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凝膠成像系統(tǒng)的四個基本選購原則(二)2019/03/15
如何從紛繁的市場上選擇到一款好的成像設(shè)備呢?很多號稱-的設(shè)備是否真的能夠打滿分呢?擁有一臺好的、運行穩(wěn)定的設(shè)備是實驗者的心愿。下面的文章就向您介紹選擇成像系統(tǒng)的“四個基本選購原則”。原則三:“只比對的,不比費的”我們崇尚實踐,然而,現(xiàn)實經(jīng)常不配合我們,或者是沒有Demo機,或者是有時我們還真的很難根據(jù)實驗結(jié)果分辨出性能上的差異,這時候第三項原則將至關(guān)重要。當我們在考察儀器Demo的情況后還是無法分辨其性能之優(yōu)劣時,除了可以了解其他人的使用情況和評價,就只能推開儀器看參數(shù)了。當然看參數(shù)是有竅門的。
凝膠成像系統(tǒng)的四個基本選購原則(一)2019/03/15
如何從紛繁的市場上選擇到一款好的成像設(shè)備呢?很多號稱-的設(shè)備是否真的能夠打滿分呢?擁有一臺好的、運行穩(wěn)定的設(shè)備是實驗者的心愿。下面的文章就向您介紹選擇成像系統(tǒng)的“四個基本選購原則”。原則一:“只選對的,不選貴的”市場上各品牌、各型號的成像儀林林種種,但是從成像原理上可以分成兩大類,分別是拍照成像和掃描成像。拍照成像簡單說就是樣品和相機的相對位置不動,可以進行單次成像或多次成像;掃描成像則是相機對樣品進行局部成像,然后通過樣品或相機的移動對整個樣品進行成像。拍照成像目前主要采用CCD相機成像,由于
凝膠成像CCD和與CMOS的區(qū)別2019/03/15
每個公司生產(chǎn)的凝膠成像從結(jié)構(gòu)上看都是差不多的,都可以用于DNA/RNA/蛋白質(zhì)等凝膠電泳不同染色(如EB、考馬氏亮藍、銀染)等非化學(xué)發(fā)光成像檢測分析,主要區(qū)分看凝膠成像的靈敏度與分辯率,要想拍出的圖像質(zhì)量好主要是取決于CCD的尺寸、像素,還有成像的一個軟件功能。關(guān)于CCD的介紹:一:CCD是ChargeCoupledDevice(電荷耦合器件)的縮寫,它是一種半導(dǎo)體成像器件,因而具有靈敏度高、抗強光、畸變小、體積小、壽命長、抗震動等優(yōu)點。(1)CCD尺寸與圖像質(zhì)量CCD尺寸是影響其成像表現(xiàn)力的一
電泳時膠回收和凝膠成像的注意事項2019/03/15
電泳時膠回收切膠的注意事項:1.電泳的buffer和gel都是新制的,切膠的臺子清理干凈,刀片好洗凈,總之一句話就是保證切下的帶沒有外源dna污染。2.切膠是要把整個目的片斷所在位置的膠全部回收。為了減少膠的體積,可以用相對比較薄的膠來做,只要夠點樣即可,也可采用薄而寬的梳子來跑膠。3.關(guān)于防護,在一般有機玻璃后就足夠了,戴上防護面具以保護眼睛,如果戴樹脂眼鏡就可以了。要是非常害怕紫外照射,或者對于膠有特殊要求,例如要求不含EB,可以采用點marker和帶刻度的尺子一起照相的方法來確定目的條帶在
凝膠成像分析系統(tǒng)的選擇2019/03/13
一、前言:隨著生物學(xué)研究的逐漸加深和生物學(xué)相關(guān)的分子生物交叉學(xué)科研究逐步加深,分子成像分析系統(tǒng)的實際應(yīng)用逐漸的普遍化,但是現(xiàn)在廣大的用戶面對市場上品牌眾多進口和國產(chǎn)的分子影像成像分析系統(tǒng)怎么樣選擇是一個難題。二、分子影像成像分析系統(tǒng)包括成像系統(tǒng)和分析軟件系統(tǒng),成像系統(tǒng)包括:,相機,暗室,透射儀,UV和白光照明、琥珀色濾光玻片和UV防護罩等小配件,相機根據(jù)CCD有可以分為有低到高:45萬左右,100萬左右,140萬左右,200萬左右,300萬左右,400萬左右,500萬左右,甚至還有更高的,根據(jù)C
如何選購凝膠成像分析系統(tǒng)2019/03/13
