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AQUA技術(shù)在蛋白質(zhì)研究中的應(yīng)用檢測(cè)技術(shù)服務(wù)詳情介紹

在生命科學(xué)研究不斷走向jīngzhǔn化和定量化的jīntiān,dànbáizhì作為功能性分子的研究?jī)r(jià)值愈發(fā)凸顯。無(wú)論是探索疾病機(jī)制,還是開(kāi)發(fā)治療策略,jīngquè掌握dànbáizhì的表達(dá)水平和變化趨勢(shì)都是科學(xué)發(fā)現(xiàn)的重要前提。AQUA(Absolute QUAntification)技術(shù),作為一種以穩(wěn)定同位素標(biāo)記肽段為基礎(chǔ)的juéduì定量質(zhì)譜方法,近年來(lái)在dànbáizhì研究中展現(xiàn)出廣泛而深遠(yuǎn)的應(yīng)用前景。


一、AQUA技術(shù)概述

AQUA技術(shù)本質(zhì)上是基于合成穩(wěn)定同位素標(biāo)記肽段的juéduì定量方法。通過(guò)人工合成一條與目標(biāo)蛋白消化后肽段wánquán同源、但在特定氨基酸處引入同位素標(biāo)簽(如13C、15N等)的“重肽”,作為內(nèi)標(biāo)加入樣本中。由于重肽與內(nèi)源肽在質(zhì)譜中的行為高度一致,研究人員可通過(guò)對(duì)兩者在MS/MS中信號(hào)強(qiáng)度比值的計(jì)算,得出目標(biāo)蛋白的juéduì含量。AQUA不依賴樣本間對(duì)比,而是提供jīngquè的定量結(jié)果,避免了因樣本處理、質(zhì)譜波動(dòng)等因素導(dǎo)致的數(shù)據(jù)偏差。


二、AQUA技術(shù)的關(guān)鍵特性


  • 高特異性識(shí)別能力:通過(guò)針對(duì)性地設(shè)計(jì)用于質(zhì)譜分析的肽段序列,AQUA可實(shí)現(xiàn)對(duì)單一蛋白或蛋白家族成員的特異定量;

  • 優(yōu)異的靈敏度與準(zhǔn)確性:即使在復(fù)雜的生物樣本(如血漿、組織勻漿等)中,仍能實(shí)現(xiàn)對(duì)低豐度蛋白的jīngzhǔn檢測(cè);

  • 適用樣本類型廣泛:適用于細(xì)胞、組織、體液等各類樣本,尤其對(duì)不適用于代謝標(biāo)記的臨床樣本具有突出優(yōu)勢(shì);

  • 良好的可重復(fù)性與量化線性范圍:由于定量基于外源添加的重肽,實(shí)驗(yàn)重復(fù)性強(qiáng),適合長(zhǎng)期數(shù)據(jù)積累與多批次分析。


這些特性使得AQUA成為一種既可靠又高度可控的dànbáizhì定量方法,特別適用于對(duì)結(jié)果精度有較高要求的研究場(chǎng)景。


三、AQUA技術(shù)在dànbáizhì研究中的核心應(yīng)用

AQUA技術(shù)的應(yīng)用貫穿dànbáizhì研究的多個(gè)階段,其價(jià)值遠(yuǎn)不止于簡(jiǎn)單的定量,其背后代表的是以定量為中心的研究思維方式。

1、蛋白表達(dá)水平的jīngzhǔn監(jiān)測(cè)

在基礎(chǔ)研究中,了解特定蛋白在不同生理狀態(tài)、疾病模型或處理?xiàng)l件下的表達(dá)變化,是揭示其生物學(xué)功能的起點(diǎn)。AQUA提供的juéduì定量信息,有助于研究者構(gòu)建完整的表達(dá)譜圖,為下游機(jī)制研究奠定數(shù)據(jù)基礎(chǔ)。


2、功能蛋白與信號(hào)通路的定量建模

現(xiàn)代dànbáizhì組學(xué)不僅關(guān)注“是否表達(dá)”,更關(guān)注“表達(dá)多少”。通過(guò)對(duì)功能相關(guān)蛋白的數(shù)量化建模,AQUA可幫助研究者構(gòu)建更真實(shí)的信號(hào)通路網(wǎng)絡(luò),評(píng)估蛋白間調(diào)控關(guān)系的強(qiáng)弱,提升對(duì)系統(tǒng)動(dòng)態(tài)行為的理解。


