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2022
09-14

小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞MC38培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備
小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞MC38培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：1、準(zhǔn)備DMEM培養(yǎng)基(DMEM，GIBCO，貨號(hào)11965-092)，90%；胎牛血清，10%。2、培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞MC38細(xì)胞處理：1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基
2022
08-10

你知道人胚腎細(xì)胞293T是怎么培育出來的嗎？
人胚腎細(xì)胞293T的培養(yǎng)需要準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。也可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇懸浮培養(yǎng)基，使293T細(xì)胞懸浮生長(zhǎng)。1、培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。2、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。3、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培
2022
08-10

人宮頸癌癌細(xì)胞HELA培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備
人宮頸癌癌細(xì)胞HELA培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：1、準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號(hào)11095-080)，90%；北美胎牛血清(UnitedStates，GIBCO，貨號(hào)16000-044)，10%。2、培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。3、凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。人宮頸癌癌細(xì)胞HELA處理：1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好
2022
04-14

人臍靜脈細(xì)胞HUVEC是如何培育而來的？
人臍靜脈細(xì)胞HUVEC采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。人人臍靜脈細(xì)胞HUVEC分離自臍帶組織；它是臍靜脈的重要結(jié)構(gòu)組成細(xì)胞之一，在機(jī)體的正常生理過程中發(fā)揮著重要作用。臍帶是哺乳類的連接胎兒和胎盤的管狀結(jié)構(gòu)，臍帶中通過尿膜的血管即臍動(dòng)脈和臍靜脈，卵黃囊的血管即臍腸系膜動(dòng)脈及臍腸系膜靜
2022
01-12

大鼠心肌細(xì)胞H9C2的結(jié)構(gòu)特征我們可得好好了解了解
大鼠心肌細(xì)胞H9C2分離自心臟組織；心肌細(xì)胞(大鼠心肌細(xì)胞)的細(xì)胞核多位于細(xì)胞中部，形狀似橢圓或似長(zhǎng)方形，其長(zhǎng)軸與肌原纖維的方向一致。肌原纖維繞核而行，核的兩端富有肌漿，其中含有豐富的糖原顆粒和線粒體，以適應(yīng)心肌持續(xù)性節(jié)律收縮活動(dòng)的需要。從橫斷面來看，心肌細(xì)胞的直徑比骨骼肌小，前者約為15微米，而后者則為100微米左右。從縱斷面來看，心肌細(xì)胞的肌節(jié)長(zhǎng)度也比骨骼肌的肌節(jié)為短。在電子顯微鏡下觀察，也可看到大鼠心肌細(xì)胞H9C2的肌原纖維、橫小管、肌質(zhì)網(wǎng)、線粒體、糖原、脂肪等超微結(jié)構(gòu)。但是心肌細(xì)胞與骨骼
2021
12-15

說說大鼠心肌細(xì)胞H9C2的分類
大鼠心肌細(xì)胞H9C2從心臟組織中分離出來；心臟是脊椎動(dòng)物體內(nèi)最重要的器官。它的主要功能是為血液流動(dòng)提供壓力，使血液流向身體的各個(gè)部位。心臟由心肌組成，心肌由四個(gè)腔組成：左心房、左心室、右心房和右心室。左右心房和左右心室相隔一定的間隔，所以彼此不相連，心房和心室之間有瓣膜（房室瓣）。這些瓣膜使血液僅從心房流入心室，而不是回流。心臟的作用是促進(jìn)血液流動(dòng)，為器官組織提供充足的血流量，供應(yīng)氧氣和各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，帶走代謝的終產(chǎn)物（如二氧化碳、無機(jī)鹽、尿素、尿酸等），維持細(xì)胞的正常代謝和功能。心肌細(xì)胞呈菱形、
2021
10-13

人胚腎細(xì)胞293T培養(yǎng)步驟主要如下
人胚腎細(xì)胞293T是293細(xì)胞株插入SV40T-抗原的溫度敏感基因后產(chǎn)生的高轉(zhuǎn)染效率的衍生細(xì)胞株。人胚腎細(xì)胞；293，上皮狀，早期報(bào)道中指出該細(xì)胞基因組中含有腺病毒5（Ad5）基因組的左側(cè)端和右側(cè)端的DNA，但是明確了只存在其左側(cè)端的DNA。經(jīng)過對(duì)Ad5的插入點(diǎn)的克隆測(cè)序發(fā)現(xiàn)，Ad5的1～4344位線性核苷酸整合入細(xì)胞染色體19q13.2。該細(xì)胞為人類腺病毒載體擴(kuò)增的宿主?？杀磉_(dá)異常的玻連蛋白的細(xì)胞表面受體，由整合素β1亞單位和玻連蛋白受體α-v亞單位組成。生物安全級(jí)別為2級(jí)。人胚腎細(xì)胞293T
2021
09-18

