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BY-1404 RM-S1獼猴皮膚細胞系

具體成交價以合同協(xié)議為準
  • 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
  • 品牌 其他品牌
  • 型號 BY-1404
  • 產(chǎn)地
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
  • 更新時間 2025/7/27 17:39:24
  • 訪問次數(shù) 318
產(chǎn)品標簽

獼猴皮膚細胞RM-S1

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供貨周期 現(xiàn)貨
RM-S1獼猴皮膚細胞系
RM-S1獼猴皮膚細胞系是從健康獼猴皮膚組織分離建立的永生化成纖維細胞系,因保留靈長類皮膚細胞的典型生物學(xué)特征,且對皮膚嗜性病毒具有高度敏感性,成為皮膚病毒研究、創(chuàng)傷修復(fù)機制探索及外用藥物篩選的重要模型。其穩(wěn)定的增殖能力與組織特異性功能,為皮膚疾病研究提供了接近人類生理環(huán)境的實驗平臺。
一、細胞起源與生物學(xué)特性
  1. 來源與建立背景

RM-S1 細胞系源自成年獼猴的背部皮膚組織,通過膠原酶消化法獲得原代成纖維細胞,經(jīng)端粒酶轉(zhuǎn)染永生化處理后建立穩(wěn)定細胞系(“RM” 代表獼猴,“S1” 為皮膚來源的首ge克隆株)。該細胞系保留了皮膚成纖維細胞的表型特征,其建立填bu了靈長類皮膚成纖維細胞模型的空白,為研究人類皮膚疾病提供了更具參考價值的替代模型。
  1. 形態(tài)與生長特征

細胞呈典型成纖維樣形態(tài),貼壁生長時呈長梭形,排列呈放射狀或漩渦狀,胞質(zhì)均勻,細胞核呈橢圓形位于細胞中央。在 37℃、5% CO?條件下,使用含 10% 胎牛血清的 DMEM/F12 培養(yǎng)基,倍增時間約 36-42 小時,傳代比例 1:2 至 1:3,每周換液 2 次以維持細胞密度在 3×10?-1×10?個 /cm2。細胞凍存復(fù)蘇存活率超 90%,連續(xù)傳代 50 次后生長特性無顯著變化,核型分析顯示保留獼猴二倍體特征(2n=42),染色體畸變率<5%,符合實驗細胞質(zhì)量標準。
  1. 功能特性

  • 表型標志物表達:高表達成纖維細胞特異性標志物,如波形蛋白(Vimentin)、α- 平滑肌肌動蛋白(α-SMA),免疫熒光陽性率>95%;同時表達皮膚組織特異性蛋白,如 Ⅰ 型膠原蛋白、纖維連接蛋白,分泌量分別達 20μg/10?細胞 / 天和 15μg/10?細胞 / 天,接近原代皮膚成纖維細胞水平。

  • 病毒敏感性:對皮膚嗜性病毒具有高度敏感性,尤其對猴痘病毒、牛痘病毒的感染效率達 90% 以上,病毒滴度可達 10?-10? PFU/mL,感染后 24 小時即可觀察到典型細胞病變(胞質(zhì)內(nèi)包涵體形成、細胞腫脹);對人乳頭瘤病毒(HPV)的支持能力突出,可維持病毒 episome 形式存在,為皮膚病毒潛伏感染研究提供模型。

  • 創(chuàng)傷修復(fù)相關(guān)功能:在體外劃痕實驗中,細胞遷移速率達 50μm / 小時,可在 48 小時內(nèi)完成劃痕閉合;受損傷刺激后,轉(zhuǎn)化生長因子 -β1(TGF-β1)分泌量提升 3 倍,促進膠原蛋白合成,模擬體內(nèi)創(chuàng)傷修復(fù)過程。

二、核心應(yīng)用領(lǐng)域
  1. 皮膚病毒感染機制研究

  • 病毒入侵與擴散研究:利用 RM-S1 細胞模擬皮膚微環(huán)境,解析猴痘病毒的皮膚傳播機制。通過熒光標記病毒實驗,觀察到病毒通過細胞間連接擴散,依賴 E-cadherin 介導(dǎo)的細胞黏附,阻斷該分子后病毒擴散效率下降 70%,為阻斷皮膚病毒傳播提供靶點。

  • 潛伏感染模型構(gòu)建:因可支持 HPV 持續(xù)感染,可用于研究病毒潛伏機制。例如,HPV16 在 RM-S1 細胞中可穩(wěn)定潛伏 60 天以上,通過檢測 E6/E7 蛋白的低水平表達,發(fā)現(xiàn)其通過表觀遺傳修飾(如 DNA 甲基化)維持潛伏狀態(tài),為開發(fā)潛伏感染干預(yù)藥物提供依據(jù)。

  1. 創(chuàng)傷修復(fù)與皮膚再生研究

  • 修復(fù)機制解析:通過構(gòu)建 RM-S1 細胞與角質(zhì)形成細胞共培養(yǎng)模型,研究皮膚創(chuàng)傷修復(fù)的細胞間相互作用。發(fā)現(xiàn)成纖維細胞分泌的肝細胞生長因子(HGF)可促進角質(zhì)形成細胞遷移,中和 HGF 后修復(fù)效率下降 50%,證實其在表皮再生中的關(guān)鍵作用。

