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小鼠脂聯(lián)素（ADP）ELISA試劑盒說明書2012/01/05

小鼠脂聯(lián)素（ADP）ELISA試劑盒說明書本試劑僅供研究使用目的：本試劑盒用于測定小鼠血清，血漿及相關液體樣本中脂聯(lián)素（ADP）的含量。實驗原理：本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠脂聯(lián)素（ADP）水平。用純化的小鼠脂聯(lián)素（ADP）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入脂聯(lián)素（ADP），再與HRP標記的脂聯(lián)素（ADP）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的。顏色的深淺和樣品中的

原位雜交2011/12/30

原位雜交基本定義將標記的核酸探針與細胞或組織中的核酸進行雜交，稱為原位雜交！使用DNA或者RNA探針來檢測與其互補的另一條鏈在細菌或其他真核細胞中的位置。RNA原位雜交1、RNA原位核酸雜交又稱RNA組織化學或RNA。該技術是指運用cRNA或寡核苷酸等探針檢測細胞和組織內(nèi)RNA表達的一種技術。2、基本原理是：在細胞或組織結(jié)構保持不變的條件下，用標記的已知的RNA核苷酸片段，按核酸雜交中堿基配對原則，與待測細胞或組織中相應的基因片段相結(jié)合（雜交），所形成的雜交體（Hybrids）經(jīng)顯色反應后在光學

技術生物所利用離子束誘變技術破解水稻秸稈還田難題2011/12/28

技術生物所利用離子束誘變技術破解水稻秸稈還田難題11月10日，晚秋微風，中科院合肥物質(zhì)科學研究院技術生物所南崗實驗基地，離子束誘變的脆稈水稻秸稈還田試驗正在進行中，一大片水稻的秸稈在收割機身后“粉身碎骨”，地面上只留下一排排稻茬。參加試驗的科研人員相互祝賀成功，圍觀的農(nóng)民高興地說：真得可以不用燒秸稈了！作物秸稈還田可以讓有效營養(yǎng)元素返回土壤，提高土壤肥力，是農(nóng)業(yè)部重點推廣農(nóng)業(yè)新技術之一。但由于作物秸稈柔韌，機械難以粉碎，機收后秸稈過長，雜余成堆，耕作時不易翻壓進土壤，造成秸稈長期不腐解，直接影響

培養(yǎng)基的質(zhì)量判斷2011/12/23

培養(yǎng)基的質(zhì)量判斷1．外型顏色、粉末細度都應該均勻。2．溶解性培養(yǎng)基能夠*溶解，這樣可以避免培養(yǎng)基內(nèi)營養(yǎng)成分的流失。3．pH值pH值的測定也可以檢查培養(yǎng)基的批間差異。4．水分培養(yǎng)基的營養(yǎng)成份很豐富，利于微生物的滋長，因此水分的含量控制可以延長有效期。5．冰點滲透壓細胞必須生活在合適的滲透壓環(huán)境中；同時滲透壓值的測定也可以檢查培養(yǎng)基的批間差異。6．菌落總數(shù)粉末培養(yǎng)基不是無菌制劑，培養(yǎng)基本身的營養(yǎng)成分很豐富，容易滋生微生物，因此菌落的控制可以延長有效期7．細胞生長試驗可檢查細胞培養(yǎng)基是否有促生長的能力

培養(yǎng)基的 分類方式2011/12/23

培養(yǎng)基的分類方式一.按成分的不同分1．天然培養(yǎng)基主要成分是復雜的天然有機物質(zhì)，如馬鈴薯、豆芽汁、牛肉膏、蛋白胨、血清等。這些復雜天然有機物質(zhì)的成分不*了解，每次所用的原料，其中各成分的數(shù)量也不恒定。這類培養(yǎng)基是實驗室常用的培養(yǎng)基，例如牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、馬鈴薯培養(yǎng)基等。2．合成培養(yǎng)基用化學成分*了解的純試劑配制而成的培養(yǎng)基，如高氏1號培養(yǎng)基，查氏培養(yǎng)基等。一般用于營養(yǎng)代謝、分類鑒定、菌種選育、遺傳分析等。二．按培養(yǎng)基的物理狀態(tài)分1．固定培養(yǎng)基在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑即為固體培養(yǎng)基。實驗用的凝固劑

