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化工儀器網(wǎng)>產(chǎn)品展廳>生命科學(xué)儀器>分子生物學(xué)儀器>其它生物/生化分析儀> siRNA干擾檢測


上?;偕锟萍加邢薰境闪⒂?013年6月,位于上海周浦時(shí)代醫(yī)創(chuàng)園,是一家銳意進(jìn)取的生物高科技創(chuàng)新型企業(yè),集生物技術(shù)研發(fā)、支持和服務(wù)為一體,為生命科學(xué)領(lǐng)域的科研人員,臨床醫(yī)學(xué)人員等提供TA克隆,亞克隆,質(zhì)粒構(gòu)建,RNAi干擾,miRNA定量,熒光定量PCR,SNP分型,STR檢測,基因編輯,基因敲除,動(dòng)物造模等相關(guān)的技術(shù)服務(wù)的同時(shí),我們也在不斷摸索,積極研發(fā)自己的試劑產(chǎn)品,如分子,蛋白,細(xì)胞等方面的常規(guī)試劑,提供給我們的敬愛的科研工作者,并且我們與國內(nèi)外具有競爭力的耗材儀器廠家達(dá)成協(xié)議,保持長期穩(wěn)定的合作,秉承在技術(shù)方面提供支持的同時(shí),也同樣提供國內(nèi)外優(yōu)質(zhì)的試劑,耗材,常規(guī)儀器、分析儀器,滿足客戶的不同需求,一站式的服務(wù)是我們經(jīng)營的理念,我們將不斷提高技術(shù)人員的技術(shù)水平,銷售人員的業(yè)務(wù)能力,圓滿完成技術(shù)服務(wù)項(xiàng)目及產(chǎn)品銷售,同時(shí),并為廣大的科研工作者提供可靠的產(chǎn)品和全面的技術(shù)服務(wù),用我們過硬的技術(shù),優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品,完善的服務(wù)獲得每個(gè)客戶信任,支持和厚愛,最后感謝各位的支持和幫助。
公司技術(shù)平臺(tái)特色:
分子生物學(xué)技術(shù)服務(wù)項(xiàng)目包括
TA克隆,亞克?。毁|(zhì)粒構(gòu)建,熒光定量PCR檢測;RNAi干擾;miRNA檢測;SNP分型;STR檢測等;文庫構(gòu)建;高通量測序。

蛋白組學(xué)技術(shù)服務(wù)項(xiàng)目包括:
蛋白抽提,蛋白純化,WB,Elisa,免疫組化,質(zhì)譜鑒定,N端測序等。

細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)服務(wù)項(xiàng)目包括:
細(xì)胞培養(yǎng),細(xì)胞轉(zhuǎn)染;慢病毒包裝;腺病毒包裝; 基因編輯;基因敲除;動(dòng)物造模等;

代理銷售產(chǎn)品:

儀器類:移液器:Eppendorf移液器、吉爾森移液器,銳寧移液器,大龍移液器,寶予德移液器

離心機(jī):Eppendorf離心機(jī),盧湘儀離心機(jī),蜀科離心機(jī),安亭離心機(jī),ABSON迷你離心機(jī)

PCR儀:賽洛捷克PCR儀,ABI普通PCR儀、ABI 7500/ 7500Fast實(shí)時(shí)定量PCR儀

Bio-rad產(chǎn)品:凝膠成像系統(tǒng)、Bio-rad電源,Bio-rad電泳槽、Bio-rad轉(zhuǎn)移槽,玻璃板

箱體產(chǎn)品:一恒培養(yǎng)箱、一恒干燥箱,一恒恒溫?fù)u床,安泰超凈臺(tái),中科美菱超低溫冰箱

試劑類:

gegenetech醫(yī)藥中間體全線產(chǎn)品:總代理

Abbkine全線產(chǎn)品:上海區(qū)域一級(jí)代理

MCE小分子抑制劑,激動(dòng)劑全線產(chǎn)品:上海區(qū)域一級(jí)代理

Bioteke核酸提取及分子試劑全線產(chǎn)品:上海區(qū)域一級(jí)代理

Thermo scientific部分產(chǎn)品:上海區(qū)域特約經(jīng)銷商

NEB全線產(chǎn)品:上海區(qū)域特約經(jīng)銷商

耗材類:

