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50T-牛棒桿菌PCR檢測試劑盒

2025-05-18

產(chǎn)      地:
進(jìn)口、國產(chǎn)
所在地區(qū):
上海上海市
有效期還剩 116舉報(bào)該信息

實(shí)驗(yàn)過程:
一、牛棒桿菌PCR檢測試劑盒試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
   10×PCR buffer             5μl
     dNTP mixl                 4μl
     引物1(10pM)               2μl
     引物2(10PM)              2μ
     Taq酶(2U/μl)            1μl
     DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
     加ddH2O至               50 μl
  視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測
三、注意事項(xiàng)
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。好設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險(xiǎn)有影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。

產(chǎn)品名稱

牛棒桿菌PCR檢測試劑盒

英文名稱

Corynebacterium bovisPCR

貨號

YS30611-R

原理是由一對引物介導(dǎo),能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
適用范圍【參考值】
1.試劑盒有效性判定:
(1)陽性對照:有典型S型擴(kuò)增曲線或Ct值≤35。
(2)陰性對照:Ct值>38或無Ct值,線形為直線或輕微斜線,無指數(shù)增長期。
2.標(biāo)本結(jié)果判定:
(1)陽性:標(biāo)本檢測結(jié)果Ct值≤35或有明顯指數(shù)增長期。
(2)可疑:標(biāo)本檢測結(jié)果Ct值在35~38范圍內(nèi)。此時(shí)應(yīng)對標(biāo)本進(jìn)行重復(fù)檢測,如重復(fù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果Ct值仍在35~38范圍內(nèi),有明顯指數(shù)增長期,則判定為陽性,否則為陰性。
(3)陰性:標(biāo)本檢測結(jié)果Ct值>38或無Ct值。

PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個(gè)循環(huán),通過多次循環(huán)反應(yīng),使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。
其主要步驟是:
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因?yàn)槟0鍙?’→3’方向延伸,合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
下列是公司正在*的產(chǎn)品:

CD41 antibody [MEM-06]原裝、分裝Dexamethasone 地塞米松

CD44 antibody [MEM-85]原裝、分裝Protamine sulfate sale魚精蛋白鹽

ICAM1 antibody [MEM-111]原裝、分裝DNA(Herring sperm) 鯡魚精

CD9 antibody [MEM-61]原裝、分裝2-Deoxy-D-Ribose 2-脫氧-D-核糖

HLA E antibody [MEM-E/02]原裝、分裝2-Deoxy-D-glucose2-脫氧-D-葡萄糖

HLA Class I antibody [MEM-123]原裝、分裝D-Ribose D-核糖

Prostate Specific Antigen antibody [A67-B/E3]原裝、分裝(Dnase I)DeoxyribonueleaseⅠ

TRAIL antibody [2E5]原裝、分裝DNAseI

PGAM1 antibody原裝、分裝L-Lactic Dehydrogenase L-乳脫酶Human CYP7B1 peptide原裝、分裝異香酚(正+反)(分析標(biāo)準(zhǔn)品,用于環(huán)境分析)

Human PEPP2 peptide原裝、分裝異醚(分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.7%(GC))

Human AKAP3  peptide原裝、分裝異醚(分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.7%(GC))

Human CD2BP2 peptide原裝、分裝異醇(分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.9%(GC))

LNK peptide原裝、分裝異戊酯(分析標(biāo)準(zhǔn)品,用于萜烯分析,≥99.7%(GC))

DKK1 peptide原裝、分裝異戊酯(分析標(biāo)準(zhǔn)品,用于萜烯分析,≥99.7%(GC))

Human GPR83 peptide原裝、分裝苯標(biāo)準(zhǔn)溶液(4000mg/L,溶:*)

VAV3 peptide原裝、分裝水中無機(jī)碳溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(1000mg/L,基體:水)

Mouse Schlafen 8 peptide原裝、分裝茚并(1,2,3-cd)芘標(biāo)準(zhǔn)溶液(3.80μg/mL,基體:醇)
牛棒桿菌PCR檢測試劑盒53BP1 (phospho S25) antibody原裝、分裝神經(jīng)肽Y(2-36),酰胺,豬

SMC3 antibody原裝、分裝神經(jīng)肽Y(22-36)

HDAC6 antibody原裝、分裝神經(jīng)肽Y(3-36)

Carbonic anhydrase 2/CA2 antibody原裝、分裝神經(jīng)肽Y(3-36),豬

SNF5/SMARCB1 antibody原裝、分裝視網(wǎng)膜膽能神經(jīng)元神經(jīng)營養(yǎng)子

GDF15 antibody原裝、分裝孤啡肽(1-13)酰胺

HRASLS2 antibody原裝、分裝痛穩(wěn)素

Notch1a antibody原裝、分裝阿爾茨海默癥淀粉樣蛋白Non-Ab組分

ODZ3 antibody原裝、分裝核蛋白F



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