  • 再生材料評估:可用于測試新型生物材料的兼容性與促修復(fù)能力。例如,將膠原蛋白 - 殼聚糖支架與 RM-S1 細胞共培養(yǎng),細胞在支架上的增殖率比單純培養(yǎng)提升 2 倍,支架降解產(chǎn)物可促進 TGF-β1 分泌,為皮膚再生材料優(yōu)化提供數(shù)據(jù)。

  1. 外用藥物篩選與安全性評價

  • 抗病du藥物篩選:基于對猴痘病毒的高敏感性,構(gòu)建 96 孔板藥物篩選模型,日均可檢測 300 種化合物。篩選出的阿xi洛韋衍生物對病毒的 EC??=2μM,且對細胞毒性低(CC??>100μM),動物實驗顯示其可縮短猴痘皮損愈合時間 30%,為皮膚病毒感染治療提供候選藥物。

  • 化妝品與外用制劑安全性測試:替代動物實驗用于皮膚刺激性評估,通過檢測藥物對 RM-S1 細胞活力、乳酸脫氫酶釋放的影響,結(jié)合 IL-6 分泌水平,建立皮膚刺激性評分標準,與兔皮膚刺激實驗結(jié)果一致性達 85%,符合 3R 原則(減少、替代、優(yōu)化)。

三、培養(yǎng)與實驗操作要點
  1. 基礎(chǔ)培養(yǎng)方案

  • 培養(yǎng)基:DMEM/F12(1:1)培養(yǎng)基添加 10% 胎牛血清、1% 非必需氨基酸,pH 維持在 7.2-7.4,可加入 5ng/mL 堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)促進細胞增殖。

  • 傳代流程:當細胞融合度達 80% 時,棄舊培養(yǎng)基,PBS 洗滌 2 次,加入 0.25% yi酶 - EDTA 溶液,37℃孵育 3 分鐘至細胞變圓,加入含血清的培養(yǎng)基終止消化,按 1:3 比例接種至新培養(yǎng)瓶,避免過度融合導(dǎo)致細胞形態(tài)改變。

  • 凍存保護:取對數(shù)生長期細胞,用含 10% DMSO 的wan全培養(yǎng)基重懸至密度 1×10?個 /mL,程序降溫后液氮保存,復(fù)蘇時 37℃水浴快速解凍,直接接種至預(yù)熱培養(yǎng)基(無需離心),傳代 1 次后即可用于實驗。

  1. 病毒感染與創(chuàng)傷模型操作

  • 病毒接種:細胞以 5×10?個 / 孔接種 24 孔板,培養(yǎng) 24 小時至融合度 70%,用無血清培養(yǎng)基稀釋病毒(MOI=0.1),37℃吸附 2 小時,換含 2% 血清的維持液,每日觀察細胞病變,72 小時后通過蝕斑實驗測定病毒滴度。

  • 劃痕實驗:細胞鋪滿 6 孔板后,用 200μL 槍頭垂直劃痕,PBS 洗滌去除脫落細胞,加入含 1% 血清的培養(yǎng)基,0 小時和 48 小時拍照,ImageJ 軟件計算劃痕閉合率。

四、優(yōu)勢與局限性
  • 優(yōu)勢

  1. 組織特異性強:保留皮膚成纖維細胞的功能特征,較通用細胞系(如 Vero)更適合皮膚相關(guān)研究,結(jié)果參考價值更高。

  1. 靈長類模型優(yōu)勢:與人類皮膚細胞的同源性高(基因序列一致性>95%),研究結(jié)果對人類疾病的轉(zhuǎn)化價值優(yōu)于嚙齒類細胞模型。

  1. 功能多樣性:既可用于病毒研究,又能支撐創(chuàng)傷修復(fù)與藥物測試,適用范圍廣泛。

  • 局限性

  1. 增殖能力有限:傳代超過 60 次后增殖速率下降約 20%,需定期復(fù)蘇早期凍存細胞。

  1. 培養(yǎng)成本較高:需添加生長因子維持功能,培養(yǎng)基成本高于普通細胞系。

  1. 病毒譜局限:對非皮膚嗜性病毒(如呼吸道病毒)敏感性低,應(yīng)用范圍受限。

五、研究意義與展望
RM-S1 獼猴皮膚細胞系的建立為皮膚生物學(xué)研究提供了重要工具,其在猴痘病毒等皮膚傳染病研究中的應(yīng)用,為疫情防控提供了關(guān)鍵實驗數(shù)據(jù);在創(chuàng)傷修復(fù)研究中,助力解析皮膚再生機制,推動了再生醫(yī)學(xué)材料的開發(fā)。未來,通過基因編輯技術(shù)引入人源化基因(如 HPV 受體),可進一步提升模型的臨床相關(guān)性;結(jié)合 3D 生物打印技術(shù)構(gòu)建 “皮膚類器官”,有望模擬完整皮膚結(jié)構(gòu),為皮膚疾病研究與藥物開發(fā)提供更接近體內(nèi)環(huán)境的實驗平臺。

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