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2023
09-272023
09-27核酸電泳實(shí)驗(yàn)問(wèn)題有哪些?如何解決?
你知道核酸電泳實(shí)驗(yàn)問(wèn)題有哪些嗎?該如何解決呢?讓我們一起來(lái)看看吧!一、無(wú)條帶或幾乎看不到條帶原因:1.上樣染料掩蓋目標(biāo)條帶;2.凝膠超限運(yùn)行;3.電極反接;4.染色敏感度低;5.光源錯(cuò)誤。解決方法:1.檢查電泳中使用的加載染料的表觀遷移大小。因?yàn)槿玖峡赡軙?huì)掩蓋和隱藏目標(biāo)條帶,特別是在樣品量低的情況下。2.監(jiān)測(cè)加載染料的運(yùn)行時(shí)間和遷移,以避免將較小的樣品分子從凝膠上運(yùn)走。3.確保將電極正確連接至電源。設(shè)置水平凝膠時(shí),凝膠孔應(yīng)與負(fù)極位于同一側(cè)。4.檢查制造商提供的用于檢測(cè)核酸的熒光染色劑的靈敏度。增2023
09-27qPCR曲線常見(jiàn)問(wèn)題有哪些?如何解決?
在qPCR實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,經(jīng)常會(huì)遇到異常擴(kuò)增曲線和熔解曲線的困擾,那么qPCR曲線常見(jiàn)問(wèn)題有哪些呢?該如何解決呢?讓我們一起來(lái)看看吧!一、擴(kuò)增曲線相關(guān)問(wèn)題1.無(wú)擴(kuò)增曲線可能原因:(1)沒(méi)有打開(kāi)熒光信號(hào)采集。檢查程序設(shè)置,三步法擴(kuò)增程序在72℃延伸階段采集信號(hào),兩步法擴(kuò)增程序的信號(hào)采集設(shè)置在退火延伸步驟。(2)引物降解。可通過(guò)PAGE電泳檢驗(yàn)引物的完整性。(3)模板濃度低。建議增加模板投入量或重新制備較高濃度模板。2.擴(kuò)增曲線不光滑可能原因:(1)儀器長(zhǎng)時(shí)間未校準(zhǔn),在檢測(cè)中出現(xiàn)了波動(dòng),建議定期校準(zhǔn)儀器2023
09-272023
09-262023
09-262023
09-262023
09-262023
09-262023
09-26ALZET植入式滲透壓泵在蛋白質(zhì)和肽遞送上的應(yīng)用
許多蛋白質(zhì)和肽在體內(nèi)的消除半衰期極短。當(dāng)通過(guò)傳統(tǒng)遞送方法(比如注射)給藥時(shí),這些化合物會(huì)被迅速消除,從而導(dǎo)致血漿和組織中重組蛋白的水平變化很大。通過(guò)持續(xù)給藥,ALZET植入式滲透壓泵可以維持短半衰期蛋白質(zhì)的有效水平,揭示有價(jià)值的組織特異性作用,或最DA限度地減少全身毒性。ALZET植入式滲透壓泵已廣泛用于研究蛋白質(zhì)和肽以及其他生物技術(shù)化合物在體內(nèi)的作用。已發(fā)表的文獻(xiàn)中在蛋白質(zhì)和肽遞送上的應(yīng)用示例如下表:遞送物質(zhì)名稱(chēng)遞送物質(zhì)名稱(chēng)遞送物質(zhì)名稱(chēng)促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)腦啡肽(Enkephalins2023
09-252023
09-25磁珠法核酸提取過(guò)程中的常見(jiàn)誤區(qū)有哪些?
磁珠法核酸提取是傳統(tǒng)DNA提取方法wu法比擬的,那么在磁珠法核酸提取過(guò)程中的常見(jiàn)誤區(qū)有哪些呢?讓我們一起來(lái)看看吧!一、磁珠越多,提取效果越好磁珠的主要特點(diǎn)是既可以分散于液體中,也可以在外加磁場(chǎng)作用下以固態(tài)方式和液相分li任何試劑體系,磁珠和液體的比例都應(yīng)該是有一定閾值的,超過(guò)一定的比例,過(guò)多的磁珠將因?yàn)闊o(wú)法均勻分散于液體中,而喪失其分散的特性,也使得洗滌過(guò)程中無(wú)法充分增加核酸磁珠和液體接觸的效率。而過(guò)量的磁珠也會(huì)吸附更多的雜質(zhì),對(duì)于除雜的效果影響非常大。甚至有些時(shí)候,過(guò)多的磁珠會(huì)吸附蛋白酶、溶菌2023
09-22蛋白質(zhì)提純的注意事項(xiàng)和常見(jiàn)問(wèn)題有什么?