一、前言:分子生物學(xué)作為一門基礎(chǔ)科學(xué),分子生物學(xué)已滲透到現(xiàn)代生物學(xué)的各個學(xué)科分支,隨著生物學(xué)理論與實驗方法的不斷進步,它的應(yīng)用領(lǐng)域也在不斷擴大?,F(xiàn)在,生物學(xué)的影響已經(jīng)擴展到食品、化工、環(huán)境保護、能源、冶金等等諸多領(lǐng)域的發(fā)展。生物學(xué)的分支學(xué)科各有一定的研究內(nèi)容而又相互依賴、互相交叉。此外,生命作為一種物質(zhì)運動形態(tài),有它自己的生物學(xué)規(guī)律,同時又包含并遵循物理和化學(xué)的規(guī)律。因此,生物學(xué)同物理學(xué)、化學(xué)有著密切的關(guān)系。生物分布于地球表面,是構(gòu)成地球景觀的重要因素。因此,生物學(xué)和地學(xué)也是互相滲透、互相交叉的
技術(shù)專題:凝膠層析法脫鹽和分離蛋白質(zhì)2019/02/28
(一)原理凡鹽析所獲得的粗制蛋白質(zhì)(鹽析得到的IgG)中均含有硫酸銨等鹽類,這類將影響以后的純化,所以純化前均應(yīng)除去,此過程稱為“脫鹽”(desalthing)。脫鹽常用透析法和凝膠過濾法,這兩種方法各有利弊。前者的優(yōu)點是透析后析品終體積較小,但所需時間較長,且鹽不易除盡;凝膠過濾法則能將鹽除盡,所需時間也短,但其凝膠過濾后樣品體積較大。所以,要根據(jù)具體情況選擇使用。前實驗中樣品體積較小,凝膠達濾后樣品體積不會太增加,所以選用凝膠過濾法。(二)試劑與器材(1)SephadexG-25。(2)0.
專題蛋白質(zhì)技術(shù)的SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳實驗2019/02/28
[原理]蛋白質(zhì)在十二烷基硫酸鈉(SDS)和巰基乙醇的作用下,分子中的二硫鍵還原,氫鍵等打開,形成按1.4gSDS/1g蛋白質(zhì)比例的SDS-蛋白質(zhì)多肽復(fù)合物,該復(fù)合物帶負電,故可在聚丙烯酰胺凝膠電泳中向正極遷移,且主要由于凝膠的分子篩作用,遷移速率與蛋白質(zhì)的分子量大小有關(guān),因此可以濃縮和分離蛋白質(zhì)多肽。聚丙烯酰凝膠電泳分離蛋白質(zhì)多數(shù)采用一種不連續(xù)的緩沖系統(tǒng),主要分為較低濃度的成層膠和較高濃度的分離膠,配制凝膠的緩沖液,其pH值和離子強度也相應(yīng)不同,故電泳時,樣品中的SDS-多肽復(fù)合物沿移動的界面移
蛋白質(zhì)技術(shù)專題:蛋白等電聚焦凝膠電泳技術(shù)(二)2019/02/27
8.常見問題及解釋1)若產(chǎn)生模糊條帶則證明聚焦不*,這可能是由于電泳中的問題或大分子蛋白質(zhì)限制了其在凝膠中的遷移能力。若聚焦時間過長或過短,條帶的分辨率會下降。增加電壓梯度可以使帶形更加銳利。高分子量蛋白質(zhì)在瓊脂糖凝膠中可以聚焦的更好。2)產(chǎn)生歪斜的條帶通常由于不正確的pH梯度,檢查電極是否潔凈,是否同凝膠鏈接良好,同時應(yīng)該注意凝膠的邊緣效應(yīng)。3)蛋白帶的紋理現(xiàn)象是等電聚焦中經(jīng)常遇到的問題,可能是一下原因:a,蛋白質(zhì)聚集或沉淀(尤其在等電點附近),或上樣量過大,8M尿素通常用來防止蛋白質(zhì)聚集,去
蛋白質(zhì)技術(shù)專題:蛋白等電聚焦凝膠電泳技術(shù)(一)2019/02/27
1.原理等電聚焦凝膠電泳是依據(jù)蛋白質(zhì)分子的靜電荷或等電點進行分離的技術(shù),等電聚焦中,蛋白質(zhì)分子在含有載體兩性電解質(zhì)形成的一個連續(xù)而穩(wěn)定的線性pH梯度中電泳。載體兩性電解質(zhì)是脂肪族多氨基多羧酸,在電場中形成正極為酸性,負極為堿性的連續(xù)的pH梯度。蛋白質(zhì)分子在偏離其等電點的pH條件下帶有電荷,因此可以在電場中移動;當?shù)鞍踪|(zhì)遷移至其等電點位置時,其靜電荷數(shù)為零,在電場中不再移動,據(jù)此將蛋白質(zhì)分離。等電聚焦中,只有在凝膠兩端給以高電壓時,才能獲得較好的蛋白質(zhì)條帶分辨率,這就需要非常有效的凝膠冷卻系統(tǒng)(否
