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試劑盒提取DNA2019/07/16: 基因組DNA提取試劑盒簡(jiǎn)介DNA是遺傳信息的載體，是重要的生物信息分子，是分子生物學(xué)研究的主要對(duì)象，為了進(jìn)行測(cè)序、雜交、基因表達(dá)、文庫構(gòu)建等試驗(yàn)，獲得高分子量和高純度的基因組DNA是非常重要的前提，因此基因組DNA的提取也是分子生物學(xué)試驗(yàn)技術(shù)中重要、基本的操作之一。Solarbio公司提供各種不同樣品基因組DNA提取試劑盒，如植物、動(dòng)物、細(xì)菌、細(xì)胞、血液、酵母等基因組DNA提取試劑盒。所提取的基因組純度高，片段大小在50kb左右。用戶可根據(jù)需要選用不同的試劑盒來進(jìn)行不同樣品的抽提。一、基因組DN

細(xì)胞計(jì)數(shù)板使用方法2019/07/02: 實(shí)驗(yàn)原理：當(dāng)待測(cè)細(xì)胞懸液中細(xì)胞均勻分布時(shí)，通過測(cè)定一定體積懸液中的細(xì)胞的數(shù)目，即可換算出每毫升細(xì)胞懸液中細(xì)胞的細(xì)胞數(shù)目。具體操作：1.將計(jì)數(shù)板及蓋片擦拭干凈，并將蓋片蓋在計(jì)數(shù)板。2.將細(xì)胞懸液吸出少許，滴加在蓋片邊緣，使懸液充滿蓋片和計(jì)數(shù)板之間，靜置3min，注意蓋片下不要有氣泡，也不能讓懸液流入旁邊槽中。3.計(jì)算板四大格細(xì)胞總數(shù)，壓線細(xì)胞只計(jì)左側(cè)和上方的。然后按公式計(jì)算：細(xì)胞數(shù)/mL=四大格細(xì)胞總數(shù)/4×104說明：公式中除以4，因?yàn)橛?jì)數(shù)了4個(gè)大格的細(xì)胞數(shù)。公式中乘以104因?yàn)橛?jì)數(shù)板中每一個(gè)大

電泳常見問題及解決方法2019/07/02: 一、顆粒（1）現(xiàn)象在烘干后的電泳涂膜表面上有手感粗糙的、較硬的粒子，或肉眼可見的細(xì)小痱子，往往被涂物的水平面較垂直面嚴(yán)重，這種漆膜病態(tài)稱為顆粒。（2）產(chǎn)生原因①CED槽液PH值偏高，堿性物質(zhì)混入，造成槽液不穩(wěn)定，樹脂析出或凝聚。②槽內(nèi)有沉淀“死角”和裸露金屬處。③電泳后清洗液臟、含漆量過高，過濾不良。④進(jìn)入的被涂物面及吊具不潔，磷化后水洗不良。⑤在烘干過程中落上顆粒狀污物。⑥涂裝環(huán)境臟。⑦補(bǔ)給涂料或樹脂溶解不良，有顆粒。（3）防治方法①將CED槽液的PH值控制在下限，嚴(yán)禁帶入堿性物質(zhì)，加強(qiáng)過濾，

超純水、去離子水、RO水、蒸餾水、雙蒸水的區(qū)別2019/07/02: 1.超純水：Ultrapure水（超純水），既將水中的導(dǎo)電介質(zhì)幾乎*去除，又將水中不離解的膠體物質(zhì)、氣體及有機(jī)物均去除至很低程度的水。電阻率大于18MΩ*cm，或接近18.3MΩ*cm極限值。通常實(shí)驗(yàn)室中常用NANOpure或Milli-Q制備，制水源一般為去離子水或者RO水；2.去離子水：把水里的陰陽離子都除掉的水。主要通過RO膜和混床樹脂來把水中的離子除掉，常用制水儀有MilliporeElix，但仍然存在可溶性的有機(jī)物，比如熱源，所以去離子水一般不能用作注射用水；3.RO水：也稱純水。即通