在進(jìn)行任何一種蛋白質(zhì)純化的時(shí)候,都要時(shí)刻注意維護(hù)它的穩(wěn)定性,保護(hù)它的活性,那么你知道蛋白質(zhì)提純的注意事項(xiàng)和常見(jiàn)問(wèn)題有什么嗎?讓我們一起來(lái)看看吧!一、注意事項(xiàng):1、操作盡可能置于冰上或者在冷庫(kù)內(nèi)進(jìn)行。2、濃度不要太稀,蛋白濃度維持在μg/mL~mg/mL。3、選擇合適的pH,除非是進(jìn)行聚焦層析,所使用的緩沖溶液pH避免與pI相同,防止蛋白質(zhì)的沉淀。4、使用蛋白酶抑制劑,防止蛋白酶對(duì)目標(biāo)蛋白的降解;在純化細(xì)胞中的蛋白質(zhì)時(shí),加入DNA酶,降解DNA,防止DNA對(duì)蛋白的污染。5、避免樣品反復(fù)凍融和劇烈攪2023
09-222023
09-21細(xì)胞培養(yǎng)基的滅菌及儲(chǔ)存方法有哪些?
不同的培養(yǎng)基由于其營(yíng)養(yǎng)成份不同,滅菌方式和儲(chǔ)存方法也可能不同。那么細(xì)胞培養(yǎng)基的滅菌及儲(chǔ)存方法有哪些呢?讓我們一起來(lái)看看吧!一、不同細(xì)胞培養(yǎng)基的除菌方式及注意事項(xiàng)某些培養(yǎng)基(如MEM)可進(jìn)行高壓滅菌,這類(lèi)培養(yǎng)基一般不含有L-谷氨酰胺和碳酸氫鈉,一般是在培養(yǎng)基高壓滅菌后才加入。另外可用耐高壓的谷氨酸鹽(如L-丙氨酰-L-谷氨酰胺)代替L-谷氨酰胺??筛邏簻缇呐囵B(yǎng)基在121℃、15psi,15分鐘的條件下wan全可達(dá)到滅菌效果及營(yíng)養(yǎng)成分的最小損失,不需將滅菌時(shí)間延長(zhǎng)。絕大多數(shù)細(xì)胞培養(yǎng)基不適宜高壓滅菌2023
09-212023
09-202023
09-202023
09-19原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)主要區(qū)別是什么?
你知道原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)主要區(qū)別是什么嗎?讓我們一起來(lái)看看吧!一、原代培養(yǎng)原代培養(yǎng)即第一次培養(yǎng),是指將培養(yǎng)物放置在體外生長(zhǎng)環(huán)境中持續(xù)培養(yǎng),中途不分割培養(yǎng)物的培養(yǎng)過(guò)程。有幾方面含義:1.養(yǎng)物一經(jīng)接種到培養(yǎng)器皿(瓶)中就不再分割,任其生長(zhǎng)繁殖;2.原代培養(yǎng)中的“代”并非細(xì)胞的“代”數(shù),因?yàn)榕囵B(yǎng)過(guò)程中細(xì)胞經(jīng)多次分裂已經(jīng)產(chǎn)生多代子細(xì)胞;3.原代培養(yǎng)過(guò)程中不分割培養(yǎng)物不等于不更換培養(yǎng)液,也不等于不更換培養(yǎng)器皿。正常細(xì)胞培養(yǎng)的世代數(shù)有限,只有癌細(xì)胞和發(fā)生轉(zhuǎn)化的細(xì)胞才能無(wú)限生長(zhǎng)下去。所謂轉(zhuǎn)化即是指正常細(xì)胞在某2023
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