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細胞凋亡的幾種檢測方法2010/06/30
一、形態(tài)學觀察方法1、HE染色、光鏡觀察:凋亡細胞呈圓形,胞核深染,胞質濃縮,染色質成團塊狀,細胞表面有“出芽”現象。2、丫啶橙(AO)染色,熒光顯微鏡觀察:活細胞核呈黃綠色熒光,胞質呈紅色熒光。凋亡細胞核染色質呈黃綠色濃聚在核膜內側,可見細胞膜呈泡狀膨出及凋亡小體。3、臺盼藍染色:如果細胞膜不完整、破裂,臺盼藍染料進入細胞,細胞變藍,即為壞死。如果細胞膜完整,細胞不為臺盼藍染色,則為正常細胞或凋亡細胞。此方法對反映細胞膜的完整性,區(qū)別壞死細胞有一定的幫助。4、透射電鏡觀察:可見凋亡細胞表面微絨
小鼠單個核細胞分離一步梯度法去除死細胞2010/06/24
基本原理活細胞(密度較?。┖退兰毎芏容^大)密度不同,從而有助于將活的淋巴細胞和紅細胞分離。附加材料高密度溶液:Ficoll-Paque(Ficoll和泛影酸鈉;PharmaciaLKB)或Lympholyte-M(Cedarlane)12ml或50ml聚丙烯離心管(比聚苯乙烯離心管好)注:Ficoll-Paque和Lympholyte-M的密度與溫度有關;該方法中所采用的以及其他商品化的高密度溶液適合在室溫中使用。因此應注意使細胞懸液、離心和高密度溶液控制在室溫。否則會因活細胞沉入離心管底導
蛋白質的濃縮技術方法2010/06/23
(一)濃縮膠濃縮法濃縮膠是一種高分子網狀結構的有機聚合物,具有很強的吸水性能。每克干膠可吸水120ml~150ml。它能吸收低分子量的物質,如水、葡萄糖、蔗糖、無機鹽等,適宜濃縮10000分子量以上的生物大分子物質。濃縮后,蛋白質的回收率可達80%~90%。比濃縮膠應用方便,直接加入被濃縮的溶液中即可。必須注意,濃縮溶液的pH值應大于被濃縮物質的等電點,否則在濃縮膠表面產生陽離子交換,影響濃縮物質的回收率。(二)冷凍干燥濃縮法這是濃縮蛋白質的一種較好的辦法,它既使蛋白質不易變性,又保持蛋白質中固
紫外線消毒器應用2010/06/22
一、紫外線消毒器消毒原理時紫外線按其生物學作用的差異,紫外線可分為UV-A(320-400nm)、UV-B(275-320nm)、UV-C(200-275nm)和真空紫外線部分。水處理中實際上是使用紫外線的UV-C部分,在該波段中260nm附近已被證實是殺菌效率zui高的紫外線。冠宇紫外線消毒器集光學、微生物學、機械、化學、電子、流體力學等綜合科學為一體。采用特殊設計的率、高強度和長壽命的紫外UV-C光發(fā)生裝置產生的強紫外UV-C光照射流水。當水中的細菌、病毒等受到一定劑量的紫外UV-C光(波長
腫瘤標志物分類、檢測原理和檢測方法2010/06/21
根據WHO資料,范圍內惡性腫瘤是人類僅次于心腦血管病的第二大死亡原因,占總死亡人數的22%,并逐年增加。10種常見腫瘤:胃癌、肝癌、食管癌、結直腸肛門癌、白血病、子宮頸癌、鼻咽癌、乳腺癌和膀胱癌。腫瘤的早期發(fā)現、早期診斷、早期治療是患者獲得長期生存的zui主要途徑。以肝癌為例,腫瘤直徑<2cm,5年生存率幾乎100%;直徑每增加1cm,5年生存率下降20%。腫瘤診斷三大支柱是圖像診斷(包括B超、CT、核磁共振)、化學診斷(血清學和免疫學)及細胞學和組織學診斷,而后兩者均以腫瘤標志為主要或輔助觀察
維生素C可提高iPS細胞誘導效率2010/06/17
