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我國(guó)團(tuán)隊(duì)成功制備新型酶標(biāo)抗體 可提高真菌毒素快檢靈敏度
2021年02月26日 10:59:31
來(lái)源：化工儀器網(wǎng) 點(diǎn)擊量：4821
中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所研究員鄭永權(quán)團(tuán)隊(duì)制備了一種新型酶標(biāo)抗體復(fù)合物，該復(fù)合物酶負(fù)載量大可提高檢測(cè)靈敏度，且酶穩(wěn)定性和抗體識(shí)別能力好，可以促進(jìn)真菌毒素快速靈敏檢測(cè)的實(shí)現(xiàn)。
【化工儀器網(wǎng) 時(shí)事熱點(diǎn)】發(fā)霉是常見(jiàn)的食物變質(zhì)原因，很多導(dǎo)致食物發(fā)霉的霉菌不僅會(huì)使食物的外觀、氣味、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)等發(fā)展改變，還可能產(chǎn)生真菌毒素，引發(fā)食物中毒，甚至誘發(fā)癌癥。目前已知的真菌毒素有400多種，幾乎可以污染所有的農(nóng)作物，其中臭名昭著的就是黃曲霉素。真菌毒素的存在是農(nóng)產(chǎn)品和飼料產(chǎn)量和品質(zhì)降低的主要原因之一，不僅危害人畜安全，還會(huì)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。
農(nóng)產(chǎn)品與飼料中真菌毒素的檢測(cè)主要有理化檢測(cè)法和免疫化學(xué)檢測(cè)法兩類。理化檢測(cè)法通常利用薄層色譜法和高效液相色譜法進(jìn)行檢測(cè)，使用較少。免疫化學(xué)檢測(cè)法主要有酶聯(lián)免疫法、膠體金免疫層析方法等。酶聯(lián)免疫法在大批樣品集中檢測(cè)中應(yīng)用較多，而膠體金免疫層析方法適合現(xiàn)場(chǎng)單個(gè)或少數(shù)樣品即時(shí)檢測(cè)。
免疫化學(xué)檢測(cè)法與理化檢測(cè)法相比，具有檢測(cè)成本低、特異性強(qiáng)、操作簡(jiǎn)單等特點(diǎn)。但是傳統(tǒng)的酶標(biāo)抗體通常是用酶和抗體通過(guò)共價(jià)結(jié)合所制備，由于共價(jià)結(jié)合過(guò)程繁瑣，酶的催化活性和抗體的識(shí)別能力不穩(wěn)定，往往導(dǎo)致免疫體系檢測(cè)靈敏度下降。另外，酶標(biāo)抗體其穩(wěn)定性極易受到外界環(huán)境的影響。因此酶聯(lián)免疫法在實(shí)際應(yīng)用中受到很大的限制。
為了解決這一問(wèn)題，中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所研究員鄭永權(quán)團(tuán)隊(duì)制備了一種新型酶標(biāo)抗體復(fù)合物，該復(fù)合物酶負(fù)載量大可提高檢測(cè)靈敏度，且酶穩(wěn)定性和抗體識(shí)別能力好，可以促進(jìn)真菌毒素快速靈敏檢測(cè)的實(shí)現(xiàn)。這項(xiàng)研究發(fā)布在《危險(xiǎn)材料學(xué)報(bào)》(Journal of Hazardous Materials)上。
探究團(tuán)隊(duì)研發(fā)出的新型酶標(biāo)抗體的制備策略為：將辣根過(guò)氧化物酶(HRP)、羊抗鼠單克隆抗體(Ab)和 沸石咪唑酯骨架(ZIF-L) 進(jìn)行原位融合，形成酶標(biāo)抗體(HRP/Ab@ZIF-L)。由于該抗體制備過(guò)程中不含有毒元素、環(huán)境和復(fù)雜的共價(jià)連接，沸石咪唑酯骨架還可保護(hù)生物大分子免受外部環(huán)境的影響，因此，與游離辣根過(guò)氧化物酶和羊抗鼠單克隆抗體相比，融合后酶標(biāo)抗體的催化活性和識(shí)別能力得到極大提高。HRP/Ab@ZIF-L作為一種新穎的酶標(biāo)抗體，被成功用于真菌毒素玉米赤霉烯酮高靈敏和快速測(cè)定。
真菌毒素非常容易污染食物，而且能夠?qū)θ祟惤】档膰?yán)重影響的就有十幾種，包括黃曲霉毒素、玉米赤霉烯酮、棒曲霉素等。由于霉菌可以長(zhǎng)期潛伏，即使沒(méi)有發(fā)現(xiàn)霉變也可能會(huì)有真菌毒素存在，因此真菌毒素檢測(cè)就成為維護(hù)人們健康的重要防線。新型酶標(biāo)抗體的研制對(duì)于降低真菌毒素暴露量將起到重要作用。
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