蛋白質(zhì)翻譯后修飾分析概述檢測(cè)技術(shù)服務(wù)詳情介紹

dànbáizhì是生命活動(dòng)的執(zhí)行者，從信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)到細(xì)胞結(jié)構(gòu)維持wúsuǒbùzài。但dànbáizhì在翻譯完成后，并非立即具備生物活性，它們通常需要經(jīng)歷一系列“翻譯后修飾”（Post-Translational Modifications, PTMs），才能實(shí)現(xiàn)功能激活、亞細(xì)胞定位調(diào)整或降解控制。這些修飾賦予dànbáizhì更豐富的功能層次，是細(xì)胞精密調(diào)控的關(guān)鍵方式。深入分析dànbáizhì的翻譯后修飾，不僅是基礎(chǔ)生命科學(xué)研究的核心任務(wù)，也是疾病機(jī)制揭示與靶點(diǎn)發(fā)現(xiàn)的關(guān)鍵途徑。

一、dànbáizhì翻譯后修飾的多樣性與功能意義

dànbáizhì翻譯后修飾是在dànbáizhì合成后，通過酶促或非酶促方式引入化學(xué)基團(tuán)或結(jié)構(gòu)改變的分子事件。目前已鑒定的PTM種類超過400種，zuì常見的包括：

• 磷酸化（Phosphorylation）：發(fā)生在Ser、Thr、Tyr殘基，是信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的核心調(diào)控機(jī)制；

• 乙?；ˋcetylation）：常見于賴氨酸殘基，參與染色質(zhì)重構(gòu)與轉(zhuǎn)錄調(diào)控；

• 泛素化（Ubiquitination）：通過連接泛素多聚鏈決定dànbáizhì降解或功能調(diào)節(jié)；

• 甲基化（Methylation）：影響基因表達(dá)、表觀遺傳狀態(tài)；

• 糖基化（Glycosylation）：關(guān)鍵于細(xì)胞間識(shí)別、dànbáizhì穩(wěn)定性與免疫調(diào)控；

• 硝化、羥基化、棕櫚酰化、硫酸化等：涉及線粒體功能、受體激活、dànbáizhì膜錨定等多方面調(diào)控。

這些修飾廣泛分布于哺乳動(dòng)物、植物、微生物等不同生物體，參與細(xì)胞周期、代謝穩(wěn)態(tài)、應(yīng)激反應(yīng)乃至病理狀態(tài)（如腫瘤、自身免疫疾病、神經(jīng)退行性疾?。┑恼{(diào)控網(wǎng)絡(luò)。

二、翻譯后修飾研究的分析策略

當(dāng)前，質(zhì)譜技術(shù)（Mass Spectrometry, MS）無疑是PTM研究的核心平臺(tái)。基于高分辨率質(zhì)譜的dànbáizhì組學(xué)方法，能夠在不依賴抗體的前提下，實(shí)現(xiàn)對(duì)全局修飾位點(diǎn)的高通量、定量識(shí)別。其基本流程包括：

1、蛋白提取與酶解

通常使用yídànbáiméi將復(fù)雜樣本中的dànbáizhì切割為肽段，以暴露潛在的修飾位點(diǎn)。為了提高修飾肽的檢出率，需特別優(yōu)化裂解條件，避免修飾丟失。

2、富集修飾肽段

由于修飾肽段豐度低、信號(hào)弱，必須通過特異性富集手段進(jìn)行前處理。例如：

• 磷酸化肽可用TiO?或Fe-NTA柱富集；

• 泛素化殘基可通過K-ε-GG抗體識(shí)別特異性標(biāo)記；

• 乙酰化肽常用抗體免疫沉淀或強(qiáng)陽離子交換色譜（SCX）富集。

3、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用分析（LC-MS/MS）

采用納流液相色譜（nanoLC）與高分辨率質(zhì)譜（如Orbitrap、Q Exactive）聯(lián)用，可實(shí)現(xiàn)修飾肽段的分離與鑒定。串聯(lián)質(zhì)譜（MS/MS）進(jìn)一步對(duì)肽段碎片進(jìn)行結(jié)構(gòu)解析，實(shí)現(xiàn)修飾位點(diǎn)的jīngquè定位。

