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2014
09-28

PCR檢測的質(zhì)量控制
隨著獸醫(yī)防疫工作重要性的逐步提高，PCR檢測技術(shù)已被獸醫(yī)工作者比較廣泛認(rèn)可，已經(jīng)從實驗室研究走進(jìn)了臨床應(yīng)用階段。如何提高PCR檢測質(zhì)量，已成為實驗室技術(shù)人員不可回避的一個問題，它直接影響實驗室檢測結(jié)果的可信度和獸醫(yī)防疫工作質(zhì)量。我們認(rèn)為，PCR檢測質(zhì)量的控制是一個系統(tǒng)工程，總體上涉及三個方面：一是試驗儀器；二是試驗試劑與耗材；三是人員操作。任何一個方面出現(xiàn)問題，都會影響PCR檢測質(zhì)量。一、試驗儀器PCR儀和紫外凝膠成像系統(tǒng)（紫外分析儀或手提紫外等）以及移液器都可能影響PCR檢測的質(zhì)量。PCR儀是
2014
09-28

PCR常見問題及解決方案
問題可能原因解決方法無產(chǎn)物或產(chǎn)量低模板濃度偏低或偏高電泳檢測模板濃度，調(diào)整模板用量模板降解重新制備；基因組DNA、cDNA應(yīng)小量分裝后低溫保存模板中含有抑制反應(yīng)的雜質(zhì)純化模板引物濃度不足調(diào)整引物濃度，特別是針對長片段PCR引物存在二級結(jié)構(gòu)重新設(shè)計引物，避免二級結(jié)構(gòu)；優(yōu)化退火溫度引物降解引物應(yīng)高濃度小量分裝，-20℃保存，避免反復(fù)凍融Mg2+濃度偏低適當(dāng)提高M(jìn)g2+濃度，從1mM到3mM以0.5mM間隔遞增，針對不同模板和引物摸索佳Mg2+濃度dNTP降解-20℃保存，小量分裝，避免反復(fù)凍融酶純度
2014
09-26

移液器常見問題與解答大全
移液器是實驗室里面長使用的實驗儀器之一，基本上每一個實驗室人員都曾經(jīng)或現(xiàn)在使用過移液器，因而也會遇到移液器使用時的一些問題。筆者總結(jié)歸納了移液器使用時常見的問題與解答大全，希望對于大家有所幫助：移液器使用時常見的問題與解答大全：問題可能原因提議移液器滲漏多道移液器吸嘴里不均衡的液體水平·吸嘴與移液器吸嘴基部不配套·換成質(zhì)量一致的吸嘴（例如：ExpelPlusTM吸嘴）·當(dāng)裝吸嘴在多道移液器上時吸嘴架彎曲·換成更堅固的吸嘴架·吸嘴接觸不緊密·稍用力擠壓吸嘴（然而不要用力過量）不準(zhǔn)確性，不性·移液器
2014
09-26

滅菌鍋的使用要點
1、加水：先將排水閥關(guān)閉，調(diào)整總閥至“全排”。然后，開啟進(jìn)水閥，放蒸餾水至蒸汽發(fā)生器內(nèi)，待水進(jìn)至距水表頂端大約1～2cm處時，關(guān)閉進(jìn)水閥，并將總閥調(diào)至“關(guān)閉”。2、裝鍋：將待滅菌物品裝入鍋內(nèi)，注意不要塞得過緊過滿，盛有培養(yǎng)基的三角瓶和試管應(yīng)立放或適度傾斜．以免滅菌過程中培養(yǎng)基污染棉塞。3、關(guān)門：按順時針方向轉(zhuǎn)動緊鎖手柄至紅箭頭處，使撐擋進(jìn)入門圈內(nèi)。然后旋動八角轉(zhuǎn)盤，使門和墊圈密合，以滅菌時不漏氣為度，不宜太緊，以免損壞墊圈。4、通電加溫：待電源控制開關(guān)的旋鈕旋至“開”處，電源指示燈亮，表示已通電
2014
09-26

