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病毒的雞胚培養(yǎng)2012/07/04: 一、目的要求掌握雞胚尿囊腔接種培養(yǎng)新城疫病毒的操作技術(shù).二、器材1.雞胚應(yīng)選用健康雞群的受精蛋,接種雞的雞胚應(yīng)無(wú)母源抗體,以免影響病毒在胚胎中的增殖.實(shí)驗(yàn)用的雞胚多采用9—10日齡的活胚.2.接種材料新城疫I系疫苗3.各種器械孵卵器、照蛋箱、蛋架、打孔器、1ml結(jié)核菌素注射器、41/2號(hào)注射針頭、鑷子、3%碘酊、75%酒精棉球、鉛筆、酒精燈、剪刀、眼科鑷子、滅菌的疫苗瓶、滅菌滴管和固體石蠟等.三、內(nèi)容和方法（一）接種前的準(zhǔn)備1.雞胚的準(zhǔn)備本實(shí)驗(yàn)選擇9—10日齡的雞胚,在照蛋時(shí)以鉛筆勾劃出氣室,于

適應(yīng)性免疫涉及的一些重要概念2012/07/02: 1．三個(gè)特點(diǎn)（1）特異性：二次應(yīng)答時(shí)能精細(xì)地區(qū)分致敏的抗原和其他無(wú)關(guān)的抗原；因而免疫應(yīng)答的特異性指的是抗原特異性（2）多樣性：參與獲得性免疫應(yīng)答的淋巴細(xì)胞，其表面識(shí)別結(jié)構(gòu)和相應(yīng)分子（如抗體）所顯示的高度異質(zhì)性，賦予機(jī)體具有識(shí)別數(shù)量極大的抗原并與之起反應(yīng)的能力。多樣性是特異性產(chǎn)生的基礎(chǔ)。（3）記憶性：再次遇到同一抗原時(shí)，出現(xiàn)增強(qiáng)性應(yīng)答。免疫記憶由記憶性淋巴細(xì)胞承擔(dān)。2．應(yīng)答類型（1）體液免疫和細(xì)胞免疫：由抗體一類可溶性分子介導(dǎo)的免疫應(yīng)答稱為體液免疫；由免疫細(xì)胞主要是T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答稱為細(xì)胞免疫

吸光和發(fā)光組織樣品的常用測(cè)量參數(shù)2012/06/29: 像素是顯微圖像分析系統(tǒng)的zui小測(cè)量單位，通過(guò)它我們不僅能夠得到待測(cè)范圍內(nèi)的幾何形態(tài)信息，如面積、周長(zhǎng)和直徑等等，還可根據(jù)樣品是否能夠吸光或發(fā)光來(lái)測(cè)量其物質(zhì)的總含量。在組織化學(xué)和免疫組織化學(xué)中常用熒光素來(lái)標(biāo)記物質(zhì)，使被測(cè)量物質(zhì)產(chǎn)生有色熒光，從而進(jìn)行分析。此外，在原位雜交技術(shù)中，采用放射自顯影的標(biāo)本也可以作為發(fā)光組織細(xì)胞樣品使用顯微圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行分析。（一）眼光組織細(xì)胞樣品的測(cè)量對(duì)于吸光組織細(xì)胞樣品，圖像分析系統(tǒng)至少能以下列三種參數(shù)來(lái)表述細(xì)胞待測(cè)物質(zhì)的計(jì)量結(jié)果：1．積分光密度（integrate

體內(nèi)鈉離子與心跳有重要聯(lián)系2012/06/27: 如果在人群中驀然看到心儀已久的人，我們會(huì)心跳加速。英國(guó)哥倫比亞大學(xué)zui近的一項(xiàng)研究表明，與驚鴻一瞥帶來(lái)的震撼相比，體內(nèi)鈉離子運(yùn)動(dòng)和心臟跳動(dòng)之間的關(guān)系可能更加密切。據(jù)美國(guó)物理學(xué)家組織網(wǎng)2月13日?qǐng)?bào)道，研究人員利用了加拿大同步加速器光源，揭示了一種鈉通道控制心臟跳動(dòng)的分子機(jī)制，鈣離子也和這種機(jī)制有關(guān)。相關(guān)論文發(fā)表在2月14日出版的《美國(guó)國(guó)家科學(xué)院院刊》上。心肌細(xì)胞的收縮與舒張全靠一種微小但卻十分精細(xì)的電脈沖來(lái)控制。在細(xì)胞內(nèi)部和細(xì)胞之間有著復(fù)雜的分子通道，當(dāng)金屬離子如鈉、鉀、鈣通過(guò)這些通道時(shí)，就產(chǎn)生

