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用于轉(zhuǎn)化細胞培養(yǎng)的人血清制備秘方2017/09/19

轉(zhuǎn)化細胞認為天然培養(yǎng)基主要取自動物體液或從動物組織分離提取,如血漿、血清、淋巴液、雞胚浸出液等,其中動物血清對細胞的生長繁殖發(fā)揮著難以替代的作用。血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,其組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、條件和營養(yǎng)條件不同而異,其中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等,這些物質(zhì)能極大的促進細胞生長。血清中含有豐富的細胞生長必須的營養(yǎng)成分,故主要供組織培養(yǎng)、細胞培養(yǎng)和診斷試劑等用。常見用于培養(yǎng)基的血清制品,按不同研究及使用目的,包括胎牛

成熟紅干細胞的抗癌機制是什么？2017/09/14

美國和加拿大科學(xué)家日前發(fā)現(xiàn)，在紅干細胞發(fā)育過程中，有一種酶充當(dāng)著“拆遷規(guī)劃員”的角色，負責(zé)把不需要的蛋白質(zhì)打上標記以便拆除，使細胞變成高度專門化的成熟紅細胞。該發(fā)現(xiàn)將有助醫(yī)學(xué)界開發(fā)治療血液疾病和癌癥的新方法。美國哈佛大學(xué)醫(yī)學(xué)院等機構(gòu)的研究人員在美國《科學(xué)》雜志上報告說，這種名叫UBE的酶是紅細胞完成分化的關(guān)鍵因素，缺少這種酶會導(dǎo)致貧血。紅細胞是哺乳動物體內(nèi)zui簡潔的細胞之一，主要由血紅蛋白組成，其余部分極度精簡，以便盡量地運輸氧氣。骨髓中的造血干細胞分化成半成熟的網(wǎng)織紅細胞，后者即將發(fā)育成熟時

人正常組織來源細胞試管內(nèi)造出大量紅細胞和血小板2017/09/12

科學(xué)家們一般通過對成人人正常組織來源細胞進行重組，讓其回到初始的干細胞狀態(tài)，從而獲得iPS細胞。iPS細胞可以利用皮膚細胞、血液細胞等成熟的身體細胞生成，并可進一步分化成各種其他類型的細胞。由于其源于病人體內(nèi)，不會引發(fā)免疫排斥反應(yīng)，從而成為生物研究領(lǐng)域的一個強大工具以及再生醫(yī)療的重要來源。據(jù)物理學(xué)家組織網(wǎng)近日報道，美國科學(xué)家采用一種新奇的方法，對誘導(dǎo)多能干細胞（iPS細胞）進行分化，在試管內(nèi)出了無數(shù)的人類紅血細胞和血小板。他們表示，得到的紅血細胞有望用于診查瘧疾和鐮狀細胞血癥，而血小板則可用來探

腫瘤細胞培養(yǎng)常見問題的對策2017/09/07

腫瘤細胞培養(yǎng)常見問題的對策：1.細菌或真菌污染。?建議解決方法1.丟棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌培養(yǎng)細胞不貼壁?可能原因1.胰蛋白酶消化過度。2.支原體污染。3.培養(yǎng)瓶瓶底不干凈。4.培養(yǎng)液pH值過堿（NaHCO3分解）。5.消化液或培養(yǎng)液配制錯誤、過期儲存、儲存不當(dāng)。6.細胞老化（如傳代前細胞已匯合導(dǎo)致失去貼附性）。7.接種細胞起始濃度太低或太高。?建議解決方法1.縮短胰蛋白酶消化時間或降低胰蛋白酶濃度。2.分離培養(yǎng)物，檢測支原體。清潔支架和培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污染，丟棄培養(yǎng)物。3.注意刷洗，或換

轉(zhuǎn)化細胞遭受壓力時2017/09/05

轉(zhuǎn)化細胞就像一個小型的工廠，負責(zé)生成超過2.5萬種具有非常特異性的三維形狀的不同蛋白質(zhì)。就像一條不堪重負的流水線會出錯那樣，壓力狀態(tài)下的細胞zui終會生成未折疊或錯誤折疊的畸形蛋白質(zhì)。研究人員證實細胞能夠識別出這些錯誤折疊蛋白的累積，就像飽受壓力的員工有可能暫時將文件從擠爆了的收件箱移動到“雜物抽屜”中一樣，細胞會重新安排它的工作量以此來作出反應(yīng)。這項研究，有可能提供有關(guān)錯誤折疊的蛋白質(zhì)堆積導(dǎo)致的一些疾病，如阿爾茨海默氏癥、肌萎縮側(cè)索硬化癥、亨廷頓氏病、帕金森病和2型糖尿病的新認識。在近幾十年來