PCR實(shí)驗(yàn)常見失敗原因、對(duì)策分析及體系優(yōu)化2019/07/01: PCR雖然為一個(gè)簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)，但在實(shí)際過程中可能會(huì)出現(xiàn)各種問題。產(chǎn)生問題的原因可能來源于以下幾個(gè)方面：實(shí)驗(yàn)操作，試劑質(zhì)量，PCR反應(yīng)過程中各種試劑的含量，以及反應(yīng)條件，溫度設(shè)置等，本文對(duì)各個(gè)方面進(jìn)行了討論，大家遇到問題后可以對(duì)號(hào)入座的查一下。當(dāng)然，具體問題的解決還依靠實(shí)驗(yàn)者就可能的原因逐項(xiàng)排除，并不斷的摸索才能*解決。假陰性，不出現(xiàn)擴(kuò)增條帶PCR反應(yīng)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)有①模板核酸的制備，②引物的質(zhì)量與特異性，③酶的質(zhì)量及，④PCR循環(huán)條件。尋找原因亦應(yīng)針對(duì)上述環(huán)節(jié)進(jìn)行分析研究。模板：①模板中含有雜蛋白質(zhì)，

PCR儀如何選型？2019/07/01: 購買一臺(tái)新的PCR儀，這真是件幸福的事，畢竟以后大家就不用苦苦排隊(duì)了。然而，這也不是個(gè)輕松的差事，市場(chǎng)上有那么多種儀器可以選擇，光是比較參數(shù)，就夠累了。況且PCR儀還是實(shí)驗(yàn)室中的老黃牛，幾乎24小時(shí)運(yùn)轉(zhuǎn)，買臺(tái)可靠的儀器尤為重要。一想到這兒，是不是更感覺壓力山大。在簽下訂單前，也許你該考慮以下五個(gè)方面。終點(diǎn)、定量還是數(shù)字？如今的PCR儀器主要分為三大類：標(biāo)準(zhǔn)PCR（終點(diǎn)PCR）、實(shí)時(shí)定量PCR（qPCR）以及數(shù)字PCR（dPCR）。前兩者大家都很熟悉，而后者是這兩年冉冉升起的新星。標(biāo)準(zhǔn)PCR儀主要

光學(xué)顯微鏡的工作原理2019/06/20: 顯微鏡是一種精密的光學(xué)儀器，已有300多年的發(fā)展史。自從有了顯微鏡，人們看到了過去看不到的許多微小生物和構(gòu)成生物的基本單元——細(xì)胞。目前，不僅有能放大千余倍的光學(xué)顯微鏡，而且有放大幾十萬倍的電子顯微鏡，使我們對(duì)生物體的生命活動(dòng)規(guī)律有了更進(jìn)一步的認(rèn)識(shí)。在普通中學(xué)生物教學(xué)大綱中規(guī)定的實(shí)驗(yàn)中，大部分要通過顯微鏡來完成，因此，顯微鏡性能的好壞是做好觀察實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵。一、顯微鏡的光學(xué)系統(tǒng)顯微鏡的光學(xué)系統(tǒng)主要包括物鏡、目鏡、反光鏡和聚光器四個(gè)部件。廣義的說也包括照明光源、濾光器、蓋玻片和載玻片等。（一）、物鏡

生物安全柜等級(jí)的劃分2019/06/20: 生物安全柜是為操作原代培養(yǎng)物、菌毒株以及診斷性標(biāo)本等具有感染性的實(shí)驗(yàn)材料時(shí)，用來保護(hù)操作者本人、實(shí)驗(yàn)室環(huán)境以及實(shí)驗(yàn)材料，使其避免暴露于上述操作過程中可能產(chǎn)生的感染性氣溶膠和濺出物而設(shè)計(jì)的。根據(jù)生物安全防護(hù)水平的差異，生物安全柜可分為一級(jí)、二級(jí)和三級(jí)三種類型。一級(jí)生物安全柜可保護(hù)工作人員和環(huán)境而不保護(hù)樣品。其氣流原理和實(shí)驗(yàn)室通風(fēng)櫥基本相同，不同之處在于排氣口安裝有HEPA過濾器，將外排氣流過濾進(jìn)而防止微生物氣溶膠擴(kuò)散造成污染。一級(jí)生物安全柜本身無風(fēng)機(jī)，依賴外接通風(fēng)管中的風(fēng)機(jī)帶動(dòng)氣流，由于不能保護(hù)柜

