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存
ELISA的概念、原理、操作步驟2013/11/08
ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測定（enzyme-LinkedImmunosorbnentAssay）的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來的一種免疫酶技術(shù)。此項技術(shù)自70年代初問世以來，發(fā)展十分迅速，目前已被廣泛用于生物學(xué)和醫(yī)學(xué)科學(xué)的許多領(lǐng)域。（一）原理ELISA試劑盒是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)，將抗原、牽9體的特異性反應(yīng)與酶對底物的催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術(shù)。由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行，每加入一種試劑孵育后，可通過洗滌除去多余的游離
科學(xué)家發(fā)現(xiàn)人ELISA試劑盒促進癌癥發(fā)展機制2013/11/06
近日，中科院上海生科院營養(yǎng)科學(xué)研究所的科學(xué)家在一項研究中，揭示了人ELISA試劑盒在癌癥發(fā)生發(fā)展中新的功能和機制。相關(guān)研究成果日前發(fā)表于美國《癌癥研究》雜志。腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6（TRAF6），是腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子家族的成員之一，zui初被發(fā)現(xiàn)于白細胞介素1（IL-1）及CD40信號傳導(dǎo)途徑。作為泛素連接酶，人ELISA試劑盒可以對其底物進行Lys63連接的多聚泛素化修飾，進而促進其底物激酶如TAK1和PKB（Akt）的活性，在先天和后天免疫、骨代謝以及淋巴結(jié)發(fā)育中發(fā)揮重要作用。近來
ELISA試劑盒在選樣以及保存方法2013/11/05
臨床檢驗中常用的標(biāo)本一般包括血液（指血，靜脈血），方法和保存都有一定的要求，下面和大家介紹幾種，zui常用的方法，希望對大家有所幫助．一、ELISA試劑盒尿液標(biāo)本同血標(biāo)本一樣，尿液標(biāo)本受飲食、運動、藥物量等因素的影響也較大，特別是飲食的影響，故一般來說晨尿優(yōu)于隨機尿。晨尿是指清晨起床后的*次尿標(biāo)本，較濃縮和酸化，有形成分（如血細胞，上皮細胞，管形）相對集中便于觀察。隨機尿即隨意一次尿，留取方便，但受飲食、運動、藥物影響較甚，易于出現(xiàn)假陽性和假陰性結(jié)果，如飲食性蛋白尿，飲食性糖尿，維生素C干擾潛血
ELISA試劑盒實驗中加樣注意事項2013/11/04
目前臨床上使用血清標(biāo)本測定的標(biāo)志物一般有傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤標(biāo)志物、激素、特種蛋白、細胞因子和治療藥物等。用于傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤標(biāo)志物和特種蛋白等的檢測的血清標(biāo)本的收集則沒有時間和體位方面的影響，用于ELISA試劑盒測定的臨床標(biāo)本zui為常用的是血清（漿），有時由于特定的檢測目的，也用到唾液、腦脊液、尿液、糞便等標(biāo)本。對用于激素和治療藥物測定的血清標(biāo)本的收集，要留意收集時間甚或體位有可能會對測定結(jié)果產(chǎn)生影響。再如治療藥物的檢測，應(yīng)根據(jù)藥代動力學(xué)選擇服藥后的zui適時間抽血檢
小鼠ELISA試劑盒中常見問題及解決方法經(jīng)驗總結(jié)2013/11/01
下面分析小鼠ELISA試劑盒試驗操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法1.選擇試劑選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。2加樣可能原因：①血清或血漿標(biāo)本分離不好即進行加樣;②手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長（特別是室內(nèi)溫度較高時）;③加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。解決辦法：①標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒
人ELISA試劑盒檢測發(fā)現(xiàn)過度清潔反而可能有害健康2013/10/31
父母總是教育孩子要講衛(wèi)生，要注意清潔。人ELISA試劑盒檢測發(fā)現(xiàn)，皮膚表面一些細菌有助阻止發(fā)炎，過度清潔反而可能有害健康。阻止發(fā)炎研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)皮膚破損后，皮膚表面一種常見細菌——葡萄球菌在發(fā)炎進程中關(guān)鍵步驟上發(fā)揮阻礙作用，防止人體免疫反應(yīng)過度引起大范圍發(fā)炎，有助皮膚傷口愈合。人ELISA試劑盒檢測對老鼠和人類細胞進行測試后發(fā)現(xiàn)，這種“好”細菌能夠產(chǎn)生一種名為“脂磷壁酸”的分子，作用于表皮角化細胞，阻止角化細胞加劇發(fā)炎程度。英國廣播公司（ＢＢＣ）23日援引加洛的話報道，這項研究揭示了傷口愈合機制中
酶聯(lián)免疫試劑盒的基本原理2013/10/30
