BY-0101 SK-BR-3 SKBR-3；SKBR3人乳腺癌細(xì)胞系
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- 公司名稱(chēng) 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號(hào) BY-0101
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- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2025/7/28 11:19:59
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SK-BR-3 [SKBR-3；SKBR3]人乳腺癌細(xì)胞系
SK-BR-3 [SKBR-3；SKBR3]人乳腺癌細(xì)胞系是研究 HER2 陽(yáng)性乳腺癌的經(jīng)典模型，因具備ji高的 HER2 表達(dá)水平、明確的激素受體陰性表型及強(qiáng)增殖特性，在 HER2 驅(qū)動(dòng)的乳腺癌發(fā)病機(jī)制、靶向治療響應(yīng)及耐藥機(jī)制研究中應(yīng)用廣泛，為解析 “HER2 過(guò)表達(dá) - 腫瘤惡性進(jìn)展” 的分子邏輯提供了可靠實(shí)驗(yàn)工具。
來(lái)源與背景：該細(xì)胞系于 1970 年從一名 43 歲女性乳腺癌患者的胸膜轉(zhuǎn)移灶中分離建立，屬于 HER2 陽(yáng)性 / ER 陰性 / PR 陰性的三陰性樣 HER2 亞型。與其他 HER2 陽(yáng)性細(xì)胞系（如 BT474）相比，其 HER2 表達(dá)水平更高（約為正常乳腺上皮的 50-100 倍），且激素受體wan全缺失，更貼近臨床 HER2 富集型乳腺癌的特征，尤其適合研究不依賴(lài)激素信號(hào)的 HER2 驅(qū)動(dòng)機(jī)制，填bu了 HER2 陽(yáng)性且激素受體陰性乳腺癌研究模型的空白。其明確的轉(zhuǎn)移灶來(lái)源和長(zhǎng)期傳代后穩(wěn)定的 HER2 表達(dá)特性，使其成為 HER2 靶向治療研究的標(biāo)gan細(xì)胞系，至今仍是國(guó)際上評(píng)估抗 HER2 藥物療效的標(biāo)準(zhǔn)模型之一。
細(xì)胞特性：形態(tài)上呈現(xiàn)典型上皮樣特征，多角形或不規(guī)則形貼壁生長(zhǎng)，細(xì)胞排列呈片狀或島嶼狀，邊界清晰，細(xì)胞質(zhì)豐富，可見(jiàn)較多分泌顆粒，細(xì)胞核大而圓，核仁明顯，核質(zhì)比達(dá) 1:1.3，具有轉(zhuǎn)移灶乳腺癌細(xì)胞的惡性形態(tài)特征。核心特性體現(xiàn)為HER2 高度過(guò)表達(dá)，免疫熒光顯示細(xì)胞膜上 HER2 呈強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)，Western blot 檢測(cè)其蛋白水平是 HER2 低表達(dá)細(xì)胞系（如 MCF-7）的 20-30 倍，且存在 HER2 基因擴(kuò)增（拷貝數(shù)達(dá) 80-100），持續(xù)激活 PI3K/Akt、MAPK 等下游信號(hào)通路，驅(qū)動(dòng)細(xì)胞異常增殖；激素受體陰性特征，雌激素受體（ER）、孕激素受體（PR）均為陰性，不響應(yīng)雌激素刺激，增殖wan全依賴(lài) HER2 及其他生長(zhǎng)因子信號(hào)，模擬臨床 HER2 陽(yáng)性 / 激素受體陰性乳腺癌的治療抵抗基礎(chǔ)；侵襲與成瘤能力，體外 Transwell 實(shí)驗(yàn)中穿透基質(zhì)膜的細(xì)胞數(shù)是 ER 陽(yáng)性 MCF-7 細(xì)胞的 3-4 倍，裸鼠皮下接種后 2 周即可形成腫瘤，成瘤率 100%，且腫瘤生長(zhǎng)速度比 BT474 快 20%-30%。傳代時(shí)采用常規(guī)消化液處理，因貼壁較牢固，需消化 3-5 分鐘，傳代比例 1:3-1:6，連續(xù)傳代 60 次后仍保持 HER2 高表達(dá)，但核型穩(wěn)定性可能略有下降。