酶標(biāo)儀工作原理介紹
酶標(biāo)儀實際上就是一臺變相的光電比色計或分光光度計，其基本工作原理與主要結(jié)構(gòu)和光電比色計基本相同。圖示是一種單通道自動進(jìn)樣的酶標(biāo)儀工作原理圖。光源燈發(fā)出的光波經(jīng)過濾光片或單色器變成一束單色光，進(jìn)入塑料微孔極中的待測標(biāo)本。該單色光一部分被標(biāo)本吸收，另一部分則透過標(biāo)本照射到光電檢測器上，光電檢測器將這一待測標(biāo)本不同而強(qiáng)弱不同的光信號轉(zhuǎn)換成相應(yīng)的電信號。電信號經(jīng)前置放大，對數(shù)放大，模數(shù)轉(zhuǎn)換等信號處理后送入微處理器進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和計算，后由顯示器和打印機(jī)顯示結(jié)果。微處理機(jī)還通過控制電路控制機(jī)械驅(qū)動機(jī)構(gòu)X方向
2014
09-26

高壓滅菌器使用純水的原因
目前所有的高壓滅菌器都要求工作時使用蒸餾水或純水，因為蒸餾水具有純凈、無雜質(zhì)、無離子，不會產(chǎn)生水垢等特性。如果高壓滅菌器不使用蒸餾水，會對機(jī)器造成損傷。如細(xì)管路堵塞，干燥后在手機(jī)表面形成水垢、水斑，并沉積在高壓滅菌器內(nèi)的蒸汽傳感器，溫度傳感器表面上，使傳感器工作失常，影響高壓滅菌器的正常使用，所以使用純凈的蒸餾水很重要。按照標(biāo)準(zhǔn)，高壓滅菌器使用的純凈水的電導(dǎo)率不要超過15us/cm，但目前許多醫(yī)院都是自己生產(chǎn)或外購蒸餾水，如生產(chǎn)過程控制不好，會使其中的水質(zhì)有高有低，另外一個原因是部分高壓滅菌器內(nèi)
2014
09-26

瘦肉精介紹及其檢測方法
在我國，通常所說的“瘦肉精”則是指克倫特羅。它曾經(jīng)作為藥物用于治療支氣管哮喘，后由于其副作用太大而遭禁用。瘦肉精是一類動物用藥，有數(shù)種藥物被稱為瘦肉精，例如萊克多巴胺（Ractopamine）及克倫特羅（Clenbuterol）等。將瘦肉精添加于飼料中，可以增加動物的瘦肉量、減少飼料使用、使肉品提早上市、降低成本。但因為考慮對人體會產(chǎn)生副作用，各國開放使用的標(biāo)準(zhǔn)不一。其它這樣類似藥物還有沙丁胺醇（Salbutamol）和特布他林(Terbutaline)等，同樣能起到“瘦肉”作用、卻對人體健康危
2014
09-26

凝膠電泳的注意事項
影響電泳分離的主要因素：1.待分離生物大分子的性質(zhì)：待分離生物大分子所帶的電荷、分子大小和性質(zhì)都會對電泳有明顯影響。一般來說，子帶的電荷量越大、直徑越小、形狀越接近球形，則其電泳遷移速度越快。2.緩沖液的性質(zhì)：緩沖液的pH值會影響待分離生物大分子的解離程度，從而對其帶電性質(zhì)產(chǎn)生影響，溶液pH值距離其等電點愈遠(yuǎn)，其所帶凈電荷量就越大，電泳的速度也就越大，尤其對于蛋白質(zhì)等兩性分子，緩沖液pH還會影響到其電泳方向，當(dāng)緩沖液pH大于蛋白質(zhì)分子的等電點，蛋白質(zhì)分子帶負(fù)電荷，其電泳的方向是指向正極。為了保持
2014
09-25