誘導多能性干細胞(inducedpluripotentstemcells,iPScells)是具有胚胎干細胞特性的一種細胞,由體細胞誘導而來,可作為胚胎干細胞的替代品用于科學研究和臨床治療。但是iPS細胞的成功誘導比較復雜,誘導效率一直是科學界的難題,通常每萬個細胞才能誘導成功一例iPS細胞。zui近,中科院廣州生物醫(yī)藥與健康研究院裴端卿帶領的研究小組發(fā)現,通過在培養(yǎng)過程中添加維生素C可使iPS誘導效率提高10倍。通過老鼠和人細胞實驗發(fā)現,培養(yǎng)時添加維生素C可促進相關基因表達,推動體細胞進入重編
致病微生物2010/06/13
微生物是指那些個體體積直徑一般小于1mm的生物群體,它們結構簡單,大多是單細胞,還有些甚至連細胞結構也沒有。人們通常會借助顯微鏡或者電子顯微鏡才能看清它們的形態(tài)和結構。需要說明的是微生物是一個比較籠統的概念,界線有時會非常模糊。如單細胞藻類和一些原生動物也應算是微生物,但通常它們并不放在微生物中進行研究。按我國學者提出的分類法將生物分成六界:病毒界、原核生物界、原生生物界、真菌界、植物界和動物界。不難看出微生物在六界中占了四界,因此微生物在自然界中的重要地位是顯而易見的,其研究的對象也是十分廣泛
微生物的染色與形態(tài)結構觀察2010/06/12
雖然各種類型的顯微鏡能夠觀察到微生物的各種形態(tài)結構,但一般實驗室常用的是普通光學顯微鏡。由于細菌體積小且透明,在活體細胞內又含有大量的水分,因此,對光線的吸收和反射與水溶液相差不大。當把細菌懸浮在水滴內,放在顯微鏡下觀察時,由于與周圍背景沒有顯著的明暗差,難于看清它們的形狀,更談不上識別其細微結構。而經過染色,就可借助顏色的反襯作用比較清楚地看到菌體形態(tài),亦即菌體表面及內部結構著色與背景形成鮮明對比,這樣便可在普通光學顯微鏡下清晰地觀察到微生物的形狀和結構,而且還可以通過不同的染色反應來鑒別微生
植物治理污染物將成現實2010/06/11
相對來說,植物屬于自養(yǎng)生物,生物量大、根系發(fā)達,對環(huán)境的適應性強。此外,植物治理的過程也是環(huán)境綠化和美化的過程。所以,在20世紀的八九十年代學者們提出用植物治理污染物的新思路。但是,植物世代周期長、個體大且有分化復雜的組織器官,即使在污染的環(huán)境中,也不容易在短期內獲得降解污染物的能力?,F代分子生物學和基因工程的手段則可以將微生物與植物兩方面的優(yōu)勢整合起來。試驗證明,微生物來源的打開苯環(huán)結構的基因可以通過基因工程的途徑轉化到植物中并得到正確的表達,特別是證明了這種轉基因植物能夠清除污染物中難以被快
如何讓干細胞不分化 新型培養(yǎng)基來幫忙2010/06/10
以色列耶路撒冷哈達薩大學的研究人員近日開發(fā)出一種新的干細胞培養(yǎng)基,能讓干細胞在更長時間內不分化。這項研究是由哈達薩人類胚胎干細胞研究中心的主管BenjaminReubinoff領導的,發(fā)表在近期的《NatureBiotechnology》上。作者們相信這項技術將對臨床應用所需的大量hESC特別有用。為了保持hESC存活且具有多能性,研究人員通常在滋養(yǎng)層細胞(也就是一層小鼠胚胎成纖維細胞)上培養(yǎng),或者在微載體上成簇培養(yǎng)。但是在這些基質上培養(yǎng)干細胞是相當昂貴的,而且培養(yǎng)物不能在很長時間內保持未分化狀
