BY-0967 HB KC-4小鼠雜交瘤細胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 BY-0967
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2025/7/27 12:57:06
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HB KC-4小鼠雜交瘤細胞系
HB KC-4小鼠雜交瘤細胞系是單克隆抗體制備與免疫檢測領域的重要工具，以穩(wěn)定分泌特異性抗體、良好的體外培養(yǎng)適應性及廣泛的抗原識別應用為核心特點，在生物標志物檢測、疾病診斷試劑研發(fā)及免疫學基礎研究中發(fā)揮關鍵作用，為單克隆抗體的規(guī)模化應用提供了可靠細胞模型。
來源與背景：該細胞系源于 BALB/c 小鼠脾臟 B 淋巴細胞與骨髓瘤細胞的融合篩選，是雜交瘤技術的典型應用成果。其建立基于抗原免疫后的 B 淋巴細胞與永生化骨髓瘤細胞的融合，通過有限稀釋法克隆獲得，能穩(wěn)定傳承親本細胞的抗體分泌能力與無限增殖特性。所分泌的單克隆抗體可精準識別特定靶抗原（如特定蛋白或病原體抗原），解決了多克隆抗體成分復雜、特異性不足的問題。自建立以來，因抗體性能穩(wěn)定，成為免疫檢測標準化研究的常用細胞系，為各類免疫分析方法的建立提供了核心試劑支撐。
細胞特性：形態(tài)上呈現(xiàn)典型雜交瘤細胞特征，貼壁生長時呈短梭形或多邊形，細胞質(zhì)豐富，細胞核呈橢圓形，核質(zhì)比約 1:2，約 8% 細胞可見雙核結(jié)構，體現(xiàn)融合細胞的形態(tài)特點。核心特性顯著：抗體分泌穩(wěn)定，基礎分泌量達 10-15μg/10?細胞 / 24h，連續(xù)傳代 50 次后分泌能力僅下降 8%，遠優(yōu)于普通雜交瘤細胞系；抗原結(jié)合特異性高，與靶抗原的結(jié)合常數(shù)（Kd）達 10??M 水平，與同源抗原交叉反應率 < 1%，確保檢測結(jié)果的準確性；增殖能力穩(wěn)健，體外培養(yǎng)倍增時間約 52-58 小時，克隆形成率 38%，腹腔接種 BALB/c 小鼠后，12-18 天可形成腹水，腹水中抗體濃度達 3-7mg/ml，便于批量制備。傳代采用常規(guī)方法處理，傳代比例 1:3-1:4，細胞密度達 70% 時需及時傳代，過度密集會導致抗體分泌量下降 18% 左右。
培養(yǎng)條件：適宜采用含 10% 胎牛血清的 DMEM 培養(yǎng)基，添加 1% 雙抗，培養(yǎng)環(huán)境為 37℃、5% CO?飽和濕度。關鍵培養(yǎng)要點：血清選擇關鍵，需使用低內(nèi)毒素胎牛血清（<0.25EU/ml），劣質(zhì)血清會使細胞活力降低 30%，抗體分泌量減少 40%；無血清培養(yǎng)適配，在無血清培養(yǎng)基中添加重組胰島素、轉(zhuǎn)鐵蛋白等成分，可維持細胞生長，抗體純度提升至 95% 以上，簡化純化流程；腹水制備規(guī)范，小鼠腹腔預先注射降植烷 7 天后，接種 1×10?個細胞，15-20 天收集腹水，每只小鼠可獲 3-6ml，腹水經(jīng)純化后抗體活性保持穩(wěn)定。凍存采用含 10% DMSO 的胎牛血清凍存液，程序降溫后液氮保存，復蘇后 48 小時貼壁率達 80%，抗體分泌功能恢復 85% 以上。
檢測鑒定：經(jīng)微生物檢測，無細菌、真菌、支原體污染，符合雜交瘤細胞質(zhì)量標準。抗體亞型鑒定為 IgG1 型，輕鏈為 κ 型；通過 ELISA、Western blot 驗證，能特異性結(jié)合靶抗原，無交叉反應。染色體核型分析顯示染色體數(shù)目 80-90 條，融合親本細胞染色體特征，符合雜交瘤細胞遺傳學特性。功能驗證中，該抗體用于免疫組化檢測時，可清晰定位組織中的靶抗原，陽性信號集中，背景干擾低，證實其應用可靠性。
應用領域：在生物標志物檢測中，基于該細胞系抗體開發(fā)的 ELISA 試劑盒，檢測靈敏度達 0.3ng/ml，線性范圍寬，適用于血清、組織樣本中靶抗原的定量分析；在疾病診斷試劑研發(fā)方面，其抗體構建的免疫熒光探針，可用于病理切片中靶抗原的可視化檢測，診斷符合率達 90%。在免疫學研究中，可用于抗原表位分析，通過抗體與抗原片段的結(jié)合實驗，確定抗原的特異性識別區(qū)域，為蛋白功能研究提供依據(jù)。此外，該細胞系可用于培養(yǎng)工藝優(yōu)化研究，通過懸浮培養(yǎng)參數(shù)調(diào)整，抗體產(chǎn)量可提升 1.5-2.2 倍，降低規(guī)?；a(chǎn)的成本。
與其他雜交瘤細胞系相比，HB KC-4 的優(yōu)勢在于抗體分泌受培養(yǎng)條件影響小、傳代穩(wěn)定性好，在長期培養(yǎng)中抗體特異性保持穩(wěn)定，尤其適合標準化抗體的生產(chǎn)。通過該細胞系的應用，已開發(fā)出多種免疫檢測試劑，廣泛應用于臨床診斷與科研實驗，為免疫檢測技術的發(fā)展及相關疾病的精準診斷提供了重要支持。
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