BY-0104 WISH人羊膜細(xì)胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號(hào) BY-0104
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- 更新時(shí)間 2025/7/17 12:29:21
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WISH人羊膜細(xì)胞系
WISH人羊膜細(xì)胞系是上皮細(xì)胞研究領(lǐng)域的重要模型，以典型的上皮表型、穩(wěn)定的增殖特性及低致瘤性為顯著特征，在病毒學(xué)研究、疫苗研發(fā)及上皮細(xì)胞功能探索中應(yīng)用廣泛，為解析上皮細(xì)胞生理功能及病毒與宿主細(xì)胞相互作用提供了可靠實(shí)驗(yàn)工具。
來(lái)源與背景：該細(xì)胞系于 1958 年從正常人類羊膜組織中分離建立，屬于永生化上皮細(xì)胞系。與腫瘤來(lái)源的上皮細(xì)胞系不同，其保留了正常羊膜上皮細(xì)胞的生物學(xué)特性，無(wú)惡性轉(zhuǎn)化特征，填bu了正常上皮細(xì)胞長(zhǎng)期體外研究模型的空白。羊膜組織源自胚胎外胚層，具有保護(hù)胎兒、物質(zhì)交換等功能，因此 WISH 細(xì)胞系不僅是上皮細(xì)胞研究的理想模型，也為胚胎發(fā)育相關(guān)的上皮功能研究提供了du特視角，至今仍是病毒培養(yǎng)及疫苗生產(chǎn)領(lǐng)域的經(jīng)典細(xì)胞系之一。
細(xì)胞特性：形態(tài)上呈現(xiàn)典型的上皮樣特征，多為多邊形或不規(guī)則四邊形，排列緊密呈鋪路石樣貼壁生長(zhǎng)，細(xì)胞間連接緊密，邊界清晰，細(xì)胞質(zhì)均勻，細(xì)胞核呈圓形或橢圓形，位于細(xì)胞中央，核仁不明顯，核質(zhì)比約 1:2.5，具有正常上皮細(xì)胞的形態(tài)特征。核心特性體現(xiàn)為上皮標(biāo)志物穩(wěn)定表達(dá)，高表達(dá)角蛋白（CK18、CK19）、上皮鈣粘蛋白（E - 鈣粘蛋白），不表達(dá)間充質(zhì)標(biāo)志物（如波形蛋白），符合上皮細(xì)胞的分子表型；低致瘤性與高增殖穩(wěn)定性，體外培養(yǎng)時(shí)細(xì)胞倍增時(shí)間約 24-36 小時(shí)，克隆形成率約 30%，裸鼠皮下接種無(wú)腫瘤形成，保持正常細(xì)胞的生長(zhǎng)調(diào)控特征；病毒易感性，對(duì)多種病毒（如脊髓灰質(zhì)炎病毒、風(fēng)疹病毒）具有高度敏感性，病毒感染后可出現(xiàn)典型的細(xì)胞病變效應(yīng)，這一特性使其成為病毒培養(yǎng)的理想宿主細(xì)胞。傳代時(shí)采用常規(guī)消化液處理，因細(xì)胞貼壁較牢固，需消化 2-3 分鐘，傳代比例 1:2-1:4，連續(xù)傳代 50 次后仍保持上皮表型及增殖穩(wěn)定性，但部分上皮標(biāo)志物表達(dá)可能略有下降。
培養(yǎng)條件：適宜采用含 10% 胎牛血清的 MEM 培養(yǎng)基，添加 1% 非必需氨基酸、1mM 丙酮酸鈉及 1% 抗菌混合液以維持細(xì)胞活性。培養(yǎng)環(huán)境需控制在 37℃、5% CO?飽和濕度，每 2-3 天更換一次培養(yǎng)基，細(xì)胞密度維持在 30%-70% 之間，過(guò)度匯合會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞接觸抑制明顯，增殖速率下降。與腫瘤細(xì)胞系相比，其對(duì)培養(yǎng)條件更敏感，血清質(zhì)量不佳會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞形態(tài)改變、連接松散，傳代時(shí)消化后需用含血清培養(yǎng)基終止反應(yīng)，以保護(hù)細(xì)胞間連接結(jié)構(gòu)，凍存液推薦含 10% DMSO 的胎牛血清，復(fù)蘇后存活率可達(dá) 80% 以上，復(fù)蘇后 24 小時(shí)貼壁率超過(guò) 90%，細(xì)胞形態(tài)及功能恢復(fù)正常。
