BY-1265 RNEEC/HL-012大鼠正常食管上皮細(xì)胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號(hào) BY-1265
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2025/7/24 10:15:00
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細(xì)胞株和菌株、胎牛血清、標(biāo)準(zhǔn)品和對(duì)照品、生化試劑、ELISA試劑盒、抗體和抗原、細(xì)胞因子、技術(shù)服務(wù)、實(shí)驗(yàn)耗材和消耗品、儀器設(shè)備。
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RNEEC/HL-012大鼠正常食管上皮細(xì)胞系
RNEEC/HL-012大鼠正常食管上皮細(xì)胞系作為源自大鼠食管上段黏膜組織的正常上皮細(xì)胞模型,因具備食管上段上皮te有的分化表型及穩(wěn)態(tài)維持能力,在食管黏膜屏障穩(wěn)態(tài)調(diào)控、食管癌多區(qū)域癌變差異及食管上段黏膜損傷修復(fù)研究中具有du特jia值,成為探究食管上段上皮生理功能的重要實(shí)驗(yàn)工具。
細(xì)胞特性與來源背景:該細(xì)胞系源自大鼠食管上段黏膜組織,經(jīng)原代培養(yǎng)和克隆化篩選獲得。細(xì)胞形態(tài)呈多邊形,邊界清晰,較 RNEEC/HL-011 細(xì)胞略?。ㄖ睆郊s 16-20μm),胞質(zhì)呈弱嗜酸性,可見散在的透明角質(zhì)顆粒,細(xì)胞核呈橢圓形,核仁不明顯。生長(zhǎng)方式為貼壁生長(zhǎng),呈單層緊密排列,接觸抑制現(xiàn)象顯著,傳代后 24 小時(shí)貼壁率達(dá) 90%。核心參數(shù)表現(xiàn)出食管上段上皮特征:倍增時(shí)間約 65 小時(shí),較 RNEEC/HL-011 長(zhǎng) 5 小時(shí),連續(xù)傳代 12 次后仍保持穩(wěn)定特性;表面標(biāo)志物表達(dá)具有區(qū)域特異性,細(xì)胞角蛋白 13(CK13)陽性率達(dá) 96%,細(xì)胞角蛋白 4(CK4)陽性率 94%,EpCAM 陽性率 91%,Ki67 基礎(chǔ)陽性率低于 5%,顯著低于 RNEEC/HL-011;具有正常二倍體核型(42 條染色體),無染色體異常;細(xì)胞間連接更為緊密,跨上皮電阻值達(dá) 420Ω?cm2,較 RNEEC/HL-011 高 20%,緊密連接蛋白 claudin-4 表達(dá)量增加 30%;無微生物污染,細(xì)胞純度達(dá) 97%,保障實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠性。
科研應(yīng)用價(jià)值:在食管黏膜穩(wěn)態(tài)研究中,RNEEC/HL-012 細(xì)胞經(jīng)機(jī)械拉伸刺激后,角質(zhì)形成細(xì)胞生長(zhǎng)因子(KGF)表達(dá)量增加 4.2 倍,絲聚蛋白(Filaggrin)分泌量提升 3.8 倍,較 RNEEC/HL-011 的響應(yīng)更為顯著,可模擬食管上段應(yīng)對(duì)機(jī)械摩擦的穩(wěn)態(tài)調(diào)節(jié)機(jī)制,為解析食管不同區(qū)域的屏障適應(yīng)差異提供對(duì)比模型。
食管癌區(qū)域差異研究方面,該細(xì)胞經(jīng)亞硝胺處理后,p53 基因突變率為 25%,顯著低于 RNEEC/HL-011 的 38%,但細(xì)胞周期蛋白 D1 表達(dá)量增加 52%,呈現(xiàn)du特的癌變前分子特征,可用于探究食管上段與中段癌變機(jī)制的區(qū)域差異。
在反流性食管炎研究中,該細(xì)胞在酸刺激(pH=4.0)下,跨上皮電阻值下降 28%,顯著低于 RNEEC/HL-011 的 40%,IL-8 分泌量增加 2.3 倍,表現(xiàn)出更強(qiáng)的酸耐受能力,適用于評(píng)估食管上段黏膜保護(hù)藥物的特異性療效。此外,該細(xì)胞與迷走神經(jīng)節(jié)細(xì)胞共培養(yǎng)時(shí),神經(jīng)肽 Y(NPY)分泌量增加 3.1 倍,可用于探究神經(jīng) - 上皮交互作用在食管上段功能調(diào)節(jié)中的作用。
培養(yǎng)與保存規(guī)范:推薦使用含 10% 胎牛血清的 Keratinocyte-SFM 培養(yǎng)基,添加 0.08ng/mL EGF(濃度低于 RNEEC/HL-011)及 1% 抗生素混合液,培養(yǎng)環(huán)境為 37℃、5% CO?飽和濕度培養(yǎng)箱。培養(yǎng)基每 3 天更換一次,以維持其緩慢增殖特性。傳代時(shí),用 PBS 沖洗 2 次,加入專用細(xì)胞解離液,37℃孵育 10-12 分鐘(較 RNEEC/HL-011 延長(zhǎng) 2 分鐘),輕輕吹打使細(xì)胞脫落,傳代比例 1:2,每 6-7 天傳代一次,避免頻繁傳代導(dǎo)致分化異常。
凍存液采用培養(yǎng)基 + 10% DMSO+20% 胎牛血清混合液,細(xì)胞濃度調(diào)整為 1.5×10?個(gè) /ml(低于 RNEEC/HL-011),經(jīng)程序降溫后液氮保存,復(fù)蘇存活率達(dá) 83% 以上,3 代內(nèi)恢復(fù)正常功能。運(yùn)輸采用干冰冷凍或培養(yǎng)瓶活細(xì)胞運(yùn)輸,收到細(xì)胞后靜置 24 小時(shí),更換培養(yǎng)基后觀察形態(tài),確認(rèn)無異常后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。該細(xì)胞系僅限科研使用,操作需符合生物安全規(guī)范。
RNEEC/HL-012 大鼠正常食管上皮細(xì)胞系以其du特的食管上段上皮表型、更強(qiáng)的屏障穩(wěn)定性及區(qū)域特異性響應(yīng)特征,在食管區(qū)域功能差異研究中具有不可替代的價(jià)值,為系統(tǒng)解析食管上皮的區(qū)域特異性功能及相關(guān)疾病的區(qū)域差異機(jī)制提供了可靠模型。
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