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化工儀器網(wǎng)>產(chǎn)品展廳>生命科學儀器>分子生物學儀器>其它生物/生化分析儀> siRNA干擾檢測


上?;偕锟萍加邢薰境闪⒂?013年6月,位于上海周浦時代醫(yī)創(chuàng)園,是一家銳意進取的生物高科技創(chuàng)新型企業(yè),集生物技術研發(fā)、支持和服務為一體,為生命科學領域的科研人員,臨床醫(yī)學人員等提供TA克隆,亞克隆,質粒構建,RNAi干擾,miRNA定量,熒光定量PCR,SNP分型,STR檢測,基因編輯,基因敲除,動物造模等相關的技術服務的同時,我們也在不斷摸索,積極研發(fā)自己的試劑產(chǎn)品,如分子,蛋白,細胞等方面的常規(guī)試劑,提供給我們的敬愛的科研工作者,并且我們與國內外具有競爭力的耗材儀器廠家達成協(xié)議,保持長期穩(wěn)定的合作,秉承在技術方面提供支持的同時,也同樣提供國內外優(yōu)質的試劑,耗材,常規(guī)儀器、分析儀器,滿足客戶的不同需求,一站式的服務是我們經(jīng)營的理念,我們將不斷提高技術人員的技術水平,銷售人員的業(yè)務能力,圓滿完成技術服務項目及產(chǎn)品銷售,同時,并為廣大的科研工作者提供可靠的產(chǎn)品和全面的技術服務,用我們過硬的技術,優(yōu)質的產(chǎn)品,完善的服務獲得每個客戶信任,支持和厚愛,最后感謝各位的支持和幫助。
公司技術平臺特色:
分子生物學技術服務項目包括
TA克隆,亞克??;質粒構建,熒光定量PCR檢測;RNAi干擾;miRNA檢測;SNP分型;STR檢測等;文庫構建;高通量測序。

蛋白組學技術服務項目包括:
蛋白抽提,蛋白純化,WB,Elisa,免疫組化,質譜鑒定,N端測序等。

細胞生物學技術服務項目包括:
細胞培養(yǎng),細胞轉染;慢病毒包裝;腺病毒包裝; 基因編輯;基因敲除;動物造模等;

代理銷售產(chǎn)品:

儀器類:移液器:Eppendorf移液器、吉爾森移液器,銳寧移液器,大龍移液器,寶予德移液器

離心機:Eppendorf離心機,盧湘儀離心機,蜀科離心機,安亭離心機,ABSON迷你離心機

PCR儀:賽洛捷克PCR儀,ABI普通PCR儀、ABI 7500/ 7500Fast實時定量PCR儀

Bio-rad產(chǎn)品:凝膠成像系統(tǒng)、Bio-rad電源,Bio-rad電泳槽、Bio-rad轉移槽,玻璃板

箱體產(chǎn)品:一恒培養(yǎng)箱、一恒干燥箱,一恒恒溫搖床,安泰超凈臺,中科美菱超低溫冰箱

試劑類:

gegenetech醫(yī)藥中間體全線產(chǎn)品:總代理

Abbkine全線產(chǎn)品:上海區(qū)域一級代理

MCE小分子抑制劑,激動劑全線產(chǎn)品:上海區(qū)域一級代理

Bioteke核酸提取及分子試劑全線產(chǎn)品:上海區(qū)域一級代理

Thermo scientific部分產(chǎn)品:上海區(qū)域特約經(jīng)銷商

NEB全線產(chǎn)品:上海區(qū)域特約經(jīng)銷商

耗材類:

Axygen全線產(chǎn)品:全國特約經(jīng)銷商

Corning全線產(chǎn)品:全國特約經(jīng)銷商

BD 耗材產(chǎn)品:上海區(qū)域特約經(jīng)銷商

NEST耗材產(chǎn)品:上海區(qū)域特約經(jīng)銷商








分子,蛋白及細胞技術服務,生物儀器,生物試劑,生物耗材

產(chǎn)地類別 國產(chǎn)

siRNA干擾檢測

原理:RNA干擾 (RNA interference, RNAi)技術,是將與內源mRNA 編碼區(qū)同源的小片段(19 -23bp)外源雙鏈 RNA(siRNA)導入細胞中,引發(fā)細胞中相應mRNA 高效特異性降解,從而導致特定基因表達沉默(knock down)的一種實驗技術,其中通過構建表達載體表達siRNA是多種siRNA制備方法中有可能進行長期基因沉默研究的方法,siRNA 載體可以在細胞內直接轉錄出shrna ,其干擾效果等同于siRNA ,而且能夠解決 siRNA干擾時間短的缺點。您只需提供需干擾基因的詳細信息,包括基因的 mRNA 序列,Genbank Accession No. 和所屬物種,本公司負責設計3條針對目的mRNA的siRNA 靶序列,在短時間內構建三個可用于目的mRNA干擾實驗的siRNA 載體并為您進行后續(xù)的干擾實驗研究。

siRNA干擾檢測實驗流程

◇ 選擇siRNA表達載體 通過人工合成基因的方法將該序列克隆至Clontech公司的RNAi-Ready pSIREN系列表達載體中,該系列表達載體帶有Pol III(U6)啟動子,具有轉染效率高、操作簡單、rna沉默效果易于檢測等特點,客戶可根據(jù)需要進行選擇。

◇ 設計siRNA靶序列

◇ 根據(jù)客戶提交的目的mRNA序列,設計3條RNA干擾靶序列,靶序列一般為19-21nt 長。

◇ 對于每條選定的siRNA 靶序列,設計 siRNA 正義鏈和反義鏈,以 loop(9nt or 10nt) 相連,形成穩(wěn)定的發(fā)卡RNA,稱為 shRNA(short hairpin RNA)。

◇ 合成模板 合成每條編碼 shRNA的DNA 模板,并連接到 siRNA 載體相應的多克隆位點之間。連接產(chǎn)物轉化DH5α大腸桿菌。

◇ 抽提陽性克隆質粒 公司試劑盒抽提陽性克隆載體并定量。

◇ 轉染細胞 質粒直接轉染或通過病毒包裝后轉染細胞,并對轉染細胞進行陽性鑒定和轉代細胞株的培養(yǎng)。

◇ 干擾效果檢測

◇ 基因水平上檢測 提取RNA、反轉錄、Realtime PCR檢測干擾效果(客戶自備細胞系)。

◇ 蛋白水平上檢測 Western Blot檢測蛋白水平干擾效果(客戶自備一抗)。

服務周期及價格

服務內容

價格(¥)

周期

siRNA 載體構建1~3個

1800元/個

14個工作日

siRNA 載體構建3~10個

1500元/個

20個工作日

siRNA 載體構建10個以上

詢價

協(xié)商

細胞培養(yǎng)、轉染

5000元/基因

1~2周

基因水平上檢測干擾效果

詢價(視檢測數(shù)量商定)

5~6周

蛋白水平上檢測干擾效果

詢價(視檢測數(shù)量商定)

5~6周

服務說明

◇ siRNA服務需客戶與我們共同討論實驗方案,并提供靶基因名稱、序列或GeneBank ID和希望插入載體的名稱等,免費為您設計siRNA序列。

◇ 由于構建的siRNA表達載體中插入的片段可以形成hairpin結構,因此可能會影響測序。如果我們對質粒測序結果不理想時,將對由質粒擴增得到的PCR產(chǎn)物進行測序。



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