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細(xì)胞凍存與復(fù)蘇2023/02/14
一、如何處理收到的細(xì)胞1.新買的或惠贈的細(xì)胞如何處理?不管買的細(xì)胞、惠贈的細(xì)胞,剛拿到手應(yīng)趕緊做這幾件事:檢測瓶子是否破裂;培養(yǎng)基是否漏出,是否渾濁;是否有支原體污染;迅速擴(kuò)增凍存。2.能否使用與原先培養(yǎng)條件不同的培養(yǎng)基?不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)的細(xì)胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供培養(yǎng)條件不同的培養(yǎng)基,細(xì)胞大都無法立即適應(yīng),造成細(xì)胞無法存活。3.購買的細(xì)胞死亡或存活率不佳可能原因?常見原因可能有:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳;血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳;解凍過程錯(cuò)誤;冷凍細(xì)胞解凍
培養(yǎng)基配制與儲存2023/02/14
實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備:血清準(zhǔn)備:配置培養(yǎng)基前一天,將所需血清從-20℃冰庫取出,放置入2-8℃冰箱緩慢解凍儲存,使用前37℃水浴加熱。培養(yǎng)基準(zhǔn)備:液體基礎(chǔ)培養(yǎng)基使用前37℃水浴加熱。實(shí)驗(yàn)流程:基礎(chǔ)培養(yǎng)基配置(干粉):根據(jù)配置體積,選擇合適的滅菌后容器,在容器中倒入約90%體積的超純水,將培養(yǎng)基干粉全部倒入該容器中,用少量超純水將袋內(nèi)殘留粉末洗出。攪拌30min使所有成分溶解,待溶液澄清后,根據(jù)說明書加入適當(dāng)量的碳酸氫鈉(分析純),繼續(xù)攪拌5-10min至溶解,隨后超純水定容并調(diào)節(jié)PH值。(過濾會使培養(yǎng)基PH
做ELISA實(shí)驗(yàn),這些技巧少不了!2023/02/08
介紹:ELISA試劑盒在國內(nèi)有許多種叫法,例如:ELISA檢測試劑盒、ELISAKit、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等,比較常見的叫法是ELISA檢測試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒等。Elisa生物試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。特點(diǎn):1.高效、靈敏、特異的抗體。2.穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性。3.吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體。4.適
ELISA試劑盒的應(yīng)用和類型2023/02/08
ELISA試劑盒的應(yīng)用ELISA都有哪些類型?一、ELISA是什么?ELISA是酶聯(lián)免疫吸附測定法(Enzyme-LinkedImmunoSorbentAssay,ELISA)的簡稱。它是在免疫酶技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種新型的免疫測定技術(shù)。ELISA是一種廣泛應(yīng)用在測定液體樣本中的蛋白、抗體、或激素的免疫分析技術(shù)。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)程序,通常是把蛋白、抗體、或激素等(即抗原)直接或是以捕捉抗體(captureAb)固定在固相載體上,再加入一級檢測抗體(primarydetectionAb)
酶聯(lián)免疫吸附劑測定2023/02/07
定義:酶聯(lián)免疫吸附測定(簡寫ELISA)指將可溶性的抗原或抗體結(jié)合到聚苯乙烯等固相載體上,利用抗原抗體特異性結(jié)合進(jìn)行免疫反應(yīng)的定性和定量檢測方法。常用的ELISA可以分為五大類:直接ELISA、間接ELISA、夾心ELISA、競爭ELISA、競爭抑制ELISA。其他的ELISA都由這五類組合衍生。所有的ELISA基本由基礎(chǔ)的幾個(gè)步驟組合而成:將抗原或抗體吸附到固相載體上;加入待檢樣品以及后續(xù)試劑;溫育;洗滌去掉游離未結(jié)合的反應(yīng)物;加入酶檢測底物;結(jié)果的判讀分類:1.直接ELISA將抗原按一定的比
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