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化工儀器網(wǎng)>產(chǎn)品展廳>生命科學儀器>分子生物學儀器>其它生物/生化分析儀> DNA CpG甲基化檢測服務


上海基屹生物科技有限公司成立于2013年6月,位于上海周浦時代醫(yī)創(chuàng)園,是一家銳意進取的生物高科技創(chuàng)新型企業(yè),集生物技術研發(fā)、支持和服務為一體,為生命科學領域的科研人員,臨床醫(yī)學人員等提供TA克隆,亞克隆,質(zhì)粒構建,RNAi干擾,miRNA定量,熒光定量PCR,SNP分型,STR檢測,基因編輯,基因敲除,動物造模等相關的技術服務的同時,我們也在不斷摸索,積極研發(fā)自己的試劑產(chǎn)品,如分子,蛋白,細胞等方面的常規(guī)試劑,提供給我們的敬愛的科研工作者,并且我們與國內(nèi)外具有競爭力的耗材儀器廠家達成協(xié)議,保持長期穩(wěn)定的合作,秉承在技術方面提供支持的同時,也同樣提供國內(nèi)外優(yōu)質(zhì)的試劑,耗材,常規(guī)儀器、分析儀器,滿足客戶的不同需求,一站式的服務是我們經(jīng)營的理念,我們將不斷提高技術人員的技術水平,銷售人員的業(yè)務能力,圓滿完成技術服務項目及產(chǎn)品銷售,同時,并為廣大的科研工作者提供可靠的產(chǎn)品和全面的技術服務,用我們過硬的技術,優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品,完善的服務獲得每個客戶信任,支持和厚愛,最后感謝各位的支持和幫助。
公司技術平臺特色:
分子生物學技術服務項目包括
TA克隆,亞克??;質(zhì)粒構建,熒光定量PCR檢測;RNAi干擾;miRNA檢測;SNP分型;STR檢測等;文庫構建;高通量測序。

蛋白組學技術服務項目包括:
蛋白抽提,蛋白純化,WB,Elisa,免疫組化,質(zhì)譜鑒定,N端測序等。

細胞生物學技術服務項目包括:
細胞培養(yǎng),細胞轉(zhuǎn)染;慢病毒包裝;腺病毒包裝; 基因編輯;基因敲除;動物造模等;

代理銷售產(chǎn)品:

儀器類:移液器:Eppendorf移液器、吉爾森移液器,銳寧移液器,大龍移液器,寶予德移液器

離心機:Eppendorf離心機,盧湘儀離心機,蜀科離心機,安亭離心機,ABSON迷你離心機

PCR儀:賽洛捷克PCR儀,ABI普通PCR儀、ABI 7500/ 7500Fast實時定量PCR儀

Bio-rad產(chǎn)品:凝膠成像系統(tǒng)、Bio-rad電源,Bio-rad電泳槽、Bio-rad轉(zhuǎn)移槽,玻璃板

箱體產(chǎn)品:一恒培養(yǎng)箱、一恒干燥箱,一恒恒溫搖床,安泰超凈臺,中科美菱超低溫冰箱

試劑類:

gegenetech醫(yī)藥中間體全線產(chǎn)品:總代理

Abbkine全線產(chǎn)品:上海區(qū)域一級代理

MCE小分子抑制劑,激動劑全線產(chǎn)品:上海區(qū)域一級代理

Bioteke核酸提取及分子試劑全線產(chǎn)品:上海區(qū)域一級代理

Thermo scientific部分產(chǎn)品:上海區(qū)域特約經(jīng)銷商

NEB全線產(chǎn)品:上海區(qū)域特約經(jīng)銷商

耗材類:

Axygen全線產(chǎn)品:全國特約經(jīng)銷商

Corning全線產(chǎn)品:全國特約經(jīng)銷商

BD 耗材產(chǎn)品:上海區(qū)域特約經(jīng)銷商

NEST耗材產(chǎn)品:上海區(qū)域特約經(jīng)銷商








分子,蛋白及細胞技術服務,生物儀器,生物試劑,生物耗材

DNA CpG甲基化檢測

甲基化特異性的PCR(methylation-specific PCR)應用

    DNA甲基化在人的正常發(fā)育、X染色體失活、衰老以及許多人類疾?。ㄈ绨l(fā)育畸形、癌癥、心血管疾病、糖尿病和神經(jīng)心理失調(diào)等)過程中發(fā)揮重要作用,已經(jīng)成為表觀遺傳學和表觀基因組學的重要研究內(nèi)容。

    DNA甲基化是表觀遺傳修飾的主要方式,它不改變DNA的一級結(jié)構,卻在細胞的發(fā)育、基因的表達、及基因組的穩(wěn)定性中起著重要的作用。CpG島的高甲基化是腫瘤中存在的普遍現(xiàn)象,而啟動子CpG島的高甲基化是除突變和缺失外腫瘤中抑癌基因失活的第三種機制。

    因此,基因啟動子甲基化檢測在臨床診斷(如甲基化檢測與低劑量CT相結(jié)合)、藥物敏感性檢測等方面具有很高的應用價值。

甲基化特異性PCR法原理(Methylation-specific PCR,MSP) 

    MSP法的原理是基于DNA甲基轉(zhuǎn)移酶(DNA methyl-transferase, Dnmt)催化S-腺苷甲硫氨酸作為甲基供體,將胞嘧啶轉(zhuǎn)變?yōu)?-甲基胞嘧啶(mC)的一種反應,在真核生物DNA中,5-甲基胞嘧啶是*存在的化學性修飾堿基。CG二核苷酸是zui主要的甲基化位點,它在基因組中呈不均勻分布,存在高甲基化、低甲基化和非甲基化的區(qū)域,在哺乳動物中mC約占C總量的2-7%。一般說來,DNA的甲基化會抑制基因的表達;針對特定區(qū)域設計引物,再進行PCR擴增,甲基化的位點可以被當作一個C/T的SNP來處理;可利用直接測序法來判斷是否CpG位點發(fā)生甲基化。具有方便快捷,靈敏度高的優(yōu)點,是目前較為常用的甲基化檢測方法。

 MSP實驗流程:

1.基因組DNA制備,樣本類型有:組織,血液,細胞,毛發(fā),唾液等。

2.經(jīng)亞硫酸氫鈉處理后,未甲基化的胞嘧啶發(fā)生脫氨基變?yōu)槟蜞奏?,而甲基化的胞嘧啶則不變。

3.DNA修飾后,進行純化及回收。 

4.修飾后的DNA進行PCR擴增。

5.電泳或直接測序檢測

6.實驗報告(包括MSP基因組DNA,PCR產(chǎn)物及電泳照片)

樣品要求
1、基因組DNA(≥1µg),純度(OD:1.9-2.0)
2、若提供的材料為新鮮組織、血液、細胞等生物材料,請?zhí)峁┳銐蛱崛?µg以上基因組DNA的材料量。
3.樣本運輸途中,需要加冰袋,或干冰。

 

 



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