免疫組織化學的概念2011/12/23

免疫組織化學的概念免疫組化是利用抗原與抗體特異性結(jié)合的原理，通過化學反應使標記抗體的顯色劑（熒光素、酶、金屬離子、同位素）顯色來確定組織細胞內(nèi)抗原（多肽和蛋白質(zhì)），對其進行定位、定性及定量的研究，稱為免疫組織化學。免疫組化實驗所用的抗體有哪些？免疫組化實驗中常用的抗體為單克隆抗體和多克隆抗體。單克隆抗體是一個B淋巴細胞克隆分泌的抗體，應用細胞融合雜交瘤技術免疫動物制備。多克隆抗體是將純化后的抗原直接免疫動物后，從動物血中所獲得的免疫血清，是多個B淋巴細胞克隆所產(chǎn)生的抗體混合物。免疫組化實驗所用的

神經(jīng)科學研究中的數(shù)據(jù)處理問題2011/12/15

神經(jīng)科學研究中的數(shù)據(jù)處理問題近期美國國家科學院宣布了新增選的院士名單，其中新增院士90名，包括外籍院士18名。此次生命科學領域當選的女院士并不多，來自密歇根大學安娜堡分校的神經(jīng)科學與精神病學教授HudaAkil就是其中之一，這位科學家主要貢獻是發(fā)現(xiàn)內(nèi)源性鴉片肽的生理作用，曾經(jīng)擔任zui大神經(jīng)學會theSocietyforNeuroscience主席。近期其研究組在Science上發(fā)文，解析了神經(jīng)科學研究中的數(shù)據(jù)處理問題。據(jù)報道，對于每一個學科來說，數(shù)據(jù)的巨幅增加都具有兩方面的況味：一方面是處理數(shù)

芯片實驗室技術實現(xiàn)單細胞基因分析2011/12/15

芯片實驗室技術實現(xiàn)單細胞基因分析芯片實驗室技術實現(xiàn)單細胞基因分析點擊次數(shù)：12發(fā)布時間：2011-9-2據(jù)美國物理學家組織網(wǎng)近日報道，zui近，加拿大英屬哥倫比亞大學與英屬哥倫比亞癌癥研究所、轉(zhuǎn)化與應用基因組學中心合作，開發(fā)出一種硅酮材料的芯片實驗室技術，能讓每個細胞像彈球機里的球一樣各就各位，然后進行基因檢測。這種“單細胞基因分析”技術使基因檢測更加靈敏迅速，有助于腫瘤分析和臨床疾病的診斷。本周出版的美國《國家科學院院刊》對該芯片實驗室進行了詳細介紹。這種芯片實驗室大小跟一個9伏電池相當，能同

酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒的臨床質(zhì)量評價要點2011/12/13

ELISA試劑的臨床質(zhì)量評價ELISA試劑的評價（evaluation）分兩個方面：一是試劑本身的質(zhì)量評價，符合一定要求后才能生產(chǎn)供應；一是在臨床應用中效果的評價。以肝炎ELISA診斷試劑為例，首先必須通過中國藥品生物制品檢定，以得到生產(chǎn)的許可。檢定內(nèi)容除包裝、標簽、說明書等外，對試劑的性能，如特異性、靈敏度、精密度和線性等均需逐項檢定，通過對一系列參比品的檢測，結(jié)果符合要求者才為合格。ELISA試劑的臨床質(zhì)量評價是用該試劑對臨床樣本進行檢測，以觀察其實際應用價值。臨檢中心對乙肝ELISA診斷試

多克隆抗體的免疫電泳技術2011/12/08

多克隆抗體的免疫電泳技術【實驗原理】免疫電泳又稱為γ球蛋白電泳或免疫球蛋白電泳技術，這是一種能夠判斷血液中三種免疫球蛋白IgM,IgG,IgA含量水平的實驗方法。在這項實驗技術中，首先利用蛋白質(zhì)的分子量和所帶電荷的比值運用水平瓊脂糖凝膠電泳技術將蛋白質(zhì)進行分離，然后將特異性的抗體引入到與電泳方向平行的凹槽中，在抗原和抗體的擴散過程中，抗原和抗體適當比例的結(jié)合會導致沉淀的產(chǎn)生。0.85%鹽不僅可以終止擴散過程也可用于洗去未結(jié)合的蛋白，抗原和抗體結(jié)合所形成的沉淀線即可以肉眼觀察也可利用染色方法觀察。