移液管的正確使用方法2019/06/20: 1．使用前：使用移液管，首先要看一下移液管標(biāo)記、準(zhǔn)確度等級(jí)、刻度標(biāo)線位置等。應(yīng)檢查其管口和尖嘴無破損，否則不能使用。2．潤洗：使用時(shí)，應(yīng)先將移液管用純水洗凈，自然瀝干，并用待量取的溶液少許潤洗3次，用右手的拇指和中指捏住移液管的上端，將管的下口插入待吸取的溶液中，左手將吸耳球捏扁后，接在管口上將溶液慢慢吸入，待溶液上升至移液管1/3高度時(shí)取出，橫持，并轉(zhuǎn)動(dòng)移液管，使溶液均勻布滿整個(gè)管子內(nèi)壁，以置換內(nèi)壁水分，避免管內(nèi)殘存水分稀釋要移去的溶液產(chǎn)生不必要的誤差。通常置換2-3次，每次置換結(jié)束，都要將溶

Bio-rad化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)操作規(guī)程2019/04/18: 一．目的為規(guī)范Bio-rad化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)的基本操作、維護(hù)保養(yǎng)、異常處理程序，防止人為操作失誤，確保Bio-rad化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)正常運(yùn)轉(zhuǎn)，特制定本程序。二．適用范圍本程序適用于Bio-rad化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)操作。三．責(zé)任1.本程序的實(shí)施者為Bio-rad化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)操作者，各實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人對(duì)本程序的實(shí)施情況進(jìn)行監(jiān)督。2.日常運(yùn)行及維護(hù)、定期維護(hù)、定期點(diǎn)檢及保養(yǎng)由Bio-rad化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)操作者負(fù)責(zé)。四．內(nèi)容1.打開成像儀器電源，將樣品放入工作臺(tái)。2.雙擊桌面上圖標(biāo)，打開Quantity

PCR儀操作指南2019/03/31: 一、開機(jī)連接電源線后，打開機(jī)器后部的主開關(guān)（在機(jī)器的左下角）。開機(jī)后機(jī)器進(jìn)行自檢“SelfTest”，自檢結(jié)束后出現(xiàn)用戶主界面，顯示加熱模塊“Block”格式和溫度“Temp”和熱蓋溫度“Lid”，在屏幕左上角顯示“Ready”。二、程序設(shè)置1.建立新程序按“File”→“New”→“Program”，進(jìn)入一個(gè)編輯窗口輸入程序名稱按“Enter”鍵確認(rèn)，之后進(jìn)入程序編輯器；在“Header”中設(shè)置熱蓋的參數(shù)，輸入溫度和壓力，溫度默認(rèn)值為96℃，一般設(shè)置為99℃，如變性溫度較低時(shí)默認(rèn)值也可以滿足使

離心機(jī)在諸多領(lǐng)域中的應(yīng)用2019/03/31: 早在19世紀(jì)離心機(jī)就在工業(yè)生產(chǎn)中取得了應(yīng)用。起先，離心機(jī)應(yīng)用于牛奶分離、紡織品脫水和制糖廠結(jié)晶砂糖的脫水。目前，離心機(jī)已廣泛應(yīng)用于化工、石油、冶金和水處理等眾多領(lǐng)域。離心機(jī)的傳動(dòng)方式經(jīng)歷了從手搖式到電動(dòng)式、機(jī)械變速、油壓氣壓為動(dòng)力的機(jī)械變速直至當(dāng)今的變頻電機(jī)變速的過程。耐磨技術(shù)的不斷取得突破，如硬質(zhì)合金、陶瓷的廣泛應(yīng)用，也推動(dòng)著離心機(jī)的應(yīng)用領(lǐng)域快速拓展。3.1在聚合樹脂領(lǐng)域在處理聚氯乙烯（PVC）過程中，離心機(jī)的處理能力大可達(dá)到15～18t/h（以干粉計(jì)），分離后的清液中固體含量≤100×10-

