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大連化物所利用臺式掃描儀實(shí)現(xiàn)高通量單細(xì)胞外囊泡分泌分析
2021年10月15日 15:01:22
來源：大連化學(xué)物理研究所 點(diǎn)擊量：6923
近日，中國科學(xué)院大連化學(xué)物理研究所單細(xì)胞分析研究組研究員陸瑤團(tuán)隊(duì)在高通量單細(xì)胞外囊泡分泌分析技術(shù)研究中取得新進(jìn)展，研究利用臺式掃描儀實(shí)現(xiàn)了高通量單細(xì)胞外囊泡分泌分析。
【化工儀器網(wǎng) 項(xiàng)目成果】近日，中國科學(xué)院大連化學(xué)物理研究所單細(xì)胞分析研究組研究員陸瑤團(tuán)隊(duì)在高通量單細(xì)胞外囊泡分泌分析技術(shù)研究中取得新進(jìn)展，研究利用臺式掃描儀實(shí)現(xiàn)了高通量單細(xì)胞外囊泡分泌分析。
近年來，單細(xì)胞分析技術(shù)迅速發(fā)展并推動了生物醫(yī)學(xué)的研究，然而目前大部分單細(xì)胞分析技術(shù)依賴體積龐大、價格昂貴的儀器進(jìn)行單細(xì)胞計(jì)數(shù)以及生物分子信號檢測，難以廣泛應(yīng)用。因此，亟需簡便、易于操作、低成本的分析平臺實(shí)現(xiàn)單細(xì)胞外囊泡分泌物的檢測，以便更好地認(rèn)識細(xì)胞間通訊、信息交換的重要介質(zhì)細(xì)胞外囊泡的分泌異質(zhì)性。
為此，該團(tuán)隊(duì)在前期工作(PNAS，2019)基礎(chǔ)上，通過將免疫金銀染色技術(shù)和泊松分布統(tǒng)計(jì)相結(jié)合，在臺式掃描儀上實(shí)現(xiàn)了無需細(xì)胞計(jì)數(shù)的高通量單細(xì)胞外囊泡分泌分析。該平臺由高通量微孔陣列芯片和抗體涂層玻片組成，微孔陣列芯片用于捕獲單細(xì)胞，抗體涂層玻片用于捕獲單細(xì)胞分泌的外囊泡。免疫金銀染色是被廣泛采用的染色方法，具有成本低、可靠性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)。金納米顆?？梢源呋芤褐械你y離子還原，使得金屬銀在膠體金表面產(chǎn)生灰色沉積，便于利用臺式掃描儀可視化檢測結(jié)果。泊松分布是一種離散概率分布，適合于描述單位時間內(nèi)隨機(jī)事件的發(fā)生次數(shù)，在微孔陣列芯片中捕獲細(xì)胞服從泊松分布的規(guī)律。科研人員通過優(yōu)化細(xì)胞密度、體積，使得微孔中捕獲的細(xì)胞數(shù)目絕大多數(shù)為單細(xì)胞；利用該便攜式檢測平臺，分析了人口腔鱗癌細(xì)胞系和口腔鱗癌患者原代細(xì)胞分泌的不同表型的外囊泡，獲得了與免疫熒光分析類似的結(jié)果。此外，科研人員還利用滴定曲線定量分析每個單細(xì)胞分泌外囊泡的數(shù)量，從而可以直接比較不同表型的外囊泡在分泌數(shù)量、分泌率等方面的差異。
相關(guān)研究成果以High-Throughput Single-Cell Extracellular Vesicle Secretion Analysis on a Desktop Scanner without Cell Counting為題，發(fā)表在美國化學(xué)會《分析化學(xué)》(Analytical Chemistry)上。研究工作得到國家自然科學(xué)基金、中科院青年創(chuàng)新促進(jìn)會、大連化物所創(chuàng)新基金等項(xiàng)目的支持。
利用臺式掃描儀實(shí)現(xiàn)了高通量單細(xì)胞外囊泡分泌分析
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