BY-0570 P815小鼠肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號(hào) BY-0570
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- 更新時(shí)間 2025/8/3 13:54:10
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P815小鼠肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞系
P815小鼠肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞系源自 DBA/2 小鼠的自發(fā)性肥大細(xì)胞瘤，因保留肥大細(xì)胞的核心生物學(xué)特性 —— 高表達(dá) FcεRI 受體且能釋放炎癥介質(zhì)，成為研究過(guò)敏反應(yīng)、腫瘤免疫及細(xì)胞毒性的經(jīng)典模型。其du特的雙重屬性 —— 兼具腫瘤細(xì)胞的增殖能力與肥大細(xì)胞的功能特征，使其在基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究中占據(jù)重要地位。
顯微鏡下，P815 細(xì)胞以貼壁生長(zhǎng)為主，部分呈半懸浮狀態(tài)，形態(tài)多為多邊形或短梭形，宛如貼附在培養(yǎng)皿上的 “炎癥觸發(fā)器”。細(xì)胞直徑約 15-20 微米，胞質(zhì)豐富，內(nèi)含大量異染性顆粒 —— 這些顆粒是肝素、組胺等炎癥介質(zhì)的儲(chǔ)存庫(kù)，經(jīng)甲苯胺藍(lán)染色后呈紫紅色，清晰可辨。細(xì)胞核大而圓，位于細(xì)胞中央，核仁明顯，染色質(zhì)呈細(xì)顆粒狀，顯示出活躍的增殖活性。細(xì)胞增殖速度較快，倍增時(shí)間約 24-36 小時(shí)，當(dāng)融合度達(dá)到 70%-80% 時(shí)需傳代，傳代時(shí)用溫和的吹打即可使部分細(xì)胞脫落，剩余貼壁細(xì)胞可通過(guò)短時(shí)yi酶處理分離，按 1:3-1:5 比例接種，連續(xù)培養(yǎng) 50 代仍能保持穩(wěn)定的表型。
培養(yǎng) P815 細(xì)胞需精準(zhǔn)調(diào)控生長(zhǎng)環(huán)境?；A(chǔ)培養(yǎng)基shou選 RPMI 1640，其含有的氨基酸和維生素可滿足細(xì)胞代謝需求；添加 10% 熱滅活胎牛血清提供生長(zhǎng)因子，其中血清中的干細(xì)胞因子（SCF）對(duì)維持肥大細(xì)胞特性至關(guān)重要。培養(yǎng)箱需維持 37℃、5% CO?的恒定環(huán)境，pH 值控制在 7.2-7.4 之間，可通過(guò)培養(yǎng)基中的酚紅指示劑監(jiān)測(cè)。值得注意的是，該細(xì)胞對(duì)血清質(zhì)量敏感，劣質(zhì)血清會(huì)導(dǎo)致顆粒分泌功能下降，因此每批血清需經(jīng)功能性驗(yàn)證 —— 即檢測(cè)細(xì)胞在 IgE 刺激下的組胺釋放率，確保其生物學(xué)活性。
P815 細(xì)胞的核心價(jià)值體現(xiàn)在免疫反應(yīng)研究領(lǐng)域，其高表達(dá)的 FcεRI 受體是 IgE 介導(dǎo)的過(guò)敏反應(yīng)的關(guān)鍵分子。當(dāng)細(xì)胞與抗 IgE 抗體或特異性抗原 - IgE 復(fù)合物結(jié)合后，F(xiàn)cεRI 受體發(fā)生交聯(lián)，可觸發(fā)胞內(nèi)信號(hào)通路（如 Syk 激酶激活），導(dǎo)致顆粒胞吐，釋放組胺、白三烯等炎癥介質(zhì)。通過(guò)檢測(cè)組胺釋放量或 β- 己糖胺酶活性（顆粒釋放的替代指標(biāo)），可量化過(guò)敏反應(yīng)的強(qiáng)度。例如，在研究過(guò)敏介質(zhì)抑制劑時(shí)，將不同濃度藥物與細(xì)胞共孵育，再用 IgE 刺激，通過(guò)對(duì)比組胺釋放率，可快速篩選出高效的抗過(guò)敏候選化合物。