GSP認(rèn)證的新要求2019/03/31: （一）批發(fā)企業(yè)一、管理職責(zé)：1、質(zhì)量管理領(lǐng)導(dǎo)小組由企業(yè)自定設(shè)立，不作強(qiáng)制性要求。2、質(zhì)量管理小組因負(fù)責(zé)企業(yè)日常質(zhì)量管理工作，新GSP中還要求負(fù)責(zé)錄入質(zhì)量管理基礎(chǔ)數(shù)據(jù)，故需設(shè)立。3、質(zhì)量驗(yàn)收組是企業(yè)物流管理環(huán)節(jié)之一，需設(shè)立。4、藥品養(yǎng)護(hù)組（員）職能有變化，主要是對(duì)儲(chǔ)存條件、儲(chǔ)存環(huán)境進(jìn)行監(jiān)測(cè)并管理。5、質(zhì)量管理文件：對(duì)操作程序提出了更高的要求，杜絕天下文章一大抄現(xiàn)象，要求結(jié)合計(jì)算機(jī)軟件編寫，能讓一個(gè)不熟悉的人員按操作程序也能完成相應(yīng)的工作（或操作）。二、人員與培訓(xùn)1、增加計(jì)算機(jī)信息管理員崗位，負(fù)責(zé)企

血漿與血清的區(qū)別2019/03/31: 血清血液凝固析出的淡黃色透明液體。如將血液自血管內(nèi)抽出，放入試管中，不加抗凝劑，則凝血反應(yīng)被激活，血液迅速凝固，形成膠凍。凝血收縮，其周圍所析出之淡黃色透明液體即為血清，也可于凝血后經(jīng)離心取得。在凝血過程中，纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成纖維蛋白塊，所以血清中無纖維蛋白原，這一點(diǎn)是與血漿大的區(qū)別。而在凝血反應(yīng)中，血小板釋放出許多物質(zhì)，各凝血因子也都發(fā)生了變化。這些成分都留在血清中并繼續(xù)發(fā)生變化，如凝血酶原變成凝血酶，并隨血清存放時(shí)間逐漸減少以至消失。這些也都是與血漿區(qū)別之處。但大量未參加凝血反應(yīng)的物質(zhì)則與血漿

牛血清在細(xì)胞培養(yǎng)中的作用與質(zhì)量要求2019/03/31: 生物技術(shù)已經(jīng)被世界各國視為一種高技術(shù)，在整個(gè)科學(xué)技術(shù)中占據(jù)了特殊的顯著地位，特別是生命科學(xué)的發(fā)展更離不生物技術(shù)，生命科學(xué)的發(fā)展備受各國的重視。我國在很多大學(xué)中都設(shè)立了生命科學(xué)院?，F(xiàn)代生物技術(shù)一般認(rèn)為包括基因工程技術(shù)、細(xì)胞工程技術(shù)、酶工程技術(shù)和發(fā)酵工程技術(shù)，而這些技術(shù)的發(fā)展幾乎都與細(xì)胞培養(yǎng)有密切關(guān)系，特別是在醫(yī)藥領(lǐng)域的發(fā)展，細(xì)胞培養(yǎng)更具有特殊的作用和價(jià)值。比如基因工程藥物或疫苗在研究生產(chǎn)過程中很多是通過細(xì)胞培養(yǎng)來實(shí)現(xiàn)的?；蚬こ桃腋我呙绾芏嗍且訡HO細(xì)胞作為載體；細(xì)胞工程中更是離不細(xì)胞培養(yǎng)，雜交瘤

流式細(xì)胞儀2019/03/26: 細(xì)胞凋亡的檢測(cè)方法眾多，流式細(xì)胞儀檢測(cè)凋亡，是常用的方法。由于流式細(xì)胞儀固有的特點(diǎn)――可以準(zhǔn)確的進(jìn)行凋亡細(xì)胞的計(jì)數(shù)。因此，具有其它方法*的*性。本文主要結(jié)合我室的一些實(shí)際經(jīng)驗(yàn)，力圖簡(jiǎn)單明了的介紹流式在檢測(cè)凋亡方面的應(yīng)用。下面是一幅凋亡過程圖。在凋亡誘導(dǎo)劑的作用下，首先是細(xì)胞色素C和apaf－1形成復(fù)合體，線粒體的功能發(fā)生衰退；后是caspase家族激活，磷脂酰絲氨酸外翻，這時(shí)細(xì)胞的形態(tài)已經(jīng)發(fā)生了改變，可以看到細(xì)胞變小，胞核皺縮；后是細(xì)胞內(nèi)DNA斷裂，形成凋亡小體。在凋亡發(fā)生的各個(gè)過程當(dāng)中，都有相