英發(fā)現(xiàn)可引發(fā)炎癥性疼痛的分子2012/06/25: 在陽(yáng)光明媚的夏天，不少日光浴愛(ài)好者都難免出現(xiàn)曬傷狀況，那種刺痛的感覺(jué)一般都會(huì)持續(xù)好幾天的時(shí)間。據(jù)英國(guó)《新科學(xué)家》雜志近日?qǐng)?bào)道，英國(guó)科學(xué)家發(fā)現(xiàn)一種分子可能與此相關(guān)，通過(guò)對(duì)這種分子的研究或許有助于弄清關(guān)節(jié)炎等慢性疼痛的根源，開(kāi)發(fā)出能迅速起效的新型止痛藥。相關(guān)論文發(fā)表在《科學(xué)·轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)》雜志上。由英國(guó)維康信托基金會(huì)和英國(guó)生物技術(shù)與生物科學(xué)研究理事會(huì)（BBSRC）資助的這項(xiàng)研究，使用中波紫外線對(duì)10位志愿者身上的一小塊皮膚和大鼠進(jìn)行照射，而后對(duì)被曬傷的皮膚進(jìn)行活檢和篩選，以找出炎癥反應(yīng)中可能引發(fā)疼痛的因

開(kāi)發(fā)出一種阻斷癌癥信息進(jìn)入細(xì)胞核的小肽2012/06/21: 以色列魏茲曼研究所開(kāi)發(fā)出的一種小分子阻止致癌信息進(jìn)入細(xì)胞核.在一種環(huán)境中的好消息可能是另一種環(huán)境中的災(zāi)難.比如對(duì)癌癥而言,當(dāng)某一種細(xì)胞接受指令而進(jìn)行生長(zhǎng)和無(wú)限制分裂時(shí),這對(duì)細(xì)胞本身而言是個(gè)好信息,但是對(duì)體內(nèi)容納這種細(xì)胞的個(gè)人而言卻是個(gè)不好的消息.魏茲曼研究所科學(xué)家們成功地解碼出和阻斷一類促進(jìn)細(xì)胞不受約束生長(zhǎng)的分子信息.這種分子信息首先到達(dá)細(xì)胞膜,但是它的zui終目標(biāo)是含有DNA的細(xì)胞核.這是該信息需要跨越的距離,相當(dāng)于人類的50公里.為了快速地達(dá)到細(xì)胞核,這種信息通過(guò)一種化學(xué)信使鏈（chaino

瞬時(shí)轉(zhuǎn)染分析法2012/06/19: 1.瞬時(shí)轉(zhuǎn)染分析法目前有很多功能性分析方法用于研究轉(zhuǎn)錄調(diào)控,zui常用的方法是瞬時(shí)轉(zhuǎn)染分析法.該方法是通過(guò)一定的轉(zhuǎn)染程序?qū)⒑康恼{(diào)控區(qū)的質(zhì)粒導(dǎo)人培養(yǎng)細(xì)胞.在典型情況下,調(diào)控區(qū)調(diào)控“報(bào)告基因”的轉(zhuǎn)錄.報(bào)告基因是在mRNA和蛋白質(zhì)的水平上都易于被正確檢測(cè)到的基因.產(chǎn)生的質(zhì)粒在培養(yǎng)細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄后,在特定時(shí)刻測(cè)定從報(bào)告基因上合成的mRNA或蛋白質(zhì),以評(píng)價(jià)調(diào)控區(qū)的活性.人們將這種分析方法稱為瞬時(shí)轉(zhuǎn)染分析,因?yàn)榇藭r(shí)質(zhì)粒仍然以附加的形式存在,很少整合進(jìn)宿主基因組.因此,mRNA或蛋白質(zhì)產(chǎn)物必須在短時(shí)間內(nèi)（1～3