4、數(shù)據(jù)分析與注釋

修飾肽段的識(shí)別通常依賴MaxQuant、Proteome Discoverer等軟件，結(jié)合Unimod數(shù)據(jù)庫對(duì)修飾類型進(jìn)行匹配。為提高可信度，研究者需設(shè)定嚴(yán)格的FDR（jiǎfā現(xiàn)率）閾值，并結(jié)合手動(dòng)驗(yàn)證與生物學(xué)重復(fù)評(píng)估數(shù)據(jù)可靠性。

三、特定修飾類型的研究亮點(diǎn)

1、磷酸化dànbáizhì組學(xué)

磷酸化是研究zuì深入的PTM類型之一，在信號(hào)通路研究中應(yīng)用廣泛。高通量磷酸化組分析已成功揭示如EGFR、MAPK等關(guān)鍵通路的激活位點(diǎn)，在腫瘤靶點(diǎn)篩選中具有廣泛應(yīng)用。

2、泛素化和SUMO化

泛素化研究逐漸由蛋白降解功能拓展至信號(hào)調(diào)控與應(yīng)激反應(yīng)。近年來，小泛素樣修飾（SUMOylation）因其在DNA修復(fù)和病毒感染過程中的重要性而受到關(guān)注，成為dànbáizhì穩(wěn)態(tài)研究新熱點(diǎn)。

3、糖基化與免疫相關(guān)機(jī)制

糖基化修飾在細(xì)胞識(shí)別和免疫逃逸中的角色尤為關(guān)鍵，N-糖基化與O-糖基化異常被證實(shí)與癌癥免疫抑制機(jī)制密切相關(guān)。MS結(jié)合糖譜分析為抗體藥物優(yōu)化和生物制劑純化提供重要支撐。

dànbáizhì翻譯后修飾研究正從“dànbáizhì功能注解的補(bǔ)充”上升為“細(xì)胞調(diào)控研究的核心”，是理解復(fù)雜生命現(xiàn)象bùkěhuòquē的一環(huán)。無論是信號(hào)通路構(gòu)建、疾病標(biāo)志物篩選，還是藥物靶點(diǎn)發(fā)現(xiàn)，PTM分析都提供了bùkětìdài的視角。而要高效開展PTM研究，不僅需要強(qiáng)大的實(shí)驗(yàn)平臺(tái)，更離不開標(biāo)準(zhǔn)化、系統(tǒng)化的技術(shù)服務(wù)支持。百泰派克生物科技依托豐富的質(zhì)譜分析經(jīng)驗(yàn)與全面的dànbáizhì組學(xué)解決方案，致力于為科研工作者提供高質(zhì)量的翻譯后修飾蛋白組分析服務(wù)，助力揭示細(xì)胞調(diào)控的核心機(jī)制，加速科研成果轉(zhuǎn)化。

百泰派克生物科技特色項(xiàng)目

一、蛋白測(cè)序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測(cè)序系統(tǒng)對(duì)dànbáizhì序列進(jìn)行分析，提供基于質(zhì)譜的蛋白測(cè)序分析服務(wù)，包括對(duì)dànbáizhì的氨基酸組成分析，Nduāncèxù，Cduāncèxù和全序列分析，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務(wù)。對(duì)于未知理論序列的dànbáizhì，提供基于從頭測(cè)序法的dànbáizhì從頭測(cè)序服務(wù)，對(duì)蛋白序列進(jìn)行分析。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1.采用目前世界上優(yōu)良的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實(shí)現(xiàn)對(duì)所測(cè)定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測(cè)定蛋白N端多達(dá) 70個(gè)氨基酸序列;

4.可測(cè)定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測(cè);

6.測(cè)序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二、dànbáizhì組學(xué)