蛋白質(zhì)技術(shù)專題:血清蛋白瓊脂糖凝膠電泳2019/02/27
【原理】瓊脂糖(agarose)是經(jīng)過挑選,以質(zhì)地較純的瓊脂(agar)作為原料而制成的。瓊脂在化學(xué)上是由瓊脂糖和瓊脂膠組成的復(fù)合物。瓊脂膠是一含有硫酸根和羥基的多糖,它具有離子交換性質(zhì),這種性質(zhì)會給電泳及凝膠過濾以的影響。瓊脂糖是直鏈多糖,它由D-半乳糖和3,6-脫水-L-半乳糖的殘基交替排列組成。瓊脂糖主要通過氫鍵而形成凝膠。電泳時因凝膠含水量大(98-99%),近似自由電泳,因為固體支持物的影響少,故電泳速度快,區(qū)帶整齊。而且由于瓊脂糖不含帶電荷的基團,電滲影響很少,是一種較好的電泳材料,
蛋白質(zhì)技術(shù)專題:凝膠過濾層析實驗2019/02/25
凝膠過濾層析(gelfiltrationchromatography)法又稱排阻層析或分子篩方法,主要是根據(jù)蛋白質(zhì)的大小和形狀,即蛋白質(zhì)的質(zhì)量進行分離和純化。層析柱中的填料是某些惰性的多孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)物質(zhì),多是交聯(lián)的聚糖類物質(zhì),使蛋白質(zhì)混合物中的物質(zhì)按分子大小的不同進行分離。實驗方法蛋白質(zhì)的凝膠過濾分離實驗材料蛋白質(zhì)試劑、試劑盒凝膠過濾緩沖液儀器、耗材布氏漏斗凝膠過濾層析柱分光光度計實驗步驟1.如果凝膠過濾的介質(zhì)是干粉,則需在凝膠過濾緩沖液中*溶脹。2.在遠離過往通道及直接光照的恒溫環(huán)境,將層折柱垂
瓊脂糖凝膠電泳的原理及實驗過程2019/02/25
實驗原理瓊脂糖凝膠電泳常用于分離、鑒定DNA、RNA分子混合物,以瓊脂凝膠作為支持物,利用DNA分子在電場中時的電荷效應(yīng)和分子篩效應(yīng),達到分離混合物的目的。DNA分子在高于其等電點的溶液中帶負電,在電場中由陰極向陽極運動。在一定的電場強度下,忽略DNA分子攜帶的電荷,DNA分子的遷移速度取決于分子篩效應(yīng),即分子本身的大小和構(gòu)型是主要的影響因素。DNA分子的遷移速度與相對分子量成反比。不同構(gòu)型的DNA分子的遷移速度不同。如環(huán)形DNA分子樣品,其中有三種構(gòu)型的分子:超螺旋分子(cccDNA)、開環(huán)分
蠕動泵、恒流泵及軟管泵的選型方法2019/02/20
蠕動泵的原理簡介:蠕動泵由于輸出的流量非常穩(wěn)定因此又叫恒流泵,由于蠕動泵是靠擠壓軟管而達到泵送流體的功能的因此又叫軟管泵。蠕動泵的機械原理十分簡單。它是由轉(zhuǎn)輪擠壓著泵管并轉(zhuǎn)動從而推動管內(nèi)的流體向前移動從而產(chǎn)生流體流動的,就象用兩根手指夾擠一跟充滿液體的軟管一樣,隨著手指的移動,管內(nèi)形成負壓,液體隨之流動。蠕動泵、恒流泵和軟管泵的特點:1、潔清無污染:流體只通過和接觸蠕動泵軟管。2、精度高:恒流、重現(xiàn)精度高達0.5%,流量可**調(diào)節(jié)。3、低剪切力:是輸送剪切敏感,侵蝕性強流體的理想工具。4、耐腐蝕
按工作原理對恒流泵的分類2019/01/31
1.容積式泵靠工作部件的運動造成工作容積周期性地增大和縮小而吸排液體,并靠工作部件的擠壓而直接使液體的壓力能增加。根據(jù)運動部件運動方式的不同又分為:往復(fù)泵和回轉(zhuǎn)泵兩類。根據(jù)運動部件結(jié)構(gòu)不同,有:活塞泵和柱塞泵;有齒輪泵、螺桿泵、葉片泵和水環(huán)泵。2.葉輪式泵葉輪式泵是靠葉輪帶動液體高速回轉(zhuǎn)而把機械能傳遞給所輸送的液體。根據(jù)泵的葉輪和流道結(jié)構(gòu)特點的不同可分為:1)離心泵2)軸流泵3)混流泵4)旋渦泵。3.噴射式泵是靠工作流體產(chǎn)生的高速射流引射流體,然后再通過動量交換而使被引射流體的能量增加。