組織相容性復(fù)合體2012/06/13: 主要組織相容性復(fù)合體（MHC）是由一組高度多態(tài)性基因組成的染色體區(qū)域。MHC基因產(chǎn)物能在不同細(xì)胞表面表達(dá)，通常稱之為MHC分子或MHC抗原，又因這些抗原在器官移植中代表供受者雙方的組織相容程度，也稱為移植抗原或組織相容性抗原。脊椎動(dòng)物中，從魚到人類都存在結(jié)構(gòu)與功能相似的MHC遺傳區(qū)域，如小鼠的MHC是H-2，堵的MHC是SLA，人的MHC是HLA。MHC是現(xiàn)知多態(tài)性zui為豐富的一個(gè)基因系統(tǒng)，擁有大量的等位基因，賦予種群巨大潛力以適應(yīng)多變的內(nèi)外環(huán)境。MHC分子不但在T細(xì)胞分化發(fā)育中是必需的，而且

主要組織相容性復(fù)合體2012/06/13: 主要組織相容性復(fù)合體（MHC）是由一組高度多態(tài)性基因組成的染色體區(qū)域。MHC基因產(chǎn)物能在不同細(xì)胞表面表達(dá)，通常稱之為MHC分子或MHC抗原，又因這些抗原在器官移植中代表供受者雙方的組織相容程度，也稱為移植抗原或組織相容性抗原。脊椎動(dòng)物中，從魚到人類都存在結(jié)構(gòu)與功能相似的MHC遺傳區(qū)域，如小鼠的MHC是H-2，堵的MHC是SLA，人的MHC是HLA。MHC是現(xiàn)知多態(tài)性zui為豐富的一個(gè)基因系統(tǒng)，擁有大量的等位基因，賦予種群巨大潛力以適應(yīng)多變的內(nèi)外環(huán)境。MHC分子不但在T細(xì)胞分化發(fā)育中是必需的，而且

抗體片段及其衍生形式2012/06/11: 1．雙特異性抗體將兩套輕鏈、重鏈基因?qū)牍撬枇黾?xì)胞中，選擇合適的抗體恒定區(qū)及Ig類型，可獲得產(chǎn)量大、均一性和高純度的雙特異性抗體。另外，以化學(xué)交聯(lián)技術(shù)或雜交—雜交瘤技術(shù)也可獲得雙特異性抗體。2．Fab抗體Fab抗體是由重鏈Fd（即VM+CHl）和完整輕鏈通過(guò)二硫鍵結(jié)合而成的異二聚體，僅含一個(gè)抗原結(jié)合部位。將重鏈Fd和完整輕鏈的編碼基因連接，5，端融合細(xì)菌蛋白信號(hào)肽基因可在大腸桿菌內(nèi)分泌型表達(dá)，形成完整的立體折疊和鏈內(nèi)、鏈間二硫鍵，保持Fab片段的功能。3．Fv抗體其制備原理是：分別構(gòu)建含VH和V

酶免疫電泳技術(shù)2012/06/08: 一，酶免疫電泳技術(shù)的原理抗原與抗體在瓊脂糖凝膠中電泳時(shí)，在堿性緩沖液的條件下，抗原帶負(fù)電，向正極移動(dòng)。不同分子量或還不同電荷的抗原，在相同條件下，移動(dòng)距離不等。這些在不同部位的抗原，再與相關(guān)抗體經(jīng)擴(kuò)散形成免疫沉淀線。酶免疫電泳技術(shù)中的抗原與抗體就是酶和它的相應(yīng)抗體球蛋白。酶抗原與酶抗體形成的免疫復(fù)合物是用底物顯色的，由于酶反應(yīng)的高度靈敏性，使酶免疫電泳技術(shù)成為一項(xiàng)靈敏度高的檢測(cè)技術(shù)，但僅局限于酶蛋白的分析鑒定。二，辣根過(guò)氧化物酶（HRP）免疫電泳技術(shù)的程序1，器材與設(shè)備電泳儀（包括電泳槽）；溫箱

中國(guó)嬰兒為何不喝國(guó)產(chǎn)奶2012/06/05: 幾年間，國(guó)內(nèi)洋奶粉均價(jià)已經(jīng)從200元邁上了300元大關(guān)。其中，惠氏旗下品牌“啟賦”1段已賣到408元，雀巢的超級(jí)能恩1段也賣到了318元，容量卻從900克調(diào)低到800克。而在韓國(guó)和東南亞國(guó)家，這些產(chǎn)品的價(jià)格只有內(nèi)地市場(chǎng)的一半，洋奶粉在中國(guó)內(nèi)地的售價(jià)成為名副其實(shí)的zui高。然而，這絲毫未影響國(guó)內(nèi)消費(fèi)者的消費(fèi)激情，尤其是*的洋奶粉已經(jīng)成為國(guó)內(nèi)不少媽媽的。洋奶粉賣價(jià)之所以能在中國(guó)步步登高，勇奪zui高稱號(hào)，絕非偶然。洋奶粉漲價(jià)主要發(fā)生在2008年三聚氰胺事件之后，在這之前，國(guó)有品牌奶粉的*是60%，而