多克隆抗體的概念及制備流程2011/12/08

多克隆抗體的概念及制備流程多克隆抗體科技名詞定義中文名稱：多克隆抗體英文名稱：polyclonalantibody定義1：由多個B細胞克隆所產(chǎn)生的抗體，可與不同抗原表位結(jié)合且免疫球蛋白類別各異。所屬學科：免疫學（一級學科）；免疫系統(tǒng)（二級學科）；免疫分子（三級學科）定義2：對特定抗原所產(chǎn)生的一組免疫球蛋白混合物，每種免疫球蛋白能識別抗原分子上的一個表位。所屬學科：生物化學與分子生物學（一級學科）；總論（二級學科）定義3：多種抗原表位刺激機體免疫系統(tǒng)后，機體產(chǎn)生的針對不同抗原表位的混合抗體。所屬學

培養(yǎng)用品的清洗2011/12/05

培養(yǎng)用品的清洗目前我國細胞培養(yǎng)器皿主要仍使用能反復使用的玻璃器皿，清洗的主要目的為清除雜質(zhì)和微生物，使在器皿內(nèi)不殘留任何影響細胞生長的成份。因而在組織細胞培養(yǎng)中清洗和消毒是一項極為重要的環(huán)節(jié)。在組織細胞培養(yǎng)中，體外細胞對任何有害物質(zhì)都非常敏感。微生物產(chǎn)品附帶雜物，上次細胞殘留物及非營養(yǎng)成分的化學物質(zhì)，均能影響培養(yǎng)細胞的生長。因此對新使用和重新使用的培養(yǎng)器皿都要嚴格*的清洗，且要根據(jù)器皿的組成材料不同，選擇不同的清洗方法。1、玻璃器皿的清洗組織細胞培養(yǎng)中，使用量zui大的是玻璃器皿，故工作zuiz

能影響酶免疫測定結(jié)果的標本內(nèi)源性干擾因素2011/11/29

可能影響酶免疫測定ELISA結(jié)果的標本內(nèi)源性干擾因素內(nèi)源性干擾因素一般包括類風濕因子、補體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體、因使用鼠抗體治療或診斷誘導的抗鼠Ig抗體、交叉反應物質(zhì)等。在日常的臨床血清（漿）標本中，有相當比例不同程度的含有上述各種干擾物質(zhì)，從而導致測定結(jié)果的假陽性。1．類風濕因子（rheumatoidfactors，RF）在類風濕患者、其他疾病以及正常人血清中，常含有較高或不同濃度的RF，RF一般為IgM型，亦有IgG和IgA型，RF具有與變性IgG產(chǎn)生非特異結(jié)

微量加樣器（移液器）使用的一般原則2011/11/25

微量加樣器（移液器）使用的一般原則在免疫測定及其他生物醫(yī)學研究中，加樣器的使用離不開一次性的塑料吸頭，盡管一次性塑料吸頭的使用增加了實驗費用，但降低了實驗技術人員接觸傳染性病原體及有害實驗材料如放射性核素的可能性，并且避免了吸頭多次重復使用所必需的清潔過程和腐蝕性去垢劑的使用。此外，在有些應用上，如PCR測定中，吸頭必須是一次性的，以避免潛在污染發(fā)生的可能性。加樣器根據(jù)使用的要求，也在不斷發(fā)展。如可整體高壓滅菌加樣器的出現(xiàn)。使用UV線穩(wěn)定的塑料制作加樣器對于加樣器在許多方面的應用非常重要，使得在

酶標記抗體法標記抗體的制備2011/11/22

酶標記抗體法標記抗體的制備酶標記抗體法（enzaymelabelledantibodytechnique）是用結(jié)合物將酶結(jié)合在抗體分子上，制備成酶標記抗體，通過抗原—抗體反應使抗原—抗體復合物上帶有酶分子，再借助酶對底物的特異性催化作用，在抗原—抗體反應部位形成不溶性有色產(chǎn)物，用于研究抗原物質(zhì)分布和性質(zhì)。酶標記抗體法又分為直接法和間接法，目前應用zui多的酶是辣根過氧化酶（HRP），底物是3，3’—二氨基聯(lián)苯胺（DAB）?？贵w蛋白分子與酶分子（如HRP或AKP）以一定的方式相互交換，形成酶標記抗