人胚腎細(xì)胞293T要如何研究？
人胚腎細(xì)胞293T，上皮狀，早期報(bào)道中指出該細(xì)胞基因組中含有腺病毒5（Ad5）基因組的左側(cè)端和右側(cè)端的DNA，但是明確了只存在其左側(cè)端的DNA。經(jīng)過對(duì)Ad5的插入點(diǎn)的克隆測(cè)序發(fā)現(xiàn)，Ad5的1～4344位線性核苷酸整合入細(xì)胞染色體19q13.2。該細(xì)胞為人類腺病毒載體擴(kuò)增的宿主?？杀磉_(dá)異常的玻連蛋白的細(xì)胞表面受體，由整合素β1亞單位和玻連蛋白受體α-v亞單位組成。生物安全級(jí)別為2級(jí)。1、研究的對(duì)象是活細(xì)胞在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，
2021
04-29

什么是人皮膚成纖維HSF？
皮膚是指身體表面包裹肌肉的組織，它主要承擔(dān)保護(hù)身體，排汗，感覺冷，熱和壓力的功能，皮膚由表皮，真皮和皮下組織組成。人皮膚成纖維HSF是與中胚層分化的間充質(zhì)細(xì)胞，由于這些細(xì)胞非常易于培養(yǎng)，因此已廣泛用于細(xì)胞和分子生物學(xué)研究中。一般來說，成纖維細(xì)胞可以分泌細(xì)胞外基質(zhì)，例如I型和III型膠原，并且研究表明，不同器官中的成纖維細(xì)胞明顯不同。在傷口修復(fù)過程中，真皮成纖維細(xì)胞從增生性和遷移性表型轉(zhuǎn)變?yōu)槭湛s性，可重塑的基質(zhì)表型。同時(shí)，它們分泌大量的透明質(zhì)酸以應(yīng)對(duì)修復(fù)過程中的炎癥反應(yīng)。1）人皮膚成纖維HSF來源
2021
04-29

細(xì)胞又雙叒叕污染了，莫慌，幫您拯救珍貴細(xì)胞！
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，廣大科研工作者一直飽受微生物污染的困擾，幾乎所有科研單位的細(xì)胞房都曾經(jīng)遭受過細(xì)菌、真菌、支原體、黑膠蟲的污染，尤其是一些珍貴的細(xì)胞種子，一旦招惹上這幾個(gè)家伙，甚至面臨“絕種”的危險(xiǎn)。針對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)當(dāng)中面臨的普遍的問題，作為科研工作者的我們必須清楚認(rèn)識(shí)這些微生物，并通過技術(shù)手段判斷細(xì)胞遭受了哪種污染，準(zhǔn)確的對(duì)癥下藥，才能為我們的細(xì)胞保駕護(hù)航。1細(xì)菌污染1.1細(xì)菌污染的鑒別細(xì)菌污染是細(xì)胞培養(yǎng)當(dāng)中最常出現(xiàn)的污染類型，槍頭不小心碰到瓶壁、手不小心從培養(yǎng)瓶口處穿過、培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)瓶等等，不
2021
03-10

談?wù)勅吮砥び郎?xì)胞HACAT的研究進(jìn)展
人體皮膚具有重要的生理和保護(hù)功能，人表皮永生化細(xì)胞HACAT作為皮膚的附屬物，在確保皮膚正常功能方面起著重要作用。人表皮永生化細(xì)胞HACAT位于毛囊的側(cè)面，由多個(gè)裂片組成，腺體的周圍被基底膜覆蓋，基底膜上有未分化的扁平細(xì)胞。細(xì)胞繼續(xù)移動(dòng)到腺體的中心并成熟，細(xì)胞在內(nèi)部合成皮脂。通過整個(gè)血漿的分泌，皮脂通過皮脂腺導(dǎo)管流入毛囊，并可能被毛囊中的微生物分解，然后通過毛囊開口流出。它以無法解釋的機(jī)理在皮膚表面擴(kuò)散，形成酸性“皮脂膜”，以滋潤(rùn)皮膚和頭發(fā)，天然抗紫外線B，抑制微生物在皮膚表面過度繁殖等。皮脂腺
2021
02-10