新基因測(cè)序儀器在張江問(wèn)世2012/05/29: 如今，腫瘤靶向治療和個(gè)體化用藥正在醫(yī)學(xué)界推廣，要開(kāi)展這類“基因治療”，對(duì)人體的基因測(cè)序*。記者昨天獲悉，*液相定點(diǎn)基因測(cè)序儀在張江高科技園區(qū)問(wèn)世，這種儀器在癌細(xì)胞比例低于20%的樣品中，能檢測(cè)出基因變異，而目前醫(yī)院使用的基因測(cè)序技術(shù)，都要求癌細(xì)胞數(shù)不得低于40%。生物芯片上海國(guó)家工程研究中心的專家表示，這一發(fā)明具有廣闊的醫(yī)學(xué)應(yīng)用前景。據(jù)研發(fā)人員黃新華介紹，基因測(cè)序是人類基因組計(jì)劃的關(guān)鍵技術(shù)，有基因檢測(cè)“金標(biāo)準(zhǔn)”之稱。一般基因測(cè)序主要包括三個(gè)步驟：首先，是PCR擴(kuò)增，對(duì)待檢測(cè)的DNA進(jìn)行復(fù)制放量；

抗甲狀腺球蛋白自身抗體2012/05/24: 1956年Witebsky和Rose以免甲狀腺球蛋白（Thyroglobulin，Tg）免疫其他的兔子時(shí)，發(fā)現(xiàn)被免疫的兔子體內(nèi)可產(chǎn)生與兔Tg反應(yīng)的抗體。隨后的研究發(fā)現(xiàn)橋本甲狀腺炎、甲狀腺癌以及一些與甲狀腺相關(guān)的疾病中存在抗Tg抗體。在自身免疫性甲狀腺病中Tg抗體出現(xiàn)較TPO抗體早，因而Tg抗體是甲狀腺發(fā)生自身免疫損傷的一個(gè)較好的血清標(biāo)志物。Burek于1982年對(duì)家族中青少年甲狀腺炎的調(diào)查結(jié)果支持這一觀點(diǎn)，認(rèn)為Tg自身抗體很可能是*個(gè)自身免疫標(biāo)志物，隨后是微粒體抗體。致病作用通過(guò)轉(zhuǎn)輸T淋巴細(xì)胞，

DNA合成儀的發(fā)展2012/05/21: 當(dāng)前DNA合成儀的主要生產(chǎn)廠商都致力于機(jī)器性能的完善和應(yīng)用領(lǐng)域的開(kāi)拓以及率、高產(chǎn)率的儀器的開(kāi)發(fā)與研究。中國(guó)臺(tái)灣科學(xué)委員會(huì)“基因醫(yī)藥衛(wèi)生科技研究計(jì)劃”中的基因生物技術(shù)組已經(jīng)成功研發(fā)**臺(tái)高密度復(fù)制DNA合成儀，可以同時(shí)合成384條不同DNA，每日可合成768條DNA，并可以配合聚合酶連鎖反應(yīng)裝置，大量復(fù)制各種基因，不但節(jié)省時(shí)間，也可節(jié)省大量人力，這部機(jī)器能復(fù)制動(dòng)物、人體、植物的基因甚至是防偽基因。由于人們所需要的大部分核酸的堿基對(duì)數(shù)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)目前DNA合成儀可以合成的zui長(zhǎng)核酸鏈的堿基對(duì)數(shù)量，因

特異性循環(huán)免疫復(fù)合物的測(cè)定2012/05/18: 特異性CIC分為單特異性CIC和雙特異性CIC兩類。前者適用于檢測(cè)已知抗原及其相應(yīng)抗體組成的CIC。雙特異性CIC是指對(duì)組成CIC的抗原、抗體和補(bǔ)體中某兩種成分組合明確的CIC，常采用的檢測(cè)方法為ELISA和RIA技術(shù)，需要兩種特異性各異的抗體。因此，檢測(cè)要求條件較高，但能較全面地反映CIC的病理意義。在檢測(cè)雙特異性CIC時(shí)，由于要求有兩種特異性抗體，每種抗體均可用作包被或檢測(cè)抗體，故具體到檢測(cè)某類雙特異性CIC時(shí)，根據(jù)兩種抗體的不同，可使用兩種方法。以ELISA法為例，如檢測(cè)HBsAg／IgC