酶聯(lián)免疫試劑盒的基本原理①使抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面，并保持其免疫活性。②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標(biāo)抗原或抗體，這種酶標(biāo)抗原或抗體既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在測定時，把受檢標(biāo)本（測定其中的抗體或抗原）和酶標(biāo)抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)分開，zui后結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)顏
脂肪細胞延長人造血干細胞在體外的存活時間2013/10/29
利用人造血干細胞（humanhematopoieticstemcells,hHSCs）治療一系列疾病所面臨的一個主要的障礙就是科學(xué)家們很難在體外培養(yǎng)它們.它們在體外要么很快死亡,要么分化為其他類型的細胞.在一項新的研究中,來自美國塔夫斯大學(xué)工程學(xué)院生物醫(yī)學(xué)工程系的DeanLiangGlettig和DavidKaplan通過一系列實驗證實含有脂肪細胞的飼養(yǎng)層（feederlayer）能夠成功地促進體外培養(yǎng)的hHSCs長期存活.相關(guān)研究結(jié)果于2013年3月12日在線發(fā)表在BioResearchOpe
現(xiàn)貨大鼠血小板生成素（TPO）ELISA試劑盒說明書2013/10/28
現(xiàn)貨大鼠血小板生成素（TPO）ELISA試劑盒說明書是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）.已知Apelin-17濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進行檢測。先將Apelin-17和生物素標(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中Apelin-17的濃度呈比例關(guān)系。安全性1、避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。2、實驗中不要吃喝、抽
人ELISA試劑盒實驗禁忌2013/10/25
人ELISA試劑盒實驗禁忌1．人ELISA試劑盒從冷躲環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝進密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其正確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)目多，推薦使用排槍加樣。4．人ELISA試劑盒如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值），請先將樣本稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以稀釋
小鼠ELISA試劑盒具體步驟解析2013/10/24
小鼠ELISA試劑盒具體步驟解析（1）小鼠ELISA試劑盒將抗原抗體反應(yīng)固相化：即試驗中的包被環(huán)節(jié)，使抗原或抗體吸附于固相載體表面。其機制可能是聚苯乙烯表面間的疏水基團可以無選擇性地吸附蛋白分子。此物理性吸附不破壞蛋白分子結(jié)構(gòu)，保持其生物學(xué)特性和免疫學(xué)活性；（2）封閉：固相吸附蛋白是非特異性的，在包被目的免疫蛋白后，未吸附蛋白的固相表面仍然有吸附其它蛋白的能力，為了保障抗原抗體反應(yīng)的特異性，因此，包被剩余的固相表面應(yīng)該用抗原抗體反應(yīng)無關(guān)蛋白封閉。一般認(rèn)為牛血清白蛋白是zui為理想的封閉劑，也可用
ELISA檢測原理2013/10/23
ELISA檢測試劑盒應(yīng)用定性夾心免疫檢測技術(shù)，用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條，這些多肽是中國型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很強的肽段，分別來自于該毒株的開放閱讀框2和開放閱讀框3。將樣品或標(biāo)準(zhǔn)品加入孔中并孵育，如果其中存在HEVIgM抗體，這些抗體就會與HEV的多肽抗原結(jié)合，并固定在上面，洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP（辣根過氧化物酶）酶結(jié)合物，ELISA試劑盒經(jīng)第二次孵育后，酶結(jié)合物就會與*次孵育結(jié)合上的HEVIgM抗體相結(jié)合，洗板除去未結(jié)合
小鼠白介素8（IL-8/CXCL8）elisa試劑盒使用說明書2013/10/22
小鼠白介素8（IL-8/CXCL8）elisa試劑盒使用說明書Elisakit規(guī)格：48孔配置/96孔配置標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液：1.5ml×1瓶酶標(biāo)試劑：3ml×1瓶（48）/6ml×1瓶（96）小鼠白介素8（IL-8/CXCL8）elisa試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用計算：以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以
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