3、特定蛋白亞型和修飾形式的定量解析

對(duì)于存在多種剪接形式、翻譯后修飾(如磷酸化、乙?;龋┑牡鞍祝珹QUA可通過(guò)設(shè)計(jì)特異性肽段,對(duì)不同亞型或修飾位點(diǎn)進(jìn)行定量區(qū)分,為研究蛋白功能多樣性和調(diào)控機(jī)制提供關(guān)鍵數(shù)據(jù)。


4、定量驗(yàn)證dànbáizhì組學(xué)篩選結(jié)果

dànbáizhì組學(xué)初篩方法(如DDA、DIA)通常輸出大量候選差異蛋白,但因技術(shù)本身存在定量偏差,需進(jìn)一步驗(yàn)證。AQUA可作為一種高精度驗(yàn)證手段,對(duì)篩選結(jié)果進(jìn)行定量確認(rèn),增強(qiáng)研究結(jié)論的可信度與發(fā)表可能性。


5、數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)化與交叉平臺(tái)比較

在多中心研究或跨平臺(tái)分析中,不同質(zhì)譜系統(tǒng)和實(shí)驗(yàn)流程帶來(lái)的系統(tǒng)誤差是研究難點(diǎn)之一。AQUA作為“標(biāo)準(zhǔn)參考點(diǎn)”,可以在不同數(shù)據(jù)集之間實(shí)現(xiàn)結(jié)果的可比性,支持更高層級(jí)的整合與分析。


四、技術(shù)應(yīng)用中應(yīng)關(guān)注的幾個(gè)要點(diǎn)

盡管AQUA具備諸多優(yōu)勢(shì),但要實(shí)現(xiàn)高質(zhì)量的數(shù)據(jù)輸出,研究人員在應(yīng)用過(guò)程中仍需注意以下幾點(diǎn):


  • 重肽設(shè)計(jì)需jīngzhǔn匹配目標(biāo)蛋白特征區(qū)域,避免與同源蛋白交叉反應(yīng);

  • 樣本處理流程需標(biāo)準(zhǔn)化,以確保外源肽的穩(wěn)定性和均一性;

  • 定量模型應(yīng)結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線與內(nèi)標(biāo)效應(yīng),增強(qiáng)數(shù)據(jù)解釋力;

  • 質(zhì)譜平臺(tái)的穩(wěn)定性與靈敏度對(duì)定量結(jié)果的可靠性具有直接影響,需保持設(shè)備狀態(tài)良好。


規(guī)范化、標(biāo)準(zhǔn)化的操作流程是AQUA應(yīng)用效果的關(guān)鍵保障,也是未來(lái)推廣和普及的重要基礎(chǔ)。


隨著dànbáizhì研究不斷向更深層次發(fā)展,定量的需求日益增強(qiáng),而AQUA技術(shù)憑借其高精度、高特異性和可追溯性,已逐步成為dànbáizhì組學(xué)中的核心定量工具。無(wú)論是在基礎(chǔ)機(jī)制研究,還是臨床轉(zhuǎn)化研究中,AQUA所提供的定量維度都為科研人員提供了更堅(jiān)實(shí)的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。作為科研服務(wù)提供者,百泰派克生物科技將持續(xù)關(guān)注定量蛋白組分析的發(fā)展趨勢(shì),致力于為dànbáizhì研究提供前沿技術(shù)支持和zhuānyè服務(wù)。


百泰派克生物科技特色項(xiàng)目


一、蛋白測(cè)序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測(cè)序系統(tǒng)對(duì)dànbáizhì序列進(jìn)行分析,提供基于質(zhì)譜的蛋白測(cè)序分析服務(wù),包括對(duì)dànbáizhì的氨基酸組成分析,Nduāncèxù,Cduāncèxù和全序列分析,以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務(wù)。對(duì)于未知理論序列的dànbáizhì,提供基于從頭測(cè)序法的dànbáizhì從頭測(cè)序服務(wù),對(duì)蛋白序列進(jìn)行分析。


※服務(wù)優(yōu)勢(shì):

1.采用目前世界上優(yōu)良的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實(shí)現(xiàn)對(duì)所測(cè)定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測(cè)定蛋白N端多達(dá) 70個(gè)氨基酸序列;

4.可測(cè)定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug,即可完成檢測(cè);

6.測(cè)序不受N端封閉,PEC和和糖基化等N端修飾的影響。



二、dànbáizhì組學(xué)

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺(tái)結(jié)合Nano-LC,提供定量dànbáizhì組學(xué)、靶向dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué)、翻譯后修飾蛋白組學(xué)等多種dànbáizhì組學(xué)分析服務(wù)。此外,百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學(xué)服務(wù),助力微量樣本蛋白組學(xué)、大樣本群醫(yī)學(xué)及高通量修飾組學(xué)等研究工作。