胰蛋白酶解離法檢測(cè)HBsAg-CIC2012/05/15: 用3．5％PEG選擇性地沉淀血清中CIC，繼之用胰蛋白酶消化沉淀物中的抗體蛋白，分離出抗原部分，用反向間接血凝法測(cè)定HBsAg滴度。與不加胰蛋白酶的對(duì)照管比較，如HBsAg滴度升高，則說(shuō)明有HBsAg-CIC的存在。1．試劑①pH8．4硼酸鹽緩沖液（BBS）：配制法同*節(jié)中PEG沉淀試驗(yàn)；②7％PEG及3．5％PEG溶液：用BBS配制；③10mg／mL胰蛋白酶溶液：用pH8．2巴比妥緩沖液配制。2．操作步驟（1）在測(cè)定管與對(duì)照管內(nèi)務(wù)加待測(cè)血清0．2mL。（2）兩管各加pH8．4BBSl．8mL，

免疫熒光技術(shù)（IFT）診斷禽流感2012/05/10: 免疫熒光技術(shù)就是熒光抗體技術(shù)（FAT）。IFTzui早用于病毒的鑒定和定位病毒感染細(xì)胞中特異性抗原，主要是核內(nèi)熒光。用M1抗原的熒光抗體主要出現(xiàn)胞質(zhì)熒光，核內(nèi)也有部分熒光。IFT早在1961年就開(kāi)始用于人類流感的快速診斷，1984年賓夕法尼亞州暴發(fā)禽流感時(shí)Skeeles將IFT用于AIV的檢測(cè)。用于禽流感病毒的診斷常用直接熒光抗體法，即在組織觸片上直接染色、以熒光顯微鏡檢查熒光。一種AIV的熒光抗體可用來(lái)檢測(cè)不同亞型的其他病毒。IFT用于禽流感的診斷具有快速、簡(jiǎn)便和敏感性好的特點(diǎn)，而且檢測(cè)成本費(fèi)

IL-17的檢測(cè)2012/05/08: IL-17是新近被確認(rèn)的一種細(xì)胞因子，由T細(xì)胞，主要是CD4+T細(xì)胞產(chǎn)生，其靶細(xì)胞廣泛?？杉せ钷D(zhuǎn)錄因子NF-KB，誘導(dǎo)纖維母細(xì)胞產(chǎn)生IL-6、ID8、GM-CSF、和膜性細(xì)胞間粘附分子1（1CAM-1），促進(jìn)由亞適劑量PHA所誘導(dǎo)的T細(xì)胞增殖。目前編碼IL-17及其受體的基因核苷酸序列已被部分測(cè)定。（1）IL-17的誘導(dǎo)：取人PBMC或純化的CD4+T細(xì)胞，加入誘導(dǎo)劑（PMA5ng／mL+ionomycin3ug／mL，或ConA63ug／mL，或抗CD28抗體+CD3抗體），37℃孵育48—7

豬繁殖與呼吸綜合征病原檢測(cè)2012/05/03: 診斷時(shí)zui重要的步驟是選擇合適的樣品，這樣才能獲得有用的實(shí)驗(yàn)室資料。一般來(lái)講，從幼豬而非大豬中采集樣品，因?yàn)樵谟棕i中的PRRSV的數(shù)量多，持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)。感染后4—6周能從乳豬、斷奶仔豬或架子豬的血清中分離血清。病毒分離用的樣品在采集后迅速冷藏或凍貯，因?yàn)镻RRSV對(duì)病毒很敏感，在運(yùn)輸過(guò)程中必須注意溫度不能升高，否則PRRSV易被滅活而不能進(jìn)行病毒分離。此外，病毒對(duì)pH的穩(wěn)定性范圍很小，因此必須保證無(wú)菌環(huán)境，以避免細(xì)菌污染而導(dǎo)致pH改變。樣品必須用絕緣和防漏的容器包裝，有足夠的冷凍劑，迅速遞送到相

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