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查看更多+“雙面”微生物（上）：微生物檢測技術(shù)盤點(diǎn)
2018年08月21日 15:36:19
來源：中國化工儀器網(wǎng) 點(diǎn)擊量：8148
微生物指的是以細(xì)菌、病菌、真菌和少數(shù)藻類等為代表的、一切肉眼難以觀察到的微小生物的總稱。按照其存生存環(huán)境的不同又可以分為空間微生物和海洋微生物等。雖然同為地球上生生不息的生命體，人類與微生物的關(guān)系卻并不融洽，可謂是典型的“相愛相殺”。
【中國化工儀器網(wǎng) 本網(wǎng)視點(diǎn)】微生物指的是以細(xì)菌、病菌、真菌和少數(shù)藻類等為代表的、一切肉眼難以觀察到的微小生物的總稱。按照其存生存環(huán)境的不同又可以分為空間微生物和海洋微生物等。雖然同為地球上生生不息的生命體，人類與微生物的關(guān)系卻并不融洽，可謂是典型的“相愛相殺”。
微生物致病，是其與人類“相殺”的主要原因。近年來，大量新現(xiàn)和再現(xiàn)微生物感染所導(dǎo)致的疾病大肆蔓延，而人類由于缺乏有效的治療手段，頻頻陷入被動的狀態(tài)，健康狀況屢屢受到威脅。而從其與人類“相愛”的一面來看，微生物的存在也并非全無益。頗受人類青睞的奶酪、面包、葡萄酒等，就是人們利用微生物對食品氣味和組織結(jié)構(gòu)的影響來生產(chǎn)的。除此之外，早由弗萊明從青霉菌抑制其他細(xì)菌的生長中發(fā)現(xiàn)了青霉素，更是揭開了抗生素在醫(yī)學(xué)界的劃時(shí)代意義。
為了更好的發(fā)揮微生物的積極作用，減少部分微生物對人類生命健康產(chǎn)生的威脅，各種微生物檢測技術(shù)應(yīng)運(yùn)而生。
顯色培養(yǎng)基檢測技術(shù)
顯色培養(yǎng)基檢測技術(shù)是一種常規(guī)的培養(yǎng)鑒定法，一般用于對沙門氏菌、志賀菌、副溶血性弧菌、H7大腸埃希菌、單增李斯特菌、阪崎腸桿菌、大腸桿菌等微生物的檢測。
顯色培養(yǎng)基檢測的基本原理是利用不同種屬細(xì)菌代謝所產(chǎn)生的酶的特異性，在培養(yǎng)基中加入相應(yīng)的特異性酶底物和抑制劑。當(dāng)具有某種特異酶的細(xì)菌與酶底物發(fā)生作用時(shí)，顯色基團(tuán)會游離出來附著在菌落上，形成顏色獨(dú)特的菌落。檢測人員只需根據(jù)菌落的顏色，就能直接對菌屬做出鑒定。
這種方法的優(yōu)勢在于快速、簡便和節(jié)省時(shí)間。大多數(shù)顯色培養(yǎng)基在樣品增菌后，分離培養(yǎng)18到24小時(shí)，就會產(chǎn)生不同顏色的菌落。研究人員根據(jù)菌落的顏色就能做出初步鑒定。此外，顯色培養(yǎng)基作為一種典型的確證實(shí)驗(yàn)，靈敏度高且特異性強(qiáng)，大大簡化了后續(xù)的鑒定步驟。
乳膠凝集反應(yīng)檢測技術(shù)
乳膠凝集反應(yīng)檢測技術(shù)主要用來檢測李斯特菌、沙門氏菌、彎曲桿菌、大腸桿菌O157和軍團(tuán)菌。其在畜牧業(yè)、臨床藥物應(yīng)用等方面都有廣泛的應(yīng)用。
乳膠凝集反應(yīng)試驗(yàn)是以乳膠微粒為載體的間接凝集試驗(yàn)。通過人工方法將抗體包被于與免疫無關(guān)的大分子聚苯乙烯或羧化聚苯乙烯乳膠顆粒上。當(dāng)敏感的乳膠顆粒與待檢細(xì)菌懸液混合后，迅速形成肉眼可見的凝集團(tuán)塊，用于篩選可疑菌。
這種方法操作簡便、快速，結(jié)果易判讀且陰性預(yù)測值高。這種方法也不需要特殊的儀器加以輔助，憑借肉眼就能判斷，價(jià)格相比血清學(xué)和病原學(xué)要親民得多。乳膠凝集反應(yīng)檢測技術(shù)主要適用于臨床檢驗(yàn)。
酶聯(lián)免疫熒光技術(shù)
酶聯(lián)免疫熒光技術(shù)(ELFA)是近年來興起的一種新的酶免疫分析技術(shù)。該技術(shù)以熒光劑為底物，同時(shí)兼具酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)和熒光免疫技術(shù)兩種方法的優(yōu)勢。
酶聯(lián)免疫熒光技術(shù)通過將已知抗體吸附于固相載體，加入待測樣本，使得樣本中的抗原與固相載體上的抗體相結(jié)合、酶標(biāo)抗體與樣本中的抗原結(jié)合。其中，加入酶反應(yīng)的底物被酶開始催化，轉(zhuǎn)化成帶有熒光的產(chǎn)物，這種產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)。研究人員依次為依據(jù)來進(jìn)行定性或定量分析。
ELFA技術(shù)具有特異性強(qiáng)、檢測速度快、自動化程度高以及抗感染能力強(qiáng)等優(yōu)勢，能夠一次性實(shí)現(xiàn)對多個(gè)樣品的檢測。其在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)和食品致病菌檢測方面的應(yīng)用也越來越廣。
除上述三種方法外還有實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)、免疫磁珠技術(shù)、傳感器技術(shù)等。隨著國家對微生物檢測的重視，我國已經(jīng)形成了一套較為完整的方法體系。
科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步推動微生物檢測手段不斷更新。為了更好的促進(jìn)檢測技術(shù)的發(fā)展，實(shí)現(xiàn)與先進(jìn)技術(shù)的接軌，我國還需要充實(shí)監(jiān)督檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)的檢測能力，促進(jìn)新技術(shù)在微生物檢測上的應(yīng)用，從而建立起一套更為完整的微生物檢測體系。
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