Cygnus technologies, Inc.（賽納斯科技公司）是一家專為基因工程藥廠、研發(fā)部門及檢測部門提供宿主細胞蛋白殘留檢測和生物工藝污染物檢測產(chǎn)品的世界*廠家。生物制品生產(chǎn)過程中存在許多影響產(chǎn)品質(zhì)量的殘留物，諸如特殊重組表達系統(tǒng)中宿主細胞蛋白（Host Cell Protein, HCP）的殘留以及生物制品加工過程中培養(yǎng)物殘留的污染物。塞納斯公司提供了廣泛而靈敏度*的一系列用于檢測生物工程殘留物的產(chǎn)品，在尋求*純化效果和日常質(zhì)量控制過程中使用塞納斯的產(chǎn)品可以方便地得到理想的實驗結(jié)果。

Cygnus F500 Vero Cell ELISA Kit Vero

細胞宿主蛋白免疫檢測試劑盒

英文名稱： Vero Cell HCP ELISA kit

中國俗稱： vero細胞宿主蛋白免疫檢測試劑盒

規(guī)格型號： 96T/盒

保存溫度：2～8℃

Vero Cell HCP ELISA產(chǎn)品介紹：

病毒疫苗或其它治療用蛋白在Vero細胞中表達是商業(yè)用大量生產(chǎn)藥物原料產(chǎn)品的經(jīng)濟簡便方法。Vero Cell HCP ELISA試劑盒開發(fā)使用了不同終端產(chǎn)品和中試樣品，４種不同疫苗產(chǎn)品是從疫苗生產(chǎn)商獲得，包括全病毒疫苗和重組蛋白。Vero Cell HCP ELISA使用具有廣泛反應(yīng)性，強吸附性的多克隆抗體，可以鑒定出所有Vero細胞系中高度保守的HCP。產(chǎn)品靈敏性強（zui低檢測濃度達0.7ng/mL）和具有高度特異性，可以應(yīng)用于任何在Vero細胞中表達的蛋白產(chǎn)物。

檢測原理：Vero Cell檢測是一個雙位點酶聯(lián)免疫檢測。樣本中包含的Vero Cell HCPs蛋白與標記有抗- Vero Cell抗體的辣根過氧化物酶同時反應(yīng)，反應(yīng)發(fā)生在之前涂有一層吸附性抗- Vero Cell蛋白抗體的微量滴定板中進行。免疫反構(gòu)成為夾層式結(jié)構(gòu)：固相抗休-HCP-酶標記抗體。反應(yīng)結(jié)束后清洗微量滴定板去除未結(jié)合反應(yīng)物。添加TMB作用底物反應(yīng)。微量滴定板讀數(shù)器上測定水解物濃度，水解物濃度與Vero Cell HCPs蛋白濃度成比例。用提供的標準液繪制標準曲線，根據(jù)讀數(shù)可以計算出Vero Cell HCPs蛋白含量。

檢測過程：取出所有試劑平衡到室溫→分別移取50μl標準液，對照物和樣品至待測孔→移取100μl anti- Vero Cell:HRP(#F501)至每孔→密封滴定板，搖床室溫溫育2小時，180rpm→清空小孔，用紙吸干殘留液，350μl清洗緩沖液清洗4次→加100μl TMB 作用物(#F005)→室溫靜置30分鐘，不需搖床→加100μl反應(yīng)終止液(#F006)→分光光度計450/650nm讀數(shù)

結(jié)果分析：標準液(0, 2, 8, 25, 75, 200ng/mL)可用于制作標準曲線，標準液濃度相當于免疫反應(yīng)HCP總濃度。根據(jù)測定的小孔中標準液吸光值繪制標準曲線。數(shù)據(jù)分析可以使用計算機選配曲線，例如點到點，三次樣本函數(shù)，或四參數(shù)邏輯曲線。不要使用線性回歸分析修改樣品吸光值，這樣會出現(xiàn)顯著誤差。也可以手工繪圖，Y軸標注吸光值，X軸標注濃度。然后根據(jù)樣品吸光值計算出樣品中HCP濃度。（操作時每一濃度標準液都要滴定到兩個小孔中，以便計算平均分光光度值，樣品也需計算平均吸光值）。

Vero Cell HCP ELISA組成成份：

● Anti- Vero Cell:HRP(辣根過氧化物酶標記)　 1x12mL F501

● Anti- Vero Cell coated微量滴定板　 12x8孔　 F502

● Vero Cell HCP標準液(0, 2, 8, 25, 75, 200ng/mL) 1mL/瓶　 F503

● Stop Solution終止液(0.5N硫磺酸) 　　　 1x12mL　 F006

● TMB (3,3’,5,5’-四甲基聯(lián)苯氨)　 1x12mL　 F005

● Wash Concentrate清洗物(20倍濃縮)　 1x50mL F004