BY-0690 EL4小鼠淋巴瘤細(xì)胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號(hào) BY-0690
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- 更新時(shí)間 2025/8/1 12:29:27
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EL4小鼠淋巴瘤細(xì)胞系
EL4小鼠淋巴瘤細(xì)胞系是研究 T 淋巴細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化及免疫功能調(diào)控的經(jīng)典模型，以 T 細(xì)胞表型典型性、對(duì)絲裂原的高反應(yīng)性及腫瘤發(fā)生模擬性為核心優(yōu)勢(shì)，在 T 細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)、淋巴瘤發(fā)病機(jī)制及免疫調(diào)節(jié)研究中應(yīng)用廣泛，為解析 T 細(xì)胞淋巴瘤的病理特征提供了可靠實(shí)驗(yàn)載體。
來(lái)源與背景：該細(xì)胞系源自 1950 年代建立的 C57BL/6 小鼠自發(fā)性胸腺淋巴瘤，是首ge被證實(shí)具有成熟 T 細(xì)胞表型的淋巴瘤細(xì)胞系。臨床 T 細(xì)胞淋巴瘤約占非霍奇金淋巴瘤的 15%，而 EL4 細(xì)胞系接種同源小鼠后可形成胸腺淋巴瘤，與人類 T 細(xì)胞淋巴瘤的病理進(jìn)展高度相似。其建立填bu了 T 細(xì)胞淋巴瘤體外研究模型的空白，至今仍是 T 細(xì)胞生物學(xué)及淋巴瘤發(fā)生機(jī)制研究的基準(zhǔn)細(xì)胞系，全球相關(guān)研究文獻(xiàn)超 4000 篇。
細(xì)胞特性：形態(tài)上呈圓形或橢圓形，直徑約 10-12μm，以懸浮生長(zhǎng)為主，部分細(xì)胞輕微貼壁，呈單個(gè)或松散簇狀分布，細(xì)胞質(zhì)豐富，含少量嗜天青顆粒，細(xì)胞核大而圓，核質(zhì)比約 1:2，8% 細(xì)胞可見(jiàn)核分裂相，體現(xiàn) T 淋巴瘤細(xì)胞的惡性特征。核心特性突出：T 細(xì)胞表型典型，表達(dá) CD3、CD4、CD8 等 T 細(xì)胞表面標(biāo)志物，其中 CD4?CD8?雙陽(yáng)性表型與胸腺皮質(zhì) T 細(xì)胞特性一致；絲裂原反應(yīng)敏感，刀豆蛋白 A（ConA）刺激后 24 小時(shí)內(nèi) IL-2 分泌量達(dá) 350pg/ml，細(xì)胞增殖速率提升 2.3 倍，wan美模擬 T 細(xì)胞活化過(guò)程；成瘤能力穩(wěn)定，皮下接種 C57BL/6 小鼠成瘤率 100%，3 周內(nèi)形成直徑 1.2cm 的淋巴瘤，腫瘤組織病理形態(tài)與人類外周 T 細(xì)胞淋巴瘤相似。傳代時(shí)無(wú)需消化處理，直接收集細(xì)胞懸液按 1:5 比例稀釋接種，細(xì)胞密度維持在 2×10?-1×10?個(gè) /ml，過(guò)高會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞活力下降 25%。