拿到人肝星形細(xì)胞LX2后我們要怎么處理？
人肝星形細(xì)胞LX2由發(fā)表該細(xì)胞文章的*作者命名，這個(gè)細(xì)胞又叫LiemingXu-2，這是一個(gè)永生化的細(xì)胞。1）來源：女性，肝。2）形態(tài)：星狀細(xì)胞3）含量：1x1064）污染：支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)為陰性5）規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝人肝星形細(xì)胞LX2運(yùn)輸和保存，可選擇干冰運(yùn)輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細(xì)胞方式：（1）干冰運(yùn)輸，收到后立即轉(zhuǎn)入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復(fù)蘇；（2）存活細(xì)胞，收到后應(yīng)繼續(xù)生長(zhǎng)，傳代達(dá)到細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，再進(jìn)行凍存。具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。（3）收到細(xì)胞后請(qǐng)拍照
2021
01-18

常見的人肝癌細(xì)胞HEPG2細(xì)胞株都有哪幾種？
通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)細(xì)胞中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的細(xì)胞稱為細(xì)胞株。穩(wěn)定細(xì)胞株篩選一般是將外源DNA克隆到具有某種抗性或選擇基因的載體上，載體被轉(zhuǎn)染到宿主細(xì)胞并整合到染色體中，用載體中所含的選擇標(biāo)志進(jìn)行篩選，篩選得到可穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株。那么常見的人肝癌細(xì)胞HEPG2細(xì)胞株都有哪幾種？肝癌細(xì)胞系有很多種，比如人肝癌細(xì)胞HEPG2、Huh-7（人肝癌細(xì)胞），Hepa1cLc7（鼠肝癌細(xì)胞），Hepa1-6（小鼠肝癌細(xì)胞）等，轉(zhuǎn)染難易程度跟個(gè)人轉(zhuǎn)染手法以及細(xì)胞狀態(tài)、轉(zhuǎn)染試劑等有關(guān)。
2020
12-26

拿到人肝癌細(xì)胞HEPG2后要先這么處理
拿到人肝癌細(xì)胞HEPG2后要先這么處理。1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。2、人肝癌細(xì)胞HEPG2細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：（1）棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS
2020
12-10

一文了解人皮膚成纖維HSF的細(xì)胞形態(tài)
人皮膚成纖維HSF也稱為成纖維細(xì)胞，是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，它們是產(chǎn)生蛋白質(zhì)如膠原蛋白的終末分化細(xì)胞。成纖維細(xì)胞數(shù)量大，細(xì)胞體大，它們是多突起的紡錘形或星形扁平細(xì)胞。細(xì)胞核是規(guī)則的橢圓形，細(xì)胞輪廓不清楚，有突起，它的形態(tài)仍然可以根據(jù)細(xì)胞功能和附著物的物理性質(zhì)而改變。人皮膚成纖維HSF具有大的細(xì)胞體，弱嗜堿性的細(xì)胞質(zhì)，橢圓形的大核，染色質(zhì)疏松和核仁淺色。在電子顯微鏡下，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)豐富，游離核糖體發(fā)達(dá)，高爾基復(fù)合體發(fā)達(dá)，表明其具有合成和分泌蛋白質(zhì)的功能。成纖維細(xì)胞仍可以合成和分泌膠原纖維，彈
2020
10-20

人臍靜脈細(xì)胞HUVEC該如何分析檢測(cè)？
人臍靜脈細(xì)胞HUVEC是從臍靜脈分離的原代細(xì)胞，這些細(xì)胞是用于研究?jī)?nèi)皮細(xì)胞的模型系統(tǒng)。它們用于研究缺氧，炎癥，氧化應(yīng)激，感染，正常和與腫瘤相關(guān)的血管生成。細(xì)胞因子（例如TNF-α和IFN-γ）誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞激活（炎癥反應(yīng)）并導(dǎo)致細(xì)胞粘附分子（例如VCAM-1/CD106）的上調(diào)，可以通過熒光標(biāo)記的抗體和細(xì)胞成像進(jìn)行定量。人臍靜脈細(xì)胞HUVEC通常需要用熒光染料標(biāo)記，但是它對(duì)活細(xì)胞有毒，或者只能用于固定細(xì)胞。用于分析細(xì)胞計(jì)數(shù)和細(xì)胞融合的未標(biāo)記方法使研究人員能夠定量監(jiān)測(cè)細(xì)胞增殖和健康，而無需耗時(shí)的工作
2020
09-10