凝膠成像分析系統(tǒng)選購指南2019/01/17
“只比對的,不比費的”我們崇尚實踐,然而,現(xiàn)實經(jīng)常不配合我們,或者是沒有Demo機,或者是有時我們還真的很難根據(jù)實驗結(jié)果分辨出性能上的差異,當我們在考察儀器Demo的情況后還是無法分辨其性能之優(yōu)劣時,除了可以了解其他人的使用情況和評價,就只能推開儀器看參數(shù)了。當然看參數(shù)是有竅門的。很多成像儀的參數(shù)寫了幾十條,其實關(guān)鍵的就那么幾條。我們對比不同廠商的參數(shù)時一定要注意只比關(guān)鍵的,而對那些無關(guān)痛癢的參數(shù)則大可以視而不見。另外,千萬不要被廠商自己給相應(yīng)產(chǎn)品的評分所欺騙,他的那套評分系統(tǒng)僅僅是相對自己的產(chǎn)
恒流泵使用技巧2019/01/04
一:新收到的恒流泵,讓其先靜置3-5小時,再進行測試,測試前先檢查恒流泵外觀是否受損,確認無誤后再進行測試。(靜置主要是防止快遞公司在運輸過程中可能會對恒流泵造成一定程度的損害,可能影響測試效果)二:恒流泵盡量不要放置在室外使用,如一定要在室外使用,要有個的盒子或其它東西為其遮雨,可以有效延長蠕動泵壽命。
恒流泵的簡介2018/12/21
恒流泵是市場上各種正位移泵中成長的幾種之一。然而,許多人還不太熟悉這種泵的技術(shù)原理及其優(yōu)點。蠕動泵也稱作泵管泵。在過去,這種泵幾乎全部用于實驗室。但經(jīng)過重新設(shè)計后,這種泵的流速和壓力都得到了提高?,F(xiàn)在,大量的恒流泵已成功應(yīng)用于化學(xué)流程控制和生產(chǎn)領(lǐng)域恒流泵的普及可歸因于其設(shè)計。該設(shè)計采用電機來驅(qū)動一組輥子轉(zhuǎn)動。輥子相繼碾過柔軟的泵管,對其進行反復(fù)的壓縮和釋放。這種擠壓作用產(chǎn)生真空,將流體吸入并通過泵管,從而完成泵送過程。因為只有泵管是過水部件,所以這種泵的維護和清潔簡單方便。
化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)CCD特性解析2018/11/22
化學(xué)發(fā)光是物質(zhì)在發(fā)生化學(xué)反應(yīng)時產(chǎn)生的一種光輻射現(xiàn)象,根據(jù)其特性,在生物學(xué)領(lǐng)域中常被用來進行蛋白質(zhì)與DNA的檢測?;瘜W(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)相較具有高靈敏度、無材料損耗、自動曝光過程、電子圖片存檔等眾多優(yōu)勢,但是,由于系統(tǒng)是依靠HRP或AP等特定的酶與底物結(jié)合來運作,因此所產(chǎn)生的光輻射比較微弱,相應(yīng)的光信號的采集過程難度就大了不少。所以,想要獲取到如此微弱的化學(xué)發(fā)光,就需要配置性能較高的CCD相機。衡量CCD性能高低的指標,有分辨率、靈敏度、信噪比、動態(tài)范圍等,而化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)就需要CCD具有以高分辨率、
電腦核酸蛋白檢測儀知識大全2018/11/19
電腦核酸蛋白檢測儀是自動液相色譜分離層析儀中分離具有紫外吸收物質(zhì)(蛋白、核酸、多肽、酶)的種紫外檢測裝置,其原理是根據(jù)物質(zhì)(樣品)對紫外光有明顯吸收的特征,實現(xiàn)對樣品成份含量比對分析,以便進行樣品蛋白、核酸物質(zhì)識別檢測和含量測定??芍苯幼x出光密度A值,且波長準確度和重復(fù)性、單色性好、定性、定量分析中能直接記錄各個峰面積的相對峰面值,并能計算質(zhì)量相對的含量。產(chǎn)品具有微量樣品池進行連續(xù)檢測功能,在柱層析分離分析過程中,洗脫液流過嘉鵬樣品池,層析圖譜采集儀即可自動繪制出樣品分離的圖譜(吸收峰或透過峰)
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