檢測(cè)鑒定：經(jīng)微生物篩查，無(wú)支原體、細(xì)菌、真菌及常見(jiàn)病毒污染，符合實(shí)驗(yàn)細(xì)胞質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。免疫熒光檢測(cè)顯示，角蛋白（CK18、CK19）陽(yáng)性率均超過(guò) 95%，E - 鈣粘蛋白呈細(xì)胞膜陽(yáng)性表達(dá)，波形蛋白陰性，符合上皮細(xì)胞表型。染色體核型分析呈現(xiàn)正常二倍體核型，未見(jiàn)明顯染色體異常，與原代羊膜上皮細(xì)胞的遺傳學(xué)特征一致，證實(shí)其未發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化。功能驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)中，接種脊髓灰質(zhì)炎病毒后 48 小時(shí)可觀察到明顯的細(xì)胞病變（如細(xì)胞圓縮、脫落），病毒滴度可達(dá) 10? PFU/ml，證實(shí)其病毒易感特性。
應(yīng)用領(lǐng)域：在病毒學(xué)研究中，該細(xì)胞系被廣泛用于病毒分離與鑒定，可有效培養(yǎng)脊髓灰質(zhì)炎病毒、風(fēng)疹病毒、腺病毒等多種病毒，通過(guò)觀察細(xì)胞病變效應(yīng)確定病毒感染及增殖情況，為病毒生物學(xué)特性研究提供了理想的宿主模型。在疫苗研發(fā)領(lǐng)域，是脊髓灰質(zhì)炎疫苗、風(fēng)疹疫苗生產(chǎn)的常用細(xì)胞基質(zhì)，其低致瘤性及高病毒產(chǎn)量使其符合疫苗生產(chǎn)的安全標(biāo)準(zhǔn)，通過(guò)優(yōu)化培養(yǎng)條件可提高病毒滴度，降低疫苗生產(chǎn)成本。在上皮細(xì)胞功能研究方面，用于探索上皮細(xì)胞的屏障功能及物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制，研究發(fā)現(xiàn)其表達(dá)多種緊密連接蛋白（如 occludin、claudin），形成完整的上皮屏障，可模擬體內(nèi)上皮組織的屏障功能，為炎癥性疾病中上皮屏障損傷機(jī)制研究提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。此外，該細(xì)胞系可用于藥物毒性評(píng)估，通過(guò)檢測(cè)藥物對(duì)細(xì)胞活力、上皮標(biāo)志物表達(dá)及屏障功能的影響，評(píng)估藥物的潛在上皮毒性，為新藥安全性評(píng)價(jià)提供重要參考。
與其他上皮細(xì)胞系（如 HeLa）相比，WISH 細(xì)胞系的優(yōu)勢(shì)在于其正常上皮表型及低致瘤性，能更真實(shí)地模擬體內(nèi)正常上皮細(xì)胞的生理功能，尤其適合研究上皮細(xì)胞的基礎(chǔ)生物學(xué)特性及病毒與正常上皮細(xì)胞的相互作用。其在疫苗研發(fā)中的長(zhǎng)期應(yīng)用歷史及可靠的安全性，使其成為生物制品生產(chǎn)領(lǐng)域的重要細(xì)胞模型，持續(xù)為病毒學(xué)研究及疫苗開(kāi)發(fā)提供關(guān)鍵支撐。
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