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這個(gè)基因突變會讓你很困,但是睡不著!2019/05/05
這個(gè)基因突變會讓你很困,但是睡不著!多達(dá)80%的自閉癥譜系障礙(ASD)兒童有睡眠問題。這些問題的根源與自閉癥的確切原因一樣是一個(gè)謎,科學(xué)家們?nèi)栽谂忾_這一謎。華盛頓州立大學(xué)(WSU)的神經(jīng)科學(xué)家團(tuán)隊(duì)領(lǐng)導(dǎo)的一項(xiàng)新研究使科學(xué)家們更接近于找出自閉癥患者睡眠障礙的原因,這可能為未來治療打開大門,為自閉癥兒童及其護(hù)理者帶來解脫?!八卟缓貌粌H是自閉癥患者的問題,也是護(hù)理者關(guān)心的問題之一,”WSU醫(yī)學(xué)院助理教授、該研究的主要研究者和通訊作者LuciaPeixoto說?!按送?,睡眠問題與核心自閉癥癥狀(如
從難處理和臟的樣品中回收RNA和DNA用于微生物組研究2019/05/05
從難處理和臟的樣品中回收RNA和DNA用于微生物組研究新型AppliedBiosystems™MagMAX™微生物組Ultra核酸分離試劑盒,可以從多種類型的樣品(包括糞便和土壤)中快速、、高通量地進(jìn)行核酸純化。該試劑盒采用AppliedBiosystems™MagMAX™磁珠技術(shù),有助于確保高質(zhì)量核酸的可再現(xiàn)回收,以便使用廣泛的技術(shù)(包括微陣列、實(shí)時(shí)PCR和下一代測序)進(jìn)行進(jìn)一步分析。MagMAX微生物組Ultra核酸分離試劑盒的特點(diǎn)?可通過ThermoScientific™KingFishe
免疫組化原理解析2019/04/28
1、免疫組化和HE染色的對比免疫組化染色和HE染色的不同之處可能是HE染色比較粗略地辨認(rèn)不同細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變;而后者能夠針對特異性細(xì)胞標(biāo)志物來檢測特異性細(xì)胞的改變(數(shù)量)、也可檢測細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子的轉(zhuǎn)位,組織中一些特異性蛋白的表達(dá)的量改變(通過圖像分析系統(tǒng)分析顏色深淺、分布的面積等綜合分析)。通俗的講,HE僅僅是看大體病理改變,比如組織壞死,比如炎性滲出。免疫組化,看你的目的蛋白的表達(dá)情況。2、免疫組化DAB顯色DAB和HE一樣也是一種染色劑,HE染色相對簡單,能分辨出細(xì)胞中的嗜酸嗜堿性物質(zhì);DAB
慢病毒包裝原理、流程和檢測方法。2019/04/25
一、病毒載體系統(tǒng)病毒載體介導(dǎo)基因技術(shù),一種的基因轉(zhuǎn)移工具,將外源基因包裝到天然病毒的外殼中,利用病毒對宿主細(xì)胞的感染性,將外源基因?qū)胩囟?xì)胞中,廣泛應(yīng)用于基因診斷和基因治療。二、慢病毒包裝簡介病毒有很多種,常見的有慢病毒和腺病毒。慢病毒(Lentivirus)載體是以人類免疫缺陷丨型病毒(HIV-1)為基礎(chǔ)發(fā)展起來的基因載體。慢病毒是一種逆轉(zhuǎn)錄病毒,能使外源基因整合入宿主的基因組穩(wěn)定、長期表達(dá),比一般的逆轉(zhuǎn)錄病毒具有更高的滴度和更廣的宿主范圍。攜帶外源基因的慢病毒載體與包裝載體(產(chǎn)生病毒顆粒所
免疫組化原理、流程及結(jié)果分析。2019/04/23
免疫組化原理免疫組化染色是用一抗與被檢測組織中目的蛋白抗原結(jié)合,然后用HRP等標(biāo)記的二抗與一抗進(jìn)行結(jié)合,后通過與DAB顯色劑反應(yīng),進(jìn)而確認(rèn)所要檢測蛋白抗原的定位、半定量等目的。?免疫組化更多的意義在于查看目的蛋白的定位。定量一般用western來實(shí)現(xiàn)。免疫組化染色和HE染色的不同之處可能是HE染色比較粗略地辨認(rèn)不同細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變;而后者能夠針對特異性細(xì)胞標(biāo)志物來檢測特異性細(xì)胞的改變(數(shù)量)、也可檢測細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子的轉(zhuǎn)位,組織中一些特異性蛋白的表達(dá)的量改變(通過圖像分析系統(tǒng)分析顏色深淺、分布的面積
相對定量數(shù)據(jù)分析方法2019/04/19
