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上海臻科生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第8年
ELISA測(cè)定應(yīng)如何操作才正確2018/08/24
ELISA測(cè)定現(xiàn)在通常為采用手工操作的以微孔板條為固相的測(cè)定模式,測(cè)定操作非常簡(jiǎn)單,一般涉及到標(biāo)本的收集保存、試劑準(zhǔn)備、加樣、溫育、洗板、顯色、比色、結(jié)果判斷和結(jié)果報(bào)告及解釋等方面,其中任一步驟的不當(dāng)都會(huì)影響測(cè)定結(jié)果,且尤以加樣、溫育和洗板等步驟為甚。現(xiàn)分述如下。一、臨床標(biāo)本的收集和保存用于ELISA測(cè)定的臨床標(biāo)本zui為常用的是血清(漿),有時(shí)因?yàn)樘囟ǖ臋z測(cè)目的,也用到唾液、腦脊液、尿液、糞便等標(biāo)本。目前臨床上使用血清標(biāo)本測(cè)定的標(biāo)志物一般有傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤標(biāo)志物、激素、特種蛋白、
ELISA實(shí)驗(yàn)十八條通用規(guī)則2018/08/24
ELISA實(shí)驗(yàn)十八條通用規(guī)則1、要保證移液槍的準(zhǔn)確性,誤差不能超過(guò)2%。可用水和電子天平進(jìn)行確定。但zui好有專(zhuān)業(yè)人員進(jìn)行矯正。2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)。3、要在實(shí)驗(yàn)前1小時(shí)將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復(fù)到室溫,以使結(jié)果更穩(wěn)定。4、實(shí)驗(yàn)時(shí),要使底物避光保存。5、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。6、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。7、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí)
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中需要注意哪些細(xì)節(jié)2018/08/09
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中需要注意哪些細(xì)節(jié)1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)
臻科生物帶你了解ELISA的樣本收集與前期準(zhǔn)備2018/06/21
臻科生物帶你了解ELISA的樣本收集與前期準(zhǔn)備利用ELISA進(jìn)行臨床檢驗(yàn)常見(jiàn)的樣本一般包括血液(指血,靜脈血),尿,糞便,腦脊液,胸腹水,前列腺液,精液,陰道分泌物等,這些樣本收集的時(shí)間、方法和保存都有一定的要求。(一)臨床樣本的收集A、血液樣本有些生理因素,如吸煙、進(jìn)食、運(yùn)動(dòng)、情緒波動(dòng)、妊娠、體位等均可影響血液中某些成分的變化,有些甚至還有晝夜變化。因此血液標(biāo)本的采集應(yīng)盡量避免生理因素干擾,以條件一致為宜,如無(wú)法避免,應(yīng)在標(biāo)本上注明該因素。1.外周血一般選取左手無(wú)名指內(nèi)側(cè)采血,該部位應(yīng)無(wú)凍瘡,
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