培養(yǎng)條件：適宜采用含 10% 胎牛血清的 RPMI-1640 培養(yǎng)基，添加 1% 抗菌混合液以維持細(xì)胞活性。培養(yǎng)環(huán)境需控制在 37℃、5% CO?飽和濕度，每 2-3 天更換一次培養(yǎng)基，細(xì)胞密度維持在 20%-80% 之間，過(guò)度匯合會(huì)導(dǎo)致 HER2 表達(dá)下調(diào) 15%-20%。與其他乳腺癌細(xì)胞系相比，其對(duì) HER2 靶向藥物敏感，培養(yǎng)基中若加入曲妥zhu單抗（10μg/ml），48 小時(shí)內(nèi)即可觀察到細(xì)胞增殖抑制（抑制率達(dá) 50%），傳代時(shí)消化后需用含血清培養(yǎng)基終止反應(yīng)，以保護(hù)細(xì)胞膜上的 HER2 受體，凍存液推薦含 10% DMSO 的胎牛血清，復(fù)蘇后存活率可達(dá) 85% 以上，復(fù)蘇后 24 小時(shí)貼壁率超過(guò) 90%，且 HER2 表達(dá)水平保持穩(wěn)定。
檢測(cè)鑒定：經(jīng)微生物篩查，無(wú)支原體、細(xì)菌、真菌及常見(jiàn)病毒污染，符合實(shí)驗(yàn)細(xì)胞質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)顯示，HER2（CD340）陽(yáng)性率超過(guò) 95%，ER、PR 均為陰性，符合 HER2 陽(yáng)性 / 三陰性交叉表型。染色體核型分析呈現(xiàn)亞三倍體核型，存在 17 號(hào)染色體長(zhǎng)臂擴(kuò)增（包含 HER2 基因）及 8 號(hào)染色體三體等異常，與 50% 的 HER2 陽(yáng)性乳腺癌患者的遺傳學(xué)改變吻合。功能驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)中，經(jīng) HER2 siRNA 處理后，細(xì)胞增殖速率下降 60%，Akt 磷酸化水平降低，證實(shí)其增殖對(duì) HER2 信號(hào)的依賴(lài)性，與臨床 HER2 驅(qū)動(dòng)型乳腺癌的特征一致。
應(yīng)用領(lǐng)域：在發(fā)病機(jī)制研究中，該細(xì)胞系被用于揭示 HER2 過(guò)表達(dá)的致癌機(jī)制，研究發(fā)現(xiàn)其 HER2 通過(guò)形成同源二聚體持續(xù)激活下游信號(hào)，導(dǎo)致細(xì)胞周期檢查點(diǎn)失控，同時(shí)上調(diào) VEGF 等促血管生成因子，促進(jìn)腫瘤血管形成，為理解 HER2 陽(yáng)性乳腺癌的 “增殖 - 血管生成” 協(xié)同機(jī)制提供了關(guān)鍵線索。在靶向治療研究方面，是評(píng)估 HER2 靶向藥物（如曲妥zhu單抗、帕妥珠單抗）療效的常用模型，通過(guò)建立耐藥亞株發(fā)現(xiàn)，HER2 胞外域剪切、PI3K 通路激活突變是其耐藥的主要機(jī)制，為逆轉(zhuǎn)耐藥提供潛在靶點(diǎn)（如聯(lián)合 PI3K 抑制劑）。在藥物篩選領(lǐng)域，適用于篩選新型抗 HER2 藥物，近期研究發(fā)現(xiàn) HER2 降解劑可通過(guò)泛素化途徑降低其蛋白水平，抑制效果比曲妥zhu單抗強(qiáng) 3-5 倍，且對(duì)耐藥株有效。此外，該細(xì)胞系可用于研究腫瘤微環(huán)境的影響，與腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞共培養(yǎng)后，其 HER2 表達(dá)進(jìn)一步上調(diào)，對(duì)曲妥zhu單抗的敏感性下降，證實(shí)微環(huán)境可增強(qiáng) HER2 驅(qū)動(dòng)的耐藥性，為聯(lián)合靶向腫瘤微環(huán)境提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
與其他 HER2 陽(yáng)性細(xì)胞系的對(duì)比顯示，SK-BR-3 在 HER2 表達(dá)水平及對(duì)靶向藥物的初始敏感性上具有顯著優(yōu)勢(shì)，尤其適合研究 HER2 信號(hào)的基礎(chǔ)機(jī)制。其明確的受體表達(dá)譜和穩(wěn)定的生物學(xué)特性，使其在 HER2 陽(yáng)性乳腺癌的精準(zhǔn)治療研究中具有不可替代的價(jià)值，為從實(shí)驗(yàn)室發(fā)現(xiàn)到臨床應(yīng)用的轉(zhuǎn)化提供了重要橋梁。
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