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Auvon細(xì)菌計(jì)數(shù)板準(zhǔn)備:
準(zhǔn)備細(xì)菌計(jì)數(shù)使用前,磨光的表面小心地用擦鏡紙擦干凈。蓋玻片也要擦干凈。
在需要蓋的周邊區(qū)域需要用蒸餾水弄得微濕后,然后蓋玻片要慢慢的從計(jì)數(shù)板的前端推入,直到蓋玻片的前端邊緣與計(jì)數(shù)板的劃格子的區(qū)域處于同位。
在外部支持和蓋玻片之間的干擾線(牛頓環(huán))的組成顯示了蓋玻片的準(zhǔn)確位置。
由于細(xì)菌計(jì)數(shù)板較薄,1mm厚度,可以使用油鏡觀察。當(dāng)然使用時(shí)請(qǐng)當(dāng)心,小心易碎。蓋玻片也是易碎的,可以另外單獨(dú)購(gòu)買。
Auvon細(xì)菌計(jì)數(shù)板加樣:
取一個(gè)良好混合型的吸管并且放置一些初期的幾滴液體。把吸管的外部擦干,然后保持吸管一定的角度直到小滴液體被吸管吸上去。然后這滴液體被放置在蓋玻片和計(jì)數(shù)板之間。由于蓋玻片和計(jì)數(shù)板之間的毛細(xì)管現(xiàn)象作用的結(jié)果,兩個(gè)平面之間的縫隙被灌滿。在溶液要滿出計(jì)數(shù)板截面的邊緣之前,移走吸管的。如果有可見(jiàn)氣泡或者液體已經(jīng)滿出邊緣并且進(jìn)入其他的溝里,那么計(jì)數(shù)板就要擦干凈并且重新加樣。
裝載好的計(jì)數(shù)板被放置在顯微鏡臺(tái)上。顯微鏡的照明是重要的,太亮了會(huì)影響劃格線的觀察。光可以通過(guò)虹膜光圈減弱直到劃得格子在背景中再次清晰可見(jiàn)。細(xì)胞/質(zhì)粒的計(jì)數(shù)應(yīng)該充分稀釋到他們不再互相重疊,并且均勻的分配。
要完成計(jì)數(shù)檢測(cè)需要擴(kuò)大到期望的可見(jiàn)的細(xì)胞/質(zhì)粒。細(xì)胞數(shù)量的計(jì)算推薦計(jì)數(shù)100方格作為排除少量的結(jié)果。
計(jì)數(shù)格在過(guò)劃線區(qū)域使用時(shí)需要均勻的分配,并且這個(gè)通過(guò)藉由三倍之?dāng)?shù)決定的方格支架在進(jìn)入?yún)^(qū)段之內(nèi)。
計(jì)數(shù)完100方格后總數(shù)除100(計(jì)數(shù)的方格數(shù)),來(lái)得到每格的平均值。乘稀釋度,除1/4000(每個(gè)小方格的立方容積1/20 x 1/20 x 1/10 = 1/4000mm3)。這次計(jì)算得到的數(shù)字是原非稀釋流質(zhì)的每立方毫米的細(xì)胞數(shù)量


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