肝轉(zhuǎn)化細胞中的多倍性2017/08/31

多肝轉(zhuǎn)化細胞是多倍體，含有4倍、8倍、16倍或更多倍的單倍體染色體組，盡管這一現(xiàn)象的重要性并不清楚?，F(xiàn)在，用小鼠所進行的一項研究表明，肝細胞在活體中既可增加也可降低它們的多倍性。多倍性逆轉(zhuǎn)以前被認為是減數(shù)分裂所*的，但這項工作表明，它也可出現(xiàn)在正常體細胞中。多倍性的增加是通過失敗的胞質(zhì)分裂出現(xiàn)的，而多倍性的減少則是多極性有絲分裂的一個結(jié)果。所導(dǎo)致的遺傳異質(zhì)性在肝受傷之后也許是有利的，在這個時候，具有遺傳穩(wěn)定性的轉(zhuǎn)化細胞將會從事先存在的一組多樣化基因型中被選擇出來。小鼠血清總補體(CH50)ELI

解析轉(zhuǎn)化細胞培養(yǎng)方法2017/08/29

轉(zhuǎn)化細胞比乳鼠心肌難養(yǎng)，用無血清培養(yǎng)基，呈桿狀，橫紋清楚，在培養(yǎng)基里細胞不搏動。大鼠心肌細胞分離一般是采用二型膠原酶分離，濃度為1mg/ml（用無鈣臺氏液配制），同時酶液里加入?；撬幔珺SA。一般采用Langendorff灌流的方法，大鼠開胸后，迅速取出心臟，放入冰的臺氏液中，找到主動脈后，掛上Langendorff裝置，衡流泵灌入無鈣臺氏液（37度），開始心臟會搏動幾下，這樣把心臟中的淤血擠出（此處也有人用有鈣臺氏液灌流，好讓心臟充分搏動，把淤血擠出，不過我們摸索發(fā)現(xiàn)只要取心臟到掛上去的時間短

*干細胞捕獲和制備的平臺2017/08/24

干細胞有了用新興的微流體方法和分子生物學(xué)技術(shù)，從群體噪音中提取單細胞信號已不再是遙不可及。作為單細胞基因組學(xué)領(lǐng)域的者，F(xiàn)luidigm自2007年以來就一直為研究人員提供BioMark™和BioMarkHD平臺，讓我們能夠輕松檢測到單細胞水平上的基因組特征。如今，F(xiàn)luidigm又推出市場上*單細胞捕獲和制備的平臺——C1™單細胞全自動制備系統(tǒng)。C1系統(tǒng)，基于Fluidigm創(chuàng)新的微流體技術(shù)，能夠讓研究者們快速可靠地分離單個細胞并進行基因組分析。地將分離細胞、提取RNA、逆轉(zhuǎn)錄和預(yù)擴增mRNA的

離體人正常組織來源細胞培養(yǎng)需要的生理條件2017/08/22

簡言之，即人正常組織來源細胞需要什么就提供什么，道理是如此，真正能做到這點尚需時日，人們至今對細胞的生命周期控制機理認識不足，癌細胞雖然也來自正常細胞，但至今不知道究竟為什么癌細胞很難停止已經(jīng)啟動的有害分裂，盡管如此，人們長期的研究結(jié)果表明，離體細胞培養(yǎng)需要的基本條件就是下列細胞生理條件。1.溫度溫度過低時細胞生長緩慢甚至不生長。利用冷凍保藏細胞可保持細胞的原有分裂分化能力。溫度過高導(dǎo)致細胞死亡。這主要是由酶和蛋白質(zhì)所需要的zui適溫度決定的。多數(shù)生物大分子遇到高溫后容易導(dǎo)致空間結(jié)構(gòu)改變或者喪失

轉(zhuǎn)化細胞成功修復(fù)小鼠受損視神經(jīng)2017/08/17

在轉(zhuǎn)化細胞重建小鼠的視神經(jīng)之前，小鼠的癥狀類似于人類的青光眼，這是除白內(nèi)障之外的第二大致盲原因。該研究的作者、神經(jīng)生物學(xué)副教授安德魯.休伯曼（AndrewHuberman）指出，白內(nèi)障通?？梢酝ㄟ^手術(shù)移除，但青光眼則沒有有效的治療方法。該研究的主要作者為加州大學(xué)圣地亞哥分校的研究生Jung-HwanAlbertLim。青光眼由視神經(jīng)受壓過高引起，*有將近7千萬人深受此疾病之苦。外傷、視網(wǎng)膜脫落、垂體瘤、多種腦癌以及其它原因也會對視神經(jīng)造成損傷，導(dǎo)致視力下降。視網(wǎng)膜由一層薄薄的細胞構(gòu)成，不超過的一