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺(tái)結(jié)合Nano-LC，提供定量dànbáizhì組學(xué)、靶向dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué)、翻譯后修飾蛋白組學(xué)等多種dànbáizhì組學(xué)分析服務(wù)。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學(xué)服務(wù)，助力微量樣本蛋白組學(xué)、大樣本群醫(yī)學(xué)及高通量修飾組學(xué)等研究工作。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1 .高通量定量蛋白分析:多對(duì)照組大規(guī)模實(shí)驗(yàn)分析，發(fā)現(xiàn)新的生物標(biāo)記物;

2.體內(nèi)體外多種dànbáizhì標(biāo)記方法，適用于分析組織、細(xì)胞、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高，實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)度高;

4.可檢測(cè)較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學(xué)分析，分析更系統(tǒng)準(zhǔn)確。

三、單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進(jìn)行單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析，采用金屬元素標(biāo)記物（通常是金屬元素標(biāo)記的特異抗體）標(biāo)記細(xì)胞表面和內(nèi)部的分子，然后用流式細(xì)胞原理分離單個(gè)細(xì)胞，再用電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）分析單個(gè)細(xì)胞的原子質(zhì)量譜，zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細(xì)胞表面和內(nèi)部的信號(hào)分子表達(dá)量。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1.技術(shù)優(yōu)良，*技術(shù)空白

采用金屬標(biāo)記抗體技術(shù)，避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問題。可在單細(xì)胞層面上對(duì)多種指標(biāo)同時(shí)進(jìn)行表征，百泰派克生物科技可做到同時(shí)檢測(cè)51個(gè)目標(biāo)蛋白。

2.分析數(shù)量大，成本較低

單細(xì)胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細(xì)胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個(gè)左右，而流式質(zhì)譜技術(shù)一次（單樣本）就可分析至少10^5的細(xì)胞，實(shí)現(xiàn)了數(shù)量級(jí)的提高，且成本不高于單細(xì)胞RNAseq。

3.應(yīng)用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細(xì)胞亞群的變化，在臨床診斷、疾病機(jī)制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標(biāo)簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會(huì)有新應(yīng)用方向。除常規(guī)蛋白外，質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測(cè)細(xì)胞存活率、細(xì)胞大小、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達(dá)量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實(shí)現(xiàn)10,000個(gè)以上I型多肽和10,000個(gè)以上II型多肽的鑒定和識(shí)別。通過我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學(xué)分析平臺(tái)進(jìn)行免疫肽組學(xué)分析，可從zuì小的樣品材料中進(jìn)行可重復(fù)的識(shí)別和定量。該服務(wù)可以應(yīng)用于大規(guī)模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標(biāo)。

五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù)，MALDI TOF，高效色譜分離技術(shù)，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級(jí)結(jié)構(gòu)分析，到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務(wù)，幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì)。

百泰派克生物科技七大檢測(cè)平臺(tái)

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物質(zhì)譜多組學(xué)優(yōu)質(zhì)服務(wù)商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測(cè)和項(xiàng)目驗(yàn)證等zhuānyè服務(wù)。公司實(shí)驗(yàn)室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導(dǎo)原則，通過CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認(rèn)證，建立了完備的質(zhì)量體系，數(shù)據(jù)冷熱/異地備份，設(shè)備定期計(jì)量/期間核查，軟件審計(jì)追蹤，為客戶提供一體化解決方案和技術(shù)服務(wù)，支持新藥研發(fā)、藥物申報(bào)注冊(cè)和生產(chǎn)放行。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系，zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測(cè)分析服務(wù)；

2.獲國家CNAS實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可，為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務(wù)；

3.業(yè)務(wù)范圍覆蓋dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué)、代謝組學(xué)、生物藥物表征、單細(xì)胞分析、單細(xì)胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學(xué)生物質(zhì)譜整合分析等；

4.七大質(zhì)量控制檢測(cè)平臺(tái)，滿足您一站式服務(wù)需求；

5.服務(wù)3000+企業(yè)，10000+客戶的選擇；

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務(wù)!

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