水果和蔬菜中阿維菌素殘留量的測定液相色譜儀

規(guī)范性引用文件

GB 2763 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中農(nóng)藥最大殘留

GB/T 6682 分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法

方法提要

試樣中的阿維菌素用丙酮提取，經(jīng)濃縮后用 SPE C 18 柱凈化，并用甲醇洗脫。洗脫液經(jīng)濃縮、定容、過濾后，用水果和蔬菜中阿維菌素殘留量的測定液相色譜儀配有紫外檢測器的高效液相色譜測定，外標(biāo)法定量。

試劑和材料

除另有規(guī)定外，所有試劑均為分析純，水為符合 GB/T 6682 中規(guī)定的一級水 。

試劑丙酮 C 3 H 6 O 色譜純。

甲醇 CH 4 O 色譜純 。

標(biāo)準(zhǔn)品

阿維菌素標(biāo)準(zhǔn)品 （分子式 C 48 H 72 O 14 ））：純度 96.0% 。

標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

阿維菌素標(biāo)準(zhǔn)儲備液：稱取 0.1 g( 準(zhǔn)確至 0.0002 g ) 阿維菌素標(biāo)準(zhǔn)品于 100m L 容量瓶中 , 用甲

醇溶解并定容至刻度配制成濃度為 1.0 mg/mL 的標(biāo)準(zhǔn)儲備液。

阿維菌素標(biāo)準(zhǔn)工作液 根據(jù)需要移取適量的阿維菌素標(biāo)準(zhǔn)儲備液 用甲醇稀釋成適當(dāng)濃度的標(biāo)

準(zhǔn)。標(biāo)準(zhǔn)工作液需每周配制一次。

儀器和設(shè)備

高效液相色譜儀：配有紫外檢測器

分析天平：感量 0.01 g 和 0.0001 g

組織搗碎機(jī)。

振蕩器。

旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器。

固相萃取柱： SPE C 18 。規(guī)格： 60 mg/3 mL 使用前用 5 mL 甲醇和 5 mL 水活化。

試樣制備與保存

試樣制備

將所取樣品縮分出1 kg ，取樣部位按 GB 2763 附錄 A 執(zhí)行 樣品經(jīng)組織搗碎機(jī)搗碎，均分為兩份，裝入潔凈容器內(nèi)，作為試樣密封并標(biāo)明標(biāo)記。

試樣保存

將試樣于18 ℃以下保存。在抽樣和制樣的操作過程中，應(yīng)防止樣品受到污染或發(fā)生殘留物含量的變化。

分析步驟

提取

稱取試樣約20 g （精確至 0.1 g ）于 100 mL 具塞錐形瓶中，加入 50 mL 丙酮，于振蕩器上振蕩 0.5h 用布氏漏斗抽濾，用 20 mL × 2 丙酮洗滌錐形瓶及殘渣。合并丙酮提取液，于 40 ℃水浴旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至約2 mL 。

凈化

將上述的濃縮提取液轉(zhuǎn)入SPE C18 柱，再用 5 mL 水淋洗，去掉淋洗液。最后用 5 mL 甲醇洗脫，收集洗脫液，用氮氣吹至近干。準(zhǔn)確加入 1.0 mL 甲醇溶解殘渣， 用 0.45 μ m 濾膜過濾 , 濾液供液相色譜測定。外標(biāo)法定量。

測定

高效液相色譜 參考 條件：

色譜柱： ODS C 18 反相柱， 4.6 mm × 125 mm

流動相：甲醇：水 90+10, V/V

流速： 1.0 mL/min

檢測波長： 245 nm

柱溫： 40

進(jìn)樣量： 20 μ L 。

色譜測定

根據(jù)樣液中阿維菌素含量情況，選定峰高相近的標(biāo)準(zhǔn)工作液標(biāo)準(zhǔn)工作液和樣液中阿維菌素響應(yīng)值均應(yīng)在儀器檢測線性范圍內(nèi)，標(biāo)準(zhǔn)工作液和樣液等體積參插進(jìn)樣。在上述色譜條件下，阿維菌素保留時間約為 5.3 min 。

標(biāo)準(zhǔn)色譜圖參見附錄

A ，標(biāo)準(zhǔn)品紫外光譜圖參見附錄 B 。