分析人正常組織來源細胞有絲分裂的實驗辦法2017/08/15

人正常組織來源細胞是指歸于割裂期的細胞占總細胞數(shù)的百分率．用于表明細胞增殖旺盛的程度，也可用于檢查藥物對細胞增殖能力的影響。用蓋玻片培育法培育細胞，做固定和染色后，鏡下調(diào)查和計數(shù)1000個細胞中處于割裂期的細胞數(shù)并核算MI。(一)資料1．待檢資料(藥物)。2．細胞培育成層的貼壁細胞。3．試劑甲醇、3％吉姆薩染液。4．器材CO2培育箱、倒置顯微鏡、蓋玻片(2．2cm×2．2cm，需預(yù)先清潔和滅菌處理)、塑料培育皿(3．5cm)、載玻片、封片用蓋玻片、中性樹膠。(二)試驗辦法1．將細胞消化成單個細胞

免疫監(jiān)視干細胞如何特赦有益細菌2017/08/10

所謂的干細胞在維持這種重要平衡方面發(fā)揮關(guān)鍵作用。DC具有兩個*不同的生理作用：在感染的情況下，它們對于激活免疫應(yīng)答是必需的，但它們也參與促進免疫耐受，即它們能夠主動抑制免疫應(yīng)答。在這個意義上，DC細胞既是戰(zhàn)士，也是外交官。在后者，它們刺激所謂的誘導(dǎo)調(diào)節(jié)性T細胞（iTreg），其控制免疫耐受性的發(fā)展并抑制免疫系統(tǒng)的活化。為了觸發(fā)對腸微生物群的耐受性，腸上皮中的DC識別和內(nèi)化微生物蛋白質(zhì)并遷移到與腸相關(guān)的淋巴結(jié)。在途中，細菌蛋白質(zhì)被加工成小片段。然后將這些標簽顯示在DC的表面上，與被調(diào)節(jié)性T細胞識別

正確的復(fù)蘇轉(zhuǎn)化細胞方法2017/08/08

轉(zhuǎn)化細胞凍存好了，接下來要注意什么問題呢?沒錯，就是記得到時間了，拿出來復(fù)蘇。那么，細胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?請看下文：活力檢查–千萬不要使用不健康的細胞，可能有污染，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查–檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞：補充新的培養(yǎng)液–在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞，計數(shù)活細胞數(shù)，用凍存液調(diào)整細胞密度~5x106cells/ml(根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整)凍存液–用凍存液洗細胞并用凍存液

次利用熒光探針解析干細胞膜的奧秘2017/08/03

近日，來自日本、美國和印度的科學(xué)家們在干細胞中觀察到了細胞膜中的筏區(qū)域，即細胞膜中攜帶特殊分子群體的活性部位，相關(guān)研究刊登于雜志NatureChemicalBiology上。文章中研究人員NaokoKomura說道，對于俗稱為筏區(qū)域的特殊細胞膜結(jié)構(gòu)域的推測已經(jīng)超過25年了，但科學(xué)家們從來沒有在活細胞中真正觀察到該結(jié)構(gòu)，而本文中研究者就做出了重大的突破。文章中研究人員觀察了神經(jīng)節(jié)甘脂的行為，神經(jīng)節(jié)甘脂是一種特殊的脂質(zhì)分子，其在機體多種生物學(xué)過程中扮演著重要角色，包括脂質(zhì)筏區(qū)域的形成、毒素進入細胞以

人正常組織來源細胞的凍存步驟2017/08/01

人正常組織來源細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。下面我們就來介紹一下細胞凍存的步驟：1.選對數(shù)增生期細胞,在凍存前1d換液。2.按常規(guī)方法把培養(yǎng)細胞制備成懸液，計數(shù)，使細胞密度達5×107／ml左右密度，離心，去上清。3.加入配制好的凍存液，按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中，然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。凍存細胞時培養(yǎng)液中加入保護劑10％二甲基亞砜或甘油，可使冰點降低，使細胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細胞外。4.分裝于無菌凍存管中，每管加1.5m懸液。5.旋好凍存管并仔細檢查，一定要蓋緊，做