培養(yǎng)條件：基礎(chǔ)培養(yǎng)采用含 10% 胎牛血清的 RPMI-1640 培養(yǎng)基，添加 1% 雙抗，37℃、5% CO?飽和濕度環(huán)境。關(guān)鍵培養(yǎng)要點(diǎn)：血清質(zhì)量要求，需使用低內(nèi)毒素血清（<0.1EU/ml），否則會(huì)非特異性激活 T 細(xì)胞信號(hào)通路，導(dǎo)致 IL-2 基礎(chǔ)分泌量升高 3 倍；活化狀態(tài)調(diào)控，實(shí)驗(yàn)需區(qū)分靜息與活化狀態(tài)時(shí)的細(xì)胞特性，ConA 刺激需控制濃度（最佳濃度 2μg/ml），超過(guò) 5μg/ml 會(huì)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；污染防控，因懸浮生長(zhǎng)特性，需每周檢測(cè)支原體，污染后采用專用清除試劑處理，恢復(fù)率可達(dá) 90%。凍存采用含 10% DMSO 和 20% 胎牛血清的凍存液，程序降溫后液氮保存，復(fù)蘇后 48 小時(shí)存活率達(dá) 90%，T 細(xì)胞表型不變。
檢測(cè)鑒定：微生物檢測(cè)無(wú)細(xì)菌、真菌及支原體污染，符合實(shí)驗(yàn)細(xì)胞標(biāo)準(zhǔn)。流式細(xì)胞術(shù)分析顯示 CD3?、CD4?、CD8?、TCRαβ?，證實(shí)成熟 T 細(xì)胞表型；細(xì)胞因子檢測(cè)證實(shí) ConA 刺激后 IL-2、IFN-γ 分泌量顯著升高，驗(yàn)證 T 細(xì)胞活化功能。功能驗(yàn)證中，ConA 處理后細(xì)胞周期分析顯示 S 期比例從 15% 升至 45%，Western blot 證實(shí) ERK1/2 和 NF-κB 通路磷酸化水平升高 5 倍，證實(shí) T 細(xì)胞活化信號(hào)通路完整。染色體核型為近二倍體（眾數(shù) 40-42），存在 6 號(hào)染色體長(zhǎng)臂缺失（含 T 細(xì)胞受體調(diào)控區(qū)域），與臨床 T 細(xì)胞淋巴瘤遺傳學(xué)改變部分吻合。
應(yīng)用領(lǐng)域：在 T 細(xì)胞活化機(jī)制研究中，通過(guò)該細(xì)胞系發(fā)現(xiàn)鈣調(diào)磷酸酶 - NFAT 通路是 IL-2 表達(dá)的關(guān)鍵調(diào)控軸，環(huán)bao素 A 可抑制 NFAT 核轉(zhuǎn)位，使 IL-2 分泌量下降 80%，為免疫抑制劑的作用機(jī)制提供直接證據(jù)。在淋巴瘤發(fā)病研究中，利用其建立的移植瘤模型，發(fā)現(xiàn) Notch1 基因突變可促進(jìn)細(xì)胞惡性增殖，沉默 Notch1 后腫瘤體積縮小 60%，揭示 T 細(xì)胞淋巴瘤的驅(qū)動(dòng)機(jī)制。在免疫調(diào)節(jié)研究中，作為 T 細(xì)胞 - APC 相互作用模型，發(fā)現(xiàn)樹(shù)突狀細(xì)胞分泌的 IL-12 可增強(qiáng) EL4 細(xì)胞的 IFN-γ 分泌能力 3.5 倍，闡明抗原提呈細(xì)胞對(duì) T 細(xì)胞功能的調(diào)控作用。此外，該細(xì)胞系可用于腫瘤免疫逃逸研究，發(fā)現(xiàn)其高表達(dá) PD-L1（約 40% 陽(yáng)性率），阻斷 PD-1/PD-L1 相互作用可增強(qiáng) T 細(xì)胞對(duì) EL4 細(xì)胞的殺傷活性 2.8 倍。
與其他 T 細(xì)胞淋巴瘤模型相比，EL4 細(xì)胞系的優(yōu)勢(shì)在于其 T 細(xì)胞表型的典型性、活化信號(hào)通路的完整性及同源小鼠模型的成瘤穩(wěn)定性，絲裂原反應(yīng)靈敏度遠(yuǎn)超 Jurkat 細(xì)胞（約 2 倍）。通過(guò)該細(xì)胞系的研究，已闡明 18 個(gè) T 細(xì)胞活化相關(guān)基因，推動(dòng) 4 種 T 細(xì)胞淋巴瘤靶向藥物進(jìn)入臨床前試驗(yàn)，為 T 細(xì)胞生物學(xué)及淋巴瘤研究提供了重要實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
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