你真的了解人臍靜脈細(xì)胞HUVEC實(shí)驗(yàn)步驟嗎？
人臍靜脈細(xì)胞HUVEC是一種來源于臍帶組織的干細(xì)胞。它是臍靜脈的重要細(xì)胞之一，在理論上可以無限期地通過。因此，人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（HUVEC）經(jīng)常用于血管內(nèi)皮細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，而不是靜脈內(nèi)皮細(xì)胞或動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞。臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞易于獲得且來源充足，因此，臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)常用于血管內(nèi)皮研究。那么，您真的了解它的培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)步驟嗎？1、將15-20cm長(zhǎng)的新生兒臍帶儲(chǔ)存在無菌PBS溶液中。（注意：應(yīng)在4℃下保存24小時(shí)，在室溫下保存不超過6小時(shí)，否則將被丟棄。）2、將鈍針插入臍靜脈管，并用無菌PBS溶液沖洗3-5次，
2020
09-09

支原體清除服務(wù)
很多科研小伙伴在細(xì)胞培養(yǎng)的過程中，總是出現(xiàn)各種各樣的情況和問題，比如，細(xì)胞漏液、不貼壁、細(xì)胞有黑點(diǎn)、支原體污染、不增殖、細(xì)胞老化變形、復(fù)蘇存活率低等等，這些問題對(duì)于參與細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的小伙伴來說，是急需解決的大問題，好不容易買來的細(xì)胞，剛剛進(jìn)行培養(yǎng)傳代，就出現(xiàn)了以上的各種問題，這樣的情況通常都會(huì)令小伙伴們無比抓狂。因?yàn)橄胍_展后續(xù)實(shí)驗(yàn)，培養(yǎng)細(xì)胞往往是關(guān)鍵要事，細(xì)胞養(yǎng)不好，后續(xù)實(shí)驗(yàn)就無法進(jìn)行。如果排除了其他試劑選擇不當(dāng)、細(xì)胞株老化、復(fù)蘇存活率低等原因，而仍有上述一種或幾種情況，那么還有一種情況發(fā)生，那就
2020
07-14

人肝星形細(xì)胞LX2培養(yǎng)指南給你，你可要學(xué)好了
人肝星形細(xì)胞LX2也稱為liemingXu-2，是一個(gè)永生的細(xì)胞。細(xì)胞培養(yǎng)是細(xì)胞生物學(xué)乃至整個(gè)生命科學(xué)研究和生物工程中的一項(xiàng)基本實(shí)驗(yàn)技術(shù)。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)為疫苗的生產(chǎn)，開發(fā)以及腫瘤的預(yù)防和治療提供了一種新的方法。今天，我們總結(jié)了它的培養(yǎng)指南給你，你可要認(rèn)真學(xué)好了。體外培養(yǎng)的細(xì)胞可分為原代細(xì)胞和傳代細(xì)胞。原代細(xì)胞是指人體取出后立即培養(yǎng)的細(xì)胞。有人稱代細(xì)胞和十代內(nèi)的細(xì)胞為原代細(xì)胞培養(yǎng)，而在體外培養(yǎng)條件下適于連續(xù)繼代培養(yǎng)的細(xì)胞稱為代細(xì)胞。分散的細(xì)胞懸液在培養(yǎng)瓶中迅速粘附在瓶壁上，這稱為細(xì)胞粘附。一旦細(xì)胞附
2020
05-09

實(shí)驗(yàn)過程中遇到的不增殖細(xì)胞有哪些？
在生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中，常常會(huì)用到大量的細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，而往往通過各種渠道得來的細(xì)胞數(shù)量都有限，無法滿足實(shí)驗(yàn)過程中所需要的細(xì)胞數(shù)量，所以為了使實(shí)驗(yàn)更順利的進(jìn)行，科研人員往往需要前期對(duì)所需的細(xì)胞進(jìn)行擴(kuò)充培養(yǎng)，以便在后期的實(shí)驗(yàn)中，可以不間斷使用。通常的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中，很多科研人員都會(huì)根據(jù)實(shí)驗(yàn)方案選擇常見的細(xì)胞，包括無限傳代的細(xì)胞系和有限傳代的原代細(xì)胞，一般的細(xì)胞都具有分裂增殖的能力，可以進(jìn)行凍存、復(fù)蘇及傳代，因?yàn)檫@樣的難度系數(shù)低，實(shí)驗(yàn)會(huì)少出現(xiàn)波折，也有少量的實(shí)驗(yàn)研究會(huì)用到一些特殊的不增殖細(xì)胞。細(xì)胞系可無限傳代，

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