哺乳動物細胞的RNAi技術策略2011/11/16

哺乳動物細胞的RNAi技術策略目前RNAi技術已經(jīng)進入了生物科學研究的許多領域，成為了一種主要的生物學研究工具，發(fā)展得相當迅速，并受到了此次諾貝爾獎評審委員會的青睞，獲得2006年諾貝爾獎醫(yī)學/生理獎。然而這一才歷經(jīng)十個年頭的技術依然對于許多研究人員來說還是很陌生的，以下是有關RNAi技術在哺乳動物細胞中應用的具體設計策略，主要來自于《遺傳》雜志2005年“RNA干涉（RNAi）技術應用于哺乳動物細胞的研究策略”，希望能給從事或者準備從事RNAi相關實驗的研究人員以幫助。哺乳動物細胞的RNAi技

生物素-親和素系統(tǒng)（BAS）ELISA和免疫組化技術2011/11/07

生物素-親和素系統(tǒng)（BAS）ELISA和免疫組化技術20世紀70年代后期在免疫酶技術中利用生物素-親和素系統(tǒng)（biotin-avidinsystem，BAS）標記抗體發(fā)展了又一種新型生物反應放大技術，即BAS-ELISA技術，它使用生物素-親和素-過氧化物酶復合物作為指示劑，組成一新的生物放大系統(tǒng)進一步提高檢測的敏感度。生物素（biotin）是廣泛分布于動植物體內(nèi)的一種生長因子，又稱輔酶R或維生素H。親和素（avidin）是卵白及某些微生物中的一種蛋白質(zhì)，由4個亞單位組成。二者有高度親和力，且均

PCR-ELISA法診斷禽流感2011/11/03

PCR-ELISA法診斷禽流感PCR-ELISA是將一步RT-PCR技術與酶聯(lián)免疫吸附法相結(jié)合，檢測病毒的一項診斷技術。PCR的一對引物中，其中一個用生物素標記、另一個用地高辛標記，在酶標微孔板上用親和素包被，PCR擴增后純化片段加入微孔板中。此時，微孔板上包被的親和素將與生物素標記引物上的生物素特異性結(jié)合而捕捉了PCR片段，然后在微IL板中加入辣根過氧化物酶標記的抗地高辛抗體，該抗體將與地高辛標記引物上的地高辛結(jié)合，從而形成親和素-生物素-PCR片段-地高辛-地高辛抗體-辣根過氧化物酶復合物。

酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）診斷豬囊尾蚴病病2011/11/01

酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）診斷豬囊尾蚴病病目前實驗室開發(fā)的新型檢測方法主要是以ELISA及改良的ELISA為主。分別用5種不同改良的ELISA平行檢測囊蟲抗體：ABC-ELISA、經(jīng)典ELISA、SPA-ELISA、快速法ELISA和BAELISA，試驗結(jié)果差異不顯著，說明方法學的選擇主要依據(jù)習慣和試驗的目的。N．S．Odashima（2002）用ELISA法診斷不同的患者群血清中抗體的種類，發(fā)現(xiàn)ELISA—lgG敏感度zui高，分別達到88．5％和93．2％，這說明該方法*適用于豬囊蟲病的

酶聯(lián)免疫吸附測定ELISA操作中標本的收集2011/10/26

酶聯(lián)免疫吸附測定ELISA操作中標本的收集用于ELISA測定的臨床標本zui為常用的是血清（漿），有時因為特定的檢測目的，也用到唾液、腦脊液、尿液、糞便等標本。目前使用血清（漿）標本測定的標志物一般有傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤標志物、激素、特種蛋白、細胞因子和治療藥物等。對用于激素和治療藥物測定的血清標本的收集，要注意收集時間甚或體位有可能會對測定結(jié)果產(chǎn)生影響。如可的松在早晨4：00—6：00之間，會有一峰值出現(xiàn)；生長激素、促黃體激素（LH）和促卵泡激素（FSH）均以陣發(fā)性方式釋放，因此，在