Axygen全線產(chǎn)品:全國特約經(jīng)銷商

Corning全線產(chǎn)品:全國特約經(jīng)銷商

BD 耗材產(chǎn)品:上海區(qū)域特約經(jīng)銷商

NEST耗材產(chǎn)品:上海區(qū)域特約經(jīng)銷商








分子,蛋白及細(xì)胞技術(shù)服務(wù),生物儀器,生物試劑,生物耗材

產(chǎn)地類別 國產(chǎn)

siRNA干擾檢測

原理:RNA干擾 (RNA interference, RNAi)技術(shù),是將與內(nèi)源mRNA 編碼區(qū)同源的小片段(19 -23bp)外源雙鏈 RNA(siRNA)導(dǎo)入細(xì)胞中,引發(fā)細(xì)胞中相應(yīng)mRNA 高效特異性降解,從而導(dǎo)致特定基因表達(dá)沉默(knock down)的一種實(shí)驗(yàn)技術(shù),其中通過構(gòu)建表達(dá)載體表達(dá)siRNA是多種siRNA制備方法中有可能進(jìn)行長期基因沉默研究的方法,siRNA 載體可以在細(xì)胞內(nèi)直接轉(zhuǎn)錄出shrna ,其干擾效果等同于siRNA ,而且能夠解決 siRNA干擾時(shí)間短的缺點(diǎn)。您只需提供需干擾基因的詳細(xì)信息,包括基因的 mRNA 序列,Genbank Accession No. 和所屬物種,本公司負(fù)責(zé)設(shè)計(jì)3條針對(duì)目的mRNA的siRNA 靶序列,在短時(shí)間內(nèi)構(gòu)建三個(gè)可用于目的mRNA干擾實(shí)驗(yàn)的siRNA 載體并為您進(jìn)行后續(xù)的干擾實(shí)驗(yàn)研究。

siRNA干擾檢測實(shí)驗(yàn)流程

◇ 選擇siRNA表達(dá)載體 通過人工合成基因的方法將該序列克隆至Clontech公司的RNAi-Ready pSIREN系列表達(dá)載體中,該系列表達(dá)載體帶有Pol III(U6)啟動(dòng)子,具有轉(zhuǎn)染效率高、操作簡單、rna沉默效果易于檢測等特點(diǎn),客戶可根據(jù)需要進(jìn)行選擇。

◇ 設(shè)計(jì)siRNA靶序列

◇ 根據(jù)客戶提交的目的mRNA序列,設(shè)計(jì)3條RNA干擾靶序列,靶序列一般為19-21nt 長。

◇ 對(duì)于每條選定的siRNA 靶序列,設(shè)計(jì) siRNA 正義鏈和反義鏈,以 loop(9nt or 10nt) 相連,形成穩(wěn)定的發(fā)卡RNA,稱為 shRNA(short hairpin RNA)。

◇ 合成模板 合成每條編碼 shRNA的DNA 模板,并連接到 siRNA 載體相應(yīng)的多克隆位點(diǎn)之間。連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化DH5α大腸桿菌。

◇ 抽提陽性克隆質(zhì)粒 公司試劑盒抽提陽性克隆載體并定量。

◇ 轉(zhuǎn)染細(xì)胞 質(zhì)粒直接轉(zhuǎn)染或通過病毒包裝后轉(zhuǎn)染細(xì)胞,并對(duì)轉(zhuǎn)染細(xì)胞進(jìn)行陽性鑒定和轉(zhuǎn)代細(xì)胞株的培養(yǎng)。

◇ 干擾效果檢測

◇ 基因水平上檢測 提取RNA、反轉(zhuǎn)錄、Realtime PCR檢測干擾效果(客戶自備細(xì)胞系)。

◇ 蛋白水平上檢測 Western Blot檢測蛋白水平干擾效果(客戶自備一抗)。

服務(wù)周期及價(jià)格

服務(wù)內(nèi)容

價(jià)格(¥)

周期

siRNA 載體構(gòu)建1~3個(gè)

1800元/個(gè)

14個(gè)工作日

siRNA 載體構(gòu)建3~10個(gè)

1500元/個(gè)

20個(gè)工作日

siRNA 載體構(gòu)建10個(gè)以上

詢價(jià)

協(xié)商

細(xì)胞培養(yǎng)、轉(zhuǎn)染

5000元/基因

1~2周

基因水平上檢測干擾效果

詢價(jià)(視檢測數(shù)量商定)

5~6周

蛋白水平上檢測干擾效果

詢價(jià)(視檢測數(shù)量商定)

5~6周

服務(wù)說明

◇ siRNA服務(wù)需客戶與我們共同討論實(shí)驗(yàn)方案,并提供靶基因名稱、序列或GeneBank ID和希望插入載體的名稱等,免費(fèi)為您設(shè)計(jì)siRNA序列。

◇ 由于構(gòu)建的siRNA表達(dá)載體中插入的片段可以形成hairpin結(jié)構(gòu),因此可能會(huì)影響測序。如果我們對(duì)質(zhì)粒測序結(jié)果不理想時(shí),將對(duì)由質(zhì)粒擴(kuò)增得到的PCR產(chǎn)物進(jìn)行測序。



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