PCR實(shí)驗(yàn)步驟2019/03/26: 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PolymeraseChainReaction，PCR）是體外酶促合成特異DNA，片段的一種方法，為常用的分子生物學(xué)技術(shù)之一。典型的PCR由（1）高溫變性模板；（2）引物與模板退火；（3）引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個(gè)循環(huán)，通過多次循環(huán)反應(yīng)，使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。其主要步驟是：將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下（通常為93℃-94℃）使其變性解成單鏈；人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合，兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位

熒光顯微鏡的幾種熒光光源2019/03/26: 熒光顯微鏡是細(xì)胞生物學(xué)的基本工具。它是由光源、濾色片和光學(xué)系統(tǒng)等主要部件組成。是利用一定波長的光激發(fā)標(biāo)本發(fā)射熒光，通過物鏡和目鏡系統(tǒng)放大觀察標(biāo)本的熒光圖像而實(shí)現(xiàn)對(duì)熒光樣品的定性定量研究。激發(fā)、濾光、成像、淬滅，熒光實(shí)驗(yàn)的調(diào)整就是怎么才能協(xié)調(diào)好以上因素得到理想的效果，一個(gè)常被忽視的方面是光源的使用，熒光顯微鏡的常用光源都是白光光源：高壓汞燈和氙燈，現(xiàn)在還新出了金屬鹵素?zé)艉蚅ED。1、汞燈超高壓汞燈（50-200W），它是用石英玻璃制作，中間呈球形，內(nèi)充一定數(shù)量的汞，工作時(shí)由兩個(gè)電極間放電，引起水銀

顯微鏡的使用方法2019/03/26: 顯微鏡的使用方法：1.安放：把顯微鏡放在自己前面略偏左的桌面上，這樣便于用左眼觀察物像，用右眼看著畫圖。安放時(shí)鏡筒向前，鏡臂向后。2.對(duì)光：轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器，使低倍物鏡正對(duì)通光孔，并使物鏡前端與載物臺(tái)有兩厘米左右的距離。然后把反光鏡對(duì)著光源，但是反光鏡不能直接對(duì)著太陽。只要視野的光亮程度合適，光就對(duì)好了。3.觀察：對(duì)好光后，把顯微鏡玻片標(biāo)本放在載物臺(tái)上，并使玻片上的標(biāo)本對(duì)著通光孔的中心，再用壓片夾夾住。然后慢慢地轉(zhuǎn)動(dòng)調(diào)焦螺旋，直到接近玻片為止。接著，用左眼向目鏡內(nèi)注視，同時(shí)反方向轉(zhuǎn)動(dòng)調(diào)焦螺旋，直到看清

電子天平的選擇和使用2019/03/26: 隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，電子衡器越來越趨于自動(dòng)化和智能化。由于許多用戶沒有恰當(dāng)選擇和使用電子天平，使得電子天平與實(shí)際要求不符合，影響正常檢測(cè)工作，并造成浪費(fèi)。本人結(jié)合電子天平的技術(shù)特點(diǎn)，對(duì)電子天平的選擇和使用作一分析。一．電子天平的選擇。用戶根據(jù)自己稱量的準(zhǔn)確度和量程要求，選擇合適的分度值、量程、準(zhǔn)確度級(jí)別的電子天平。1．準(zhǔn)確度要求選擇電子天平，首先應(yīng)從相應(yīng)天平的分度值是否符合稱量的準(zhǔn)確度要求考慮。在選擇電子天平的分度值時(shí)，應(yīng)參考廠家給出的檢定分度值e，而不是實(shí)際分度值d。目前國家計(jì)量檢定規(guī)程規(guī)定，

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