如何正確使用操作維護(hù)離心機(jī)
1.1溫度制冷當(dāng)轉(zhuǎn)子高速旋轉(zhuǎn)時，空氣摩擦生熱，轉(zhuǎn)子溫度會上升，試管中的樣品溫度也會升高。由于生物學(xué)樣品對溫度敏感。一般要求離心實驗中溫度保持4℃。沒有電腦控制的智能化技術(shù)，是不可能做到±1℃的精度。因此，用制冷機(jī)對離心腔冷卻，而達(dá)到冷卻轉(zhuǎn)子、冷卻樣品溫度的目的。但測量旋轉(zhuǎn)中的轉(zhuǎn)子的實際溫度極為困難，國內(nèi)外都采用在離心腔底部離轉(zhuǎn)子較近處理設(shè)溫度傳感器，間接測量轉(zhuǎn)子溫度。這里T樣品=T腔+T補(bǔ)償。T補(bǔ)償又與轉(zhuǎn)子的類別、轉(zhuǎn)速及運行時間有關(guān)。1.2無刷電機(jī)直接驅(qū)動離心機(jī)是由電機(jī)帶轉(zhuǎn)子高速旋轉(zhuǎn)的。過去的電
2014
09-25

實驗室多種離心機(jī)的優(yōu)缺點羅列
離心機(jī)大量應(yīng)用于化工、石油、食品、制藥、選礦、煤炭、水處理和船舶等部門。實驗室多種離心機(jī)的優(yōu)缺點羅列：三足離心機(jī)：普通離心機(jī)，用途廣泛，間歇工作，造價低廉，型號品種也較多，缺點是出料麻煩，耗費人工。平板離心機(jī)：衛(wèi)生度高，密封性好，符合GMP規(guī)范，缺點是卸料麻煩吊袋離心機(jī)：卸料方便，安全性高，可分離較細(xì)顆粒，晶粒無破損，缺點是造價高。刮刀離心機(jī)：卸料省時，造價中等，是目前較流行的產(chǎn)品系列，不足之處是晶料有破損，不宜處理較細(xì)顆粒。沉降離心機(jī)：適合處理具有粘性，極細(xì)，比重差較大的物料，不足是處理后物料
2014
09-25

離心機(jī)用于紅細(xì)胞壓積容量測定
紅細(xì)胞壓積(packedcellvolume，PCV)又稱紅細(xì)胞比容(hematocrit，Hct)，是指紅細(xì)胞在血液中所占容積的比值，測定時將抗凝血在一定的條件下離心沉淀，即可測得每升血液中血細(xì)胞所占容積的比值。1．原理在100刻度玻璃管中，充入抗凝血至刻度，經(jīng)一定時間離心后，紅細(xì)胞下沉并緊壓于玻璃管中，讀取紅細(xì)胞柱所占的百分比，即為紅細(xì)胞壓積容量(PCV又稱壓容、比容)。2．器材(1)溫氏管：管長11cm，內(nèi)徑約2.5mm，管壁有100個刻度。一側(cè)自上而下標(biāo)有0～10，供測定血沉用，另一
2014
09-25

醫(yī)用離心機(jī)技術(shù)及選購介紹
離心機(jī)新技術(shù)簡介1．1溫度制冷當(dāng)轉(zhuǎn)子高速旋轉(zhuǎn)時，空氣摩擦生熱，轉(zhuǎn)子溫度會上升，試管中的樣品溫度也會升高。由于生物學(xué)樣品對溫度敏感。一般要求離心實驗中溫度保持4℃。沒有電腦控制的智能化技術(shù)，是不可能做到±l℃的精度。因此，用制冷機(jī)對離心腔冷卻，而達(dá)到冷卻轉(zhuǎn)子、冷卻樣品溫度的目的。但測量旋轉(zhuǎn)中的轉(zhuǎn)子的實際溫度極為困難，國內(nèi)外都采用在離心腔底部離轉(zhuǎn)子較近處理設(shè)溫度傳感器，間接測量轉(zhuǎn)子溫度。這里T樣品=T腔T補(bǔ)償。T補(bǔ)償又與轉(zhuǎn)子的類別、轉(zhuǎn)速及運行時間有關(guān)。1．2無刷電機(jī)直接驅(qū)動離心機(jī)是由電機(jī)帶轉(zhuǎn)子高速旋
2014
09-25

