以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時(shí)內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

白靈菇c-mer原癌基因酪激抗體Human GDF2(Growth/differentiation factor 2) ELISA Kit人甘露糖(Mannose)免疫試劑盒

假單胞菌Ⅱ型膠原α1蛋白/軟骨鈣抗體Human OSMR(Oncostatin-M-specific receptor subunit beta) ELISA Kit人甘露聚糖結(jié)合凝集絲肽1(C4/C2 RA反應(yīng)因子的激活因子)(MASP1)免疫試劑盒

殼囊孢屬Ⅲ型膠原蛋白/膠原蛋白3/3型膠原蛋白抗體Human OIT3(Oncoprotein-induced transcript 3 protein) ELISA Kit人甘膽(CG)免疫試劑盒

大腸埃希菌IV型膠原蛋白/4型膠原蛋白/膠原蛋白4抗體Human DEFA5(Defensin Alpha 5, Paneth Cell Specific) ELISA Kit人甘免疫試劑盒

大腸埃希氏菌前列腺氧化環(huán)化1抗體Human CTSG(Cathepsin G) ELISA Kit人干因子受體(SCFR)免疫試劑盒

匍枝根霉(黑根霉)Ⅰ型膠原抗體Human PRKAB1(5′-AMP-activated protein kinase subunit beta-1) ELISA Kit人干因子/肥大生長因子(SCF/MGF)免疫試劑盒

解烴棒桿菌Ⅴ型膠原抗體Human GNRHR(Gonadotropin-releasing hormone receptor) ELISA Kit人干擾誘導(dǎo)跨膜蛋白1(IFITM1/CD225/IFI17)免疫試劑盒

草假單胞菌Ⅹ型膠原抗體Human MCAM(Cell surface glycoprotein MUC18) ELISA Kit人干擾誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)免疫試劑盒

釀酒酵母周期F抗體Human DEFA1(Defensin Alpha 1, Neutrophil) ELISA Kit人干擾誘導(dǎo)T趨化因子(ITAC/CXCL11)免疫試劑盒

橙色土地桿菌泛連接CUL7蛋白抗體Human CCR7(C-C chemokine receptor type 7) ELISA Kit人干擾活化基因205(Ifi205)免疫試劑盒

球毛殼甲狀腺受體相互作用蛋白15抗體Human CSNK2B(Casein kinase II subunit beta) ELISA Kit人干擾調(diào)節(jié)因子8(IRF8)免疫試劑盒

大腸埃希氏菌信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白亞基6抗體Human MSTN(Growth/differentiation factor 8) ELISA Kit人干擾調(diào)節(jié)因子3(IRF3)免疫試劑盒

香菇信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白亞基4抗體Human SFRP4(Secreted frizzled-related protein 4) ELISA Kit人干擾a-抗體(Anti-IFN-ab)免疫試劑盒

枯草芽胞桿菌心肌肌鈣蛋白抗體Human SLC25A20(Mitochondrial carnitine/acylcarnitine carrier protein) ELISA Kit人鈣轉(zhuǎn)運(yùn)ATP2C型成員1(ATP2C1)免疫試劑盒

淺金鏈霉菌CAP1抗體Human ETFβ(Electron transfer flavoprotein subunit beta) ELISA Kit人鈣粘蛋白相關(guān)的神經(jīng)受體1(CNR-1)免疫試劑盒

米曲霉粒-巨噬集落激因子3抗體Human NEBL(Nebulette) ELISA Kit人鈣依賴性胞漿型磷脂A2(iPLA2)免疫試劑盒

柱狀田頭菇（茶樹菇、楊樹菇）Agrocybe│cylindracae 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.5%羥基茜草

: IFFI2335資源名稱: 黑曲霉 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%細(xì)辛脂

豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌Actinobacillus│Pleuropneumoniae 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品古倫賓
αvβ3和αvβ5受體抑制劑Pseudomonas extremaustralis 3,6-二溴-9-乙基咔唑色P450亞型3AElisa

淺白隱球酵母 2-羥基-5-三氟組蛋白乙?；疎lisa

釀酒酵母 2-氨基-4-乙基吡啶微囊藻Elisa

彩色豆馬勃 2-硝基-4-吡啶甲酸甲硫氨酸腦啡肽Elisa

乙型溶血性鏈球 甘氨酰-L-苯氨酸Runt相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子2Elisa

蘇云金芽孢桿 5,5-二甲基-1-吡咯啉-N-氧化物Coll2-1NO2Elisa

溶桿 (3-氟苯甲酰)乙酸乙酯纖維蛋白3-3Elisa

赭綠青霉 3-氟-4-甲氧基芐基溴α7煙堿型乙酰受體抗體Elisa

花臉蘑 10-羥基苯并[ h] 喹啉環(huán)指蛋白5抗體Elisa

釀酒酵母 DL-叔亮氨酸2,5寡腺苷酸合成Elisa

哈茨木霉 雙甲脒輪狀病IgA抗體Elisa

Melanconis  雙甲脒血小板衍生生長因子Elisa

鹽地喜鹽芽孢桿 阿伐那非成纖維生長因子Elisa

異常畢赤酵母 多肽試劑TCTUElisa

釀酒酵母 N'-Cbz-L-鳥氨酸UDP葡萄糖酸轉(zhuǎn)移2家族多肽B1Elisa