在腫瘤免疫研究中，P815 細(xì)胞是檢測(cè)細(xì)胞毒性 T 淋巴細(xì)胞（CTL）活性的經(jīng)典靶標(biāo)。其對(duì) CTL 介導(dǎo)的殺傷高度敏感，通過(guò)?1Cr 釋放實(shí)驗(yàn)可精準(zhǔn)量化殺傷效率 —— 將標(biāo)記?1Cr 的 P815 細(xì)胞與活化的 CTL 共培養(yǎng)，上清液中?1Cr 的放射活性與殺傷率呈正相關(guān)。這一模型廣泛用于研究 CTL 的活化機(jī)制，例如，發(fā)現(xiàn) T 細(xì)胞受體（TCR）與 P815 細(xì)胞表面抗原肽 - MHC 復(fù)合物的結(jié)合是啟動(dòng)殺傷的關(guān)鍵，而共刺激分子（如 CD80/CD86）的相互作用可增強(qiáng)殺傷效率達(dá) 2-3 倍。
在腫瘤生物學(xué)研究中，P815 細(xì)胞系可用于探索肥大細(xì)胞瘤的增殖與轉(zhuǎn)移機(jī)制。其高侵襲性特征 —— 通過(guò) Transwell 實(shí)驗(yàn)可觀察到細(xì)胞穿過(guò)基底膜的能力較強(qiáng)，與基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-9）的高表達(dá)相關(guān)。研究發(fā)現(xiàn)，抑制 MMP-9 活性可顯著降低細(xì)胞的侵襲能力，這一機(jī)制為開發(fā)抗肥大細(xì)胞瘤轉(zhuǎn)移藥物提供了靶點(diǎn)。同時(shí)，該細(xì)胞系對(duì)放療敏感，經(jīng) γ 射線照射后，細(xì)胞凋亡率隨劑量增加而升高，可通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè) Annexin V/PI 雙陽(yáng)性細(xì)胞比例，為研究放療誘導(dǎo)的腫瘤細(xì)胞死亡機(jī)制提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
在疫苗開發(fā)領(lǐng)域，P815 細(xì)胞可作為腫瘤疫苗的載體細(xì)胞。通過(guò)基因工程手段將腫瘤相關(guān)抗原（如熱休克蛋白）導(dǎo)入細(xì)胞，經(jīng)照射滅活后制成疫苗，接種小鼠可誘導(dǎo)特異性抗腫瘤免疫。實(shí)驗(yàn)顯示，該疫苗可使荷瘤小鼠的腫瘤生長(zhǎng)延遲 5-7 天，脾臟中 IFN-γ 分泌型 T 細(xì)胞比例增加 2-3 倍，證明其能有效激活細(xì)胞免疫應(yīng)答。
前沿研究中，P815 細(xì)胞系的應(yīng)用持續(xù)拓展。在類器官構(gòu)建中，將其與成纖維細(xì)胞共培養(yǎng)，可形成三維腫瘤模型，更真實(shí)地模擬體內(nèi)腫瘤微環(huán)境，用于研究肥大細(xì)胞瘤與基質(zhì)細(xì)胞的相互作用；在單細(xì)胞測(cè)序研究中，解析其在 IgE 刺激下的基因表達(dá)變化，發(fā)現(xiàn)了調(diào)控顆粒釋放的新基因，為開發(fā)新型抗過(guò)敏藥物提供了線索；在基因編輯領(lǐng)域，利用 CRISPR 技術(shù)敲除 FcεRI 受體基因，可構(gòu)建功能缺失模型，深入探究該受體在免疫反應(yīng)中的非冗余作用。
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