離心機(jī)的背洗原則及其方法
離心機(jī)能夠長周期運行的一個重要措施是離心機(jī)篩籃的背洗，就是說篩籃的背洗噴頭要連續(xù)常開，這是為了防止碳化母液在篩籃的背面結(jié)晶析出而造成篩籃的結(jié)疤和篩網(wǎng)的堵塞。液相法重灰的水堿和小蘇打采用推料離心機(jī)的經(jīng)驗說明離心機(jī)篩籃的背洗是非常關(guān)鍵的技術(shù)措施。尤其是在溫差變化的工況條件下飽和溶液中的固液分離。盡管碳化出堿液在分離過程中溫差變化較小，但是溫差和表面蒸發(fā)還是存在的。在篩籃上殘留的母液濃度總是會發(fā)生變化，因此篩籃背面的結(jié)晶結(jié)疤現(xiàn)象是存在的。離心機(jī)的背洗是*的。但是篩籃背洗是要用工藝淡水的，這部分工藝用水
2014
09-23

離心機(jī)如何選擇離心管和離心瓶
如何選擇離心管和離心瓶離心管主要用玻璃、塑料和不銹鋼制成，塑料離心管常用資料有聚乙烯（PE），聚碳酸酯（PC），聚丙烯（PP）等，其中PP管性能較好。塑料離心管的優(yōu)點是透明（或半透明），硬度小，可用穿刺法取出梯度。缺陷是易變形，抗有機(jī)溶劑腐蝕性差，運用壽命短。不銹鋼管強(qiáng)度大，不變形，能抗熱，抗凍，抗化學(xué)腐蝕。但用時也應(yīng)防止接觸強(qiáng)腐蝕性的化學(xué)藥品，如強(qiáng)酸、強(qiáng)堿等。塑料離心管都有管蓋，離心前管蓋必需蓋嚴(yán)，倒置不漏液。管蓋有三種作用：①避免樣品外泄。用于有放射性或強(qiáng)腐蝕性的樣品時，這點特別重要。②避免
2014
09-23

光度計主要配件及耗材
光度計的分類方式和叫法：光度計按波長分，可以分為紫外、可見分光光度計。按自動化程度，可分為手動，半自動和自動紫外可見分光光度計。按軟件可分為：帶掃描、不帶掃描。紫外分光光度計分單光束，假雙光束，雙光束。光度計的主要耗材配件。光度計主要配件及耗材比色皿、(1cm比色皿，2cm比色皿，3cm比色皿，5cm比色皿，10cm比色皿)石英比色皿(1cm石英比色皿)鹵鎢燈、氘燈、鎢燈、氙燈、(6V/30W，12V)、電路板、開關(guān)電源、比色架(1cm比色架，5cm比色架，10cm比色架)、樣品池，石墨管/石墨
2014
09-23

儀器校準(zhǔn)的要求和與校定的區(qū)別
一般情況下儀器校準(zhǔn)應(yīng)滿足如下基本要求：1)環(huán)境條件：校準(zhǔn)如在檢定(校準(zhǔn))室進(jìn)行，則環(huán)境條件應(yīng)滿足實驗室要求的溫度、濕度等規(guī)定。校準(zhǔn)如在現(xiàn)場進(jìn)行，則環(huán)境條件以能滿足儀表現(xiàn)場使用的條件為準(zhǔn)。2)儀器：作為校準(zhǔn)用的標(biāo)準(zhǔn)儀器其誤差限應(yīng)是被校表誤差限的1/3~1/10。3)人員：校準(zhǔn)雖不同于檢定，但進(jìn)行校準(zhǔn)的人員也應(yīng)經(jīng)有效的考核，并取得相應(yīng)的合格證書，只有持證人員方呆出具校準(zhǔn)證書和校準(zhǔn)報告，也只有這種證書和報告才認(rèn)為是有效的。儀器的校準(zhǔn)與檢定有同有異：校準(zhǔn)和檢定是兩個不同的概念，但兩者之間有密切的。校準(zhǔn)一
2014
09-23