相對定量原理在某些不需要對基因進(jìn)行絕付定量,只需要確定基因相對表達(dá)差異的情況下,如某基因在經(jīng)過某種處理后表達(dá)量是增加了還是減少了,用相對定量的方法就可以得到結(jié)果。相對定量是一種更普遍、更簡單的方法。機(jī)體的細(xì)胞中,一些基因的表達(dá)量是恒定的,這些基因可以被用作內(nèi)部參照(簡稱內(nèi)參)基因。相對定量就是通過檢測目的基因相對于內(nèi)參基因的表達(dá)變化來實(shí)現(xiàn)定量的。正確選擇內(nèi)參可以平均起始樣本質(zhì)和量的誤差,以及反應(yīng)效率的誤差。內(nèi)參需滿足:①在研究中樣本之間的表達(dá)是相似的;②處理因素不會影響其表達(dá);③與待測基因同時(shí)進(jìn)
熒光定量PCR原理解析2019/04/19
熒光定量PCR原理解析無論是對遺傳?。ㄈ绲刂泻X氀脱巡。?、傳染?。ㄈ绺窝缀桶滩。┗蚰[瘤進(jìn)行基因診斷,還是研究藥物對基因表達(dá)水平的影響,或者監(jiān)控藥物和療法的治療效果,定量PCR技術(shù)都可以發(fā)揮很大作用。定量PCR技術(shù)的zuixin進(jìn)展是實(shí)時(shí)熒光定量。該技術(shù)借助于熒光信號來檢測PCR產(chǎn)物,一方面提高了靈敏度,另一方面還可以做到PCR每循環(huán)一次就收集一個(gè)數(shù)據(jù),建立實(shí)時(shí)擴(kuò)增曲線,準(zhǔn)確地確定CT值,從而根據(jù)CT值確定起始DNA拷貝數(shù),做到了真正意義上的DNA定量。這是DNA定量技術(shù)的一次飛躍。根據(jù)終得
做好 Western Blot,這幾個(gè)操作技巧很關(guān)鍵。2019/04/12
WesternBlot操作步驟多,每一步的失誤都會造成全盤失敗,從試劑與設(shè)備的選擇到實(shí)驗(yàn)條件的摸索,都很關(guān)鍵。如果初學(xué)者想要做好WesternBlot,記住以下的操作技巧,或許能夠事半功倍。一、蛋白質(zhì)的樣品制備:蛋白質(zhì)在樣品處理過程應(yīng)在低溫下進(jìn)行,以避免細(xì)胞破碎釋放出的各種酶類的修飾(加入合適的蛋白酶抑制劑)。樣品建議分裝成合適的量(比如分裝出20μL檢測蛋白質(zhì)定量用),然后-20°或-80℃中長期保存,注意不要反復(fù)凍融,因?yàn)闀沟鞍椎目乖匦园l(fā)生改變。切莫使用不新鮮的上樣緩沖液,同時(shí)在處理時(shí)應(yīng)
免疫組化非特異性染色的八大原因2019/04/12
免疫組化非特異性染色的八大原因免疫組織化學(xué)技術(shù)(immunohistochemistry),是一項(xiàng)利用抗原抗體反應(yīng),通過使標(biāo)記抗體的顯色劑顯色來確定組織細(xì)胞內(nèi)抗原,對蛋白定位,定性的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。然而,結(jié)果卻未必都是那么如意的,常常出現(xiàn)下面這種狀況,好好的一張片子染得臟臟的,這就是常見的非特異性染色。1.抗體問題一抗用多克隆抗體容易出現(xiàn)非特異性染色,建議用高純度,價(jià)的針對更具特異性抗原決定簇的單克隆抗體來解決。單克隆抗體很貴,不過結(jié)果真的很好。尤其是背景非特異性染色不會太深。真是一分價(jià)錢一分貨。一抗
CRISPR cas9 基因編輯技術(shù)2019/04/12
CRISPRcas9基因編輯技術(shù)CRISPR基因編輯技術(shù)能利用分子剪刀Cas9酶來切割我們想要去切割的DNA,隨后我們就能夠粘貼DNA來替代我們想要移除的DNA信息,Cas9能通過一種特殊的“向?qū)А眮碜R別人類基因組中的特殊DNA片段。Cas9能在機(jī)體中存在數(shù)小時(shí)乃至數(shù)周,其在體內(nèi)能夠剪切并且粘貼其它的DNA片段或者DNA目標(biāo)片段。目前解決這個(gè)問題有以下幾種選擇,其中一個(gè)選擇就是從機(jī)體中分離出研究人員想要編輯的細(xì)胞,然后重新注入研究人員進(jìn)行正確編輯過的細(xì)胞。比如,研究人員就能從體內(nèi)分離出對殺死癌細(xì)
熒光原位雜交技術(shù)fish檢測技術(shù)及應(yīng)用2019/04/12
熒光原位雜交技術(shù)fish檢測的詳細(xì)介紹:熒光原位雜交(FISH)技術(shù)檢測組織中的DNA或RNA序列,那他能不能檢測microRNAs呢?提到miRNAs,我們首先想到的是他們非常小,確實(shí)它們是很短的單鏈RNA分子,只有18-23個(gè)核苷酸。由于他們很小,所以對FISH技術(shù)的可行性有很多擔(dān)憂,比如探針能否具有足夠的敏感性和特異性,什么樣的探測系統(tǒng)適合于來自這些短的目標(biāo)序列的信號等等。miRNAs在FFPE組織中的完整性很有趣的是,研究表明相比于mRNAs,miRNAs在福爾馬林固定的石蠟包埋組織(F
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