※服務(wù)優(yōu)勢(shì):

1 .高通量定量蛋白分析:多對(duì)照組大規(guī)模實(shí)驗(yàn)分析,發(fā)現(xiàn)新的生物標(biāo)記物;

2.體內(nèi)體外多種dànbáizhì標(biāo)記方法,適用于分析組織、細(xì)胞、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高,實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)度高;

4.可檢測(cè)較低豐度蛋白,線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學(xué)分析,分析更系統(tǒng)準(zhǔn)確。



三、單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進(jìn)行單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析,采用金屬元素標(biāo)記物(通常是金屬元素標(biāo)記的特異抗體)標(biāo)記細(xì)胞表面和內(nèi)部的分子,然后用流式細(xì)胞原理分離單個(gè)細(xì)胞,再用電感耦合等離子體質(zhì)譜(ICP-MS)分析單個(gè)細(xì)胞的原子質(zhì)量譜,zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細(xì)胞表面和內(nèi)部的信號(hào)分子表達(dá)量。


※服務(wù)優(yōu)勢(shì):

1.技術(shù)優(yōu)良,*技術(shù)空白

采用金屬標(biāo)記抗體技術(shù),避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問(wèn)題??稍趩渭?xì)胞層面上對(duì)多種指標(biāo)同時(shí)進(jìn)行表征,百泰派克生物科技可做到同時(shí)檢測(cè)51個(gè)目標(biāo)蛋白。

2.分析數(shù)量大,成本較低

單細(xì)胞RNAseq受成本等因素限制,所有樣本細(xì)胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個(gè)左右,而流式質(zhì)譜技術(shù)一次(單樣本)就可分析至少10^5的細(xì)胞,實(shí)現(xiàn)了數(shù)量級(jí)的提高,且成本不高于單細(xì)胞RNAseq。

3.應(yīng)用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細(xì)胞亞群的變化,在臨床診斷、疾病機(jī)制研究等方面具有極大的研究前景;

②將金屬標(biāo)簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會(huì)有新應(yīng)用方向。除常規(guī)蛋白外,質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾;

③可檢測(cè)細(xì)胞存活率、細(xì)胞大小、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達(dá)量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。



四、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實(shí)現(xiàn)10,000個(gè)以上I型多肽和10,000個(gè)以上II型多肽的鑒定和識(shí)別。通過(guò)我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學(xué)分析平臺(tái)進(jìn)行免疫肽組學(xué)分析,可從zuì小的樣品材料中進(jìn)行可重復(fù)的識(shí)別和定量。該服務(wù)可以應(yīng)用于大規(guī)模的研究,旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案,深入挖掘未知的靶標(biāo)。



五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù),MALDI TOF,高效色譜分離技術(shù),提供一系列完善的生物藥物分析方案,從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級(jí)結(jié)構(gòu)分析,到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務(wù),幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì)。



百泰派克生物科技七大檢測(cè)平臺(tái)

AQUA技術(shù)在蛋白質(zhì)研究中的應(yīng)用




百泰派克生物科技-生物制品表征,生物質(zhì)譜多組學(xué)優(yōu)質(zhì)服務(wù)商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測(cè)和項(xiàng)目驗(yàn)證等zhuānyè服務(wù)。公司實(shí)驗(yàn)室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導(dǎo)原則,通過(guò)CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認(rèn)證,建立了完備的質(zhì)量體系,數(shù)據(jù)冷熱/異地備份,設(shè)備定期計(jì)量/期間核查,軟件審計(jì)追蹤,為客戶提供一體化解決方案和技術(shù)服務(wù),支持新藥研發(fā)、藥物申報(bào)注冊(cè)和生產(chǎn)放行。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系,zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測(cè)分析服務(wù);

2.獲國(guó)家CNAS實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可,為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務(wù);

3.業(yè)務(wù)范圍覆蓋dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué)、代謝組學(xué)、生物藥物表征、單細(xì)胞分析、單細(xì)胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學(xué)生物質(zhì)譜整合分析等;

4.七大質(zhì)量控制檢測(cè)平臺(tái),滿足您一站式服務(wù)需求;

5.服務(wù)3000+企業(yè),10000+客戶的選擇;

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務(wù)!



AQUA技術(shù)在蛋白質(zhì)研究中的應(yīng)用檢測(cè)技術(shù)服務(wù)詳情介紹


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