分光光度計的原理和分類
一.分光光度計的一般原理：分光光度計是利用分光光度法，通過測定被測物質(zhì)在特定波長處或一定波長范圍內(nèi)光的吸收度，對該物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析。不同種類的分光光度計的基本原理相似，都是利用一個可以產(chǎn)生多個波長的光源，通過系列分光裝置，從而產(chǎn)生特定波長的光源。光源透過測試的樣品后，部分光源被吸收，通過測量樣品的吸光值，經(jīng)過計算可以轉(zhuǎn)化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。二.分光光度計有哪些不同的類型，不同種類的應(yīng)用領(lǐng)域的區(qū)別：分光光度計有哪幾種不同的分類方式：1.分光光度計按照波長及應(yīng)用領(lǐng)域的
2014
09-23

紫外-可見分光光度計組成
紫外-可見分光光度計由5個部件組成：①輻射源。必須具有穩(wěn)定的、有足夠輸出功率的、能提供儀器使用波段的連續(xù)光譜，如鎢燈、鹵鎢燈（波長范圍350～2500納米），氘燈或氫燈（180～460納米），或可調(diào)諧染料激光光源等。②單色器[1]。它由入射、出射狹縫、透鏡系統(tǒng)和色散元件（棱鏡或光柵）組成，是用以產(chǎn)生高純度單色光束的裝置，其功能包括將光源產(chǎn)生的復(fù)合光分解為單色光和分出所需的單色光束。③試樣容器，又稱吸收池。供盛放試液進(jìn)行吸光度測量之用，分為石英池和玻璃池兩種，前者適用于紫外到可見區(qū)，后者只適用于可
2014
09-23

紫外-可見分光光度法
《中華人民共和國藥典》2005年版*部附錄VA（P附錄28）：儀器的校正和檢定（1）波長由于環(huán)境因素對機(jī)械部分的影響，儀器的波長經(jīng)常會略有變動，因此除應(yīng)定期對所用的儀器進(jìn)行全面校正檢定外，還應(yīng)于測定前校正測定波長。常用汞燈中的較強(qiáng)譜線237.83nm、253.65nm、275.28nm、296.73nm、313.16nm、334.15nm、365.02nm、404.66nm、435.83nm、546.07nm與576.96nm，或用儀器中氘燈的486.02nm與656.10nm譜線進(jìn)行校正，鈥玻
2014
09-22

二氧化碳培養(yǎng)箱的選購（2）
二、二氧化碳濃度控制1.兩種控制系統(tǒng)：紅外傳感器（IR）或熱導(dǎo)傳感器（TCD）進(jìn)行測量。兩種傳感器都是準(zhǔn)確的，但都各有優(yōu)缺點。熱導(dǎo)傳感器監(jiān)控CO2濃度的工作原理是基于對內(nèi)腔空氣熱導(dǎo)率的連續(xù)測量,輸入CO2氣體的低熱導(dǎo)率會使腔內(nèi)空氣的熱導(dǎo)率發(fā)生變化,這樣就會產(chǎn)生一個與CO2濃度直接成正比的電信號。紅外傳感器（IR）它是通過一個光學(xué)傳感器來檢測CO2水平的。IR系統(tǒng)包括一個紅外發(fā)射器和一個傳感器，當(dāng)箱體內(nèi)的CO2吸收了發(fā)射器發(fā)射的部分紅外線之后，傳感器就可以檢測出紅外線的減少量，而被吸收紅外線的量正

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