離心機及轉子的分類2010/06/09
一.離心機的分類:上對離心機的分類方法有三種:按用途分、按轉速分和按結構分。按用途分類:分為制備型離心機和制備分析離心機。制備型離心機:僅供分離濃縮,提純試樣的離心機。制備分析離心機:不但能分離濃縮、提純試樣,而且可以通過光學系統對試樣的沉降過程進行觀察、拍照、測量、數字輸出、打印自動顯示的離心機。按轉速分類:分為低速離心機、高速離心機、超速離心機。低速離心機:轉速在10000rpm以內或相對離心力在15000×g以內。高速離心機:轉速在10000∽30000rpm以內或相對離心力在15000∽
菌株的復活2010/06/08
先用肉湯培養(yǎng)基復活,此為菌種*代;從營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)物中挑菌液劃相應的選擇性培養(yǎng)基平板,選擇典型菌落,接種于營養(yǎng)瓊脂斜面,此為菌種第二代;一個月后,從斜面上挑菌劃相應的選擇性培養(yǎng)基平板,選擇典型菌落,接種于營養(yǎng)瓊脂斜面,此為菌種第三代;依次下去,直至第五代,就可以不再接了,可以買新的菌種了。1.選擇復活用的培養(yǎng)基,可選用說明書中推薦的培養(yǎng)基,根據菌株的分類進行選擇,請說明購買菌株的類型或名稱;2.選擇菌株保存的方法:冷凍真空干燥保藏法(可保存10年以上,需真空冷凍干燥機等設備)、超低溫保藏(可保存兩
細胞凍存.復蘇方法2010/06/07
1.細胞:選對數生長期細胞,收集細胞24小時前換液一次。2.計數:按常規(guī)方法把細胞制成細胞懸液,計數,令細胞密度達5×106/ml,離心去上清,吸入離心管中。3.凍存液:先用培養(yǎng)液9分+DMSO1分(或甘油)配成10%的DMSO凍存液,按上法一滴滴加入離心管中,然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。4.分裝:分裝入無菌安剖中,每安剖加1.5毫升細胞懸液。5.封口:用塑料安剖時擰緊瓶口即可;如用火焰封閉安剖口后,仔細檢查,定要封嚴,必要時可浸入藍色液中觀察,為安全起見,把安剖縫入紗布小袋中,以防液氮浸入后
水體溶解氧的各種檢測方法及原理2010/06/04
1.碘量法:是測定水中溶解氧的基準方法,使用化學檢測方法,測量準確度高,是zui早用于檢測溶解氧的方法。其原理是在水樣中加入硫酸錳和堿性碘化鉀,生成氫氧化錳沉淀。此時氫氧化錳性質極不穩(wěn)定,迅速與水中溶解氧化合生成錳酸錳:加入濃硫酸使已化合的溶解氧(以MnMnO3的形式存在)與溶液中所加入的碘化鉀發(fā)生反應而析出碘:再以淀粉作指示劑,用硫代硫酸鈉滴定釋放出的碘,來計算溶解氧的含量此方法適用于各種溶解氧濃度大于0.2mg/L和小于氧的飽和度兩倍(約20mg/L)的水樣水中可能含有亞硝酸鹽、鐵離子、游離
多參數水質分析儀2010/06/03
技術參數該儀器測定下限、測定范圍、測量精度與但參數水質分析儀器相同。主要特點1、具有選擇離子測量功能,可內置19種離子或參數測量項目以供選擇,可儲存1600個樣品檢測數據,配合隨機提供的化學試劑包,可自動顯示被測樣品的吸光度值、濃度值及其測量參數。2、配置9個超高亮發(fā)光二極管,波長自動轉換。用戶也可自備標準溶液,用自制的標準曲線對樣品進行定量測定。3、采用單片機控制,具有光譜數據處理功能。4、大屏幕中文顯示,人機交互式操作。5、主機內置充電電池,外置大功率鋰電池,適用于實驗室或野外現場定量測量。