干細胞傳代吹打減少氣泡的方法2017/07/27

1.有一些干細胞可以不用消化液就能夠吹打下來。個人認為能不用消化液是的。譬如巨噬細胞。我一直維持巨噬細胞，每次傳代都不用消化液，吹打的時候我一般會用瓶內(nèi)未換的剩余舊培養(yǎng)液，這樣子比用新的培養(yǎng)基可以減少點泡沫的生成。當(dāng)然這個一定要求原培養(yǎng)基未被污染。2.吹打的時候我們都知道要一點挨著一點吹，這樣子不會漏掉地方。而我每次都會首先沿著兩條對角線的方向吹打，然后再按照橫著或者是豎著吹打。這樣子就可以比較容易把細胞吹下來，因為首先細胞的各個方向都受力了，而且比較均勻，細胞比較容易下來，而且對細胞形態(tài)的維護

脂肪干細胞的應(yīng)用情況2017/07/25

脂肪干細胞組織是人體內(nèi)含量十分豐富的組織。隨著肥胖癥患者的增多，人類脂肪開始“富余”，并漸成為累贅。人們一直以為，脂肪僅僅只有儲存熱量作用，過量儲存會導(dǎo)致脂肪肝、血管硬化。殊不知，脂肪還蘊藏有十分稀缺的干細胞資源。Zuk等人將脂肪抽吸術(shù)后的脂肪細胞(processedlipoaspiratecell，PLA)收集、消化后進行體外培養(yǎng)研究。經(jīng)過不同的細胞因子的誘導(dǎo)，PLA能夠向骨、軟骨、骨骼肌、脂肪、神經(jīng)等組織轉(zhuǎn)化。PLA經(jīng)轉(zhuǎn)化后細胞表面的CD標記物與骨髓干細胞的誘導(dǎo)分化標記物有所不同，如兩者CD

腫瘤細胞生物學(xué)特性的介紹2017/07/20

腫瘤細胞與體內(nèi)正常細胞相比，不論在體內(nèi)或在體外，在形態(tài)、生長增值、遺傳性狀等方面都有顯著的不同。生長在體內(nèi)的腫瘤細胞和在體外培養(yǎng)的腫瘤細胞，其差異較小，但也并非*相同。培養(yǎng)中的腫瘤細胞具以下突出特點：（一）形態(tài)和性狀培養(yǎng)中癌細胞無光學(xué)顯微鏡下特異形態(tài)，大多數(shù)腫瘤細胞鏡下觀察比二倍體細胞清晰，核膜、核仁輪廓明顯，核糖體顆粒豐富。電鏡觀察癌細胞表面的微絨毛多而細密，微絲走行不如正常細胞規(guī)則，可能與腫瘤細胞具有不定向運動和錨著不依賴性有關(guān)。（二）生長增殖腫瘤細胞在體內(nèi)具有不受控增殖性，在體外培養(yǎng)中仍如

人正常組織來源細胞的凍存與復(fù)蘇2017/07/18

人正常組織來源細胞為了防止因污染或技術(shù)原因使長期培養(yǎng)功虧一簣，考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異，有時因寄贈、交換和購買，培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉(zhuǎn)運到另一個實驗室，*的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要?，F(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(－70℃~－196℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是：在－70℃以下時，細胞內(nèi)的酶活性均己停止，即代謝處于*停止狀態(tài)，故可以長期保存。細胞低溫保存的關(guān)鍵，在于通過0~20℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi)，水晶呈針狀，極易招致細胞的嚴重損傷。

怎么預(yù)防干細胞老化2017/07/13

干細胞在培養(yǎng)過程中如果環(huán)境不適合其生長就會出現(xiàn)部分細胞的老化現(xiàn)象。這是干細胞培養(yǎng)的一個難點也是經(jīng)常出現(xiàn)的問題。本文描述干細胞老化時出現(xiàn)的跡象，以及其預(yù)防措施。干細胞老化的表現(xiàn)★細胞胞漿內(nèi)特別是在核區(qū)附近出現(xiàn)黑色顆粒，表示細胞開始出現(xiàn)老化；★細胞胞漿內(nèi)出現(xiàn)空泡，則表明該細胞已老化或者已經(jīng)開始分化（在全部細胞中出現(xiàn)少數(shù)老化細胞是正常的）；★細胞立體感逐漸消失，細胞間的間隔不清，部分細胞扁平狀，細胞的形狀趨向多樣；★貼壁性減退，出現(xiàn)一些漂浮的細胞；部分分泌強的細胞分泌物增多，細胞表面會比較臟；★細胞增