什么中藥治胃炎2010/06/01
下面重點介紹幾種中成藥。(1)香砂養(yǎng)胃丸:①主要成分:木香、砂仁、枳實、白術、豆蔻仁、茯苓、厚樸、香附。②功能主治:本藥有健脾和胃、理氣消食的作用。適用于納差乏力、上腹痛、腹脹、呃逆、噯氣、舌苔厚的胃炎患者。③用法:每服6克,每日2次,溫開水送服。(2)胃氣止痛丸:①主要成分:香附、高良姜。②功能主治:本藥有溫中散寒、行氣止痛作用。適用于喜噯喜按、口吐清水、手足不溫的胃寒患者。③用法:每服3克,每日2次,溫開水送服。(3)舒肝丸:①主要成分:柴胡、厚樸、川芎、香附、枳實、沉香、砂仁、木香。⑨功能
冬季預防疾病2010/05/31
中醫(yī)學認為,立冬陽氣潛藏,陰氣盛極,草木凋零,蟄蟲伏藏,萬物活動趨向休止,以冬眠狀態(tài)養(yǎng)精蓄銳,為來春生機勃發(fā)做準備。就人體而言,新陳代謝也處于相對緩慢的水平,因此主張冬季養(yǎng)生要避寒就溫、保護陽氣,使陰陽相對平衡?!端貑枴に臍庹{神大論》曰:“冬三月,此謂閉藏。水冰地坼,無擾乎陽。早臥晚起,必待日光;使志若伏若匿,若有私意,若已有德;去寒就溫,無泄皮膚,使氣亟奪。此冬氣之應,養(yǎng)藏之道也?!闭J為冬季天地萬物處于閉藏狀態(tài),人們應早睡晚起,避寒保暖,但不能過度溫暖而使皮膚出汗,以保陽氣。從現代醫(yī)學角度來看
聯合疫苗和多價疫苗2010/05/28
為了使用上的方便,生物制品生產單位愈來愈多地制備多價疫苗或聯合疫苗。在一個劑量的疫苗中包含一種病毒的幾個型或亞型者,稱為多價疫苗;在一個劑量的疫苗中包含幾種病毒乃至其它微生物或其產物者,稱為聯合疫苗。必須指出,多價疫苗決不是幾種疫苗的簡單的混合。制備和應用多價疫苗或聯合疫苗,必須首先保證其中各個免疫成分之間不發(fā)生免疫干擾現象,也就是不降低各該免疫成分的免疫效能。因此必須進行大量細致的試驗,通過對比,選擇zui適當的配合對象和配合比例,并作較大數量的實驗動物和本動物的免疫效果測定。另外還有一個經濟
腦膜炎球菌和李斯特菌的培養(yǎng)2010/05/27
腦膜炎球菌和李斯特菌凍干菌株,需要用無菌的生理鹽水溶解。1、腦膜炎球菌:革蘭陰性菌,營養(yǎng)要求較高,在普通培養(yǎng)基上不長,30℃以下不長,應接種于已溫暖的血平板或巧克力平板上,置于燭缸內37℃培養(yǎng)。2、李斯特菌:革蘭陽性桿菌,營養(yǎng)要求不高,在含有肝浸液、腹水、血清或葡萄糖的培養(yǎng)基中生長良好,在5%養(yǎng)血平板上形成細小圓形光滑而有狹窄beta溶血圈的菌落。
光學顯微鏡常識產品用途2010/05/26
光學顯微鏡的組成結構光學顯微鏡包括光學系統和機械裝置兩大部分,而數碼顯微鏡還包括數碼攝像系統,現分述如下:(一)機械裝置1.機架顯微鏡的主體部分,包括底座和彎臂。2.目鏡筒位于機架上方,靠圓形燕尾槽與機架固定,目鏡插在其上。根據有否攝像功能,可分為雙目鏡筒和三目鏡筒;根據瞳距的調節(jié)方式不同,可分為鉸鏈式和平移式。3.物鏡轉換器它是一個旋轉圓盤,上有3~6(或7)個孔,分別裝有低倍或高倍物鏡鏡頭。轉動物鏡轉換器就可讓不同倍率的物鏡進入工作光路。4.載物臺是放置玻片的平臺,其中央具有通光孔。臺上有一
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