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4.細胞簡介：

分離自卵巢組織；卵巢是雌性動物的生殖器官，卵巢的功能是產生卵以及類固醇激素。卵巢的位置與睪丸相同，僅左側發(fā)育(右側已退化)，呈葡萄狀，均為處于不同發(fā)育時期的卵泡，卵泡呈黃色，卵巢表面密布血管。卵巢的大小與年齡和產卵期有關。大多數脊椎動物有兩個卵巢，但是部分魚類的兩個卵巢融合為單個結構，而所有鳥類只有左側卵巢有機能。卵巢是位于子宮兩側的一對卵圓形的生殖器官，它的外表有一層上皮組織，其下方有薄層的結締組織。卵巢的內部結構可分為皮質和髓質。皮質位于卵巢的周圍部分，主要由卵泡和結締組織構成；髓質位于中央，由疏松結締組織構成，其中有許多血管、淋巴管和神經。哺乳動物的卵巢內卵泡的發(fā)育需要相關激素的調節(jié)才能完成，垂體促性素(卵泡刺激素和黃體生成素)使原始卵泡開始發(fā)育，其過程中還產生大量的雌激素。雌激素是卵巢的顆粒細胞和卵泡膜細胞在垂體促激素的作用下協同合成的，卵泡膜細胞合成的雄激素透過基膜進入顆粒細胞，并轉變?yōu)榇萍に亍Ｒ虼耍雅菽ぜ毎谏硟确置谡{節(jié)中占有關鍵的位置，了解其在病理及生理中的作用，對于與性激素有關的婦產科疾病(如多囊卵巢綜合癥、卵巢癌等)的研究有著重要意義。在哺乳動物卵泡生長發(fā)育的過程中，卵母細胞由不斷增加的顆粒細胞層包裹。卵巢組織中的膜細胞作為卵泡的外層細胞可以維持卵泡結構的完整性，參與構成卵母細胞和顆粒細胞發(fā)育的微環(huán)境且為類固醇激素的生成提供底物。在哺乳動物中調節(jié)膜細胞類固醇激素生成的機制已見相關報道，但是有關卵泡膜細胞的聚集、生長和分化的研究尚不深入。

5.方法簡介：

實驗室分離的采用先機械分離后膠原消化結合Percoll密度梯度離心法、并通過專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測：

實驗室分離的經3β-HSD免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基  含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    每2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態(tài)  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳3代左右

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相：空氣，95%；CO2，5%

實驗報告：

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

糖皮質激誘導轉錄蛋白1抗體　腦特異性血管生成抑制蛋白2封閉多肽　小鼠白介10(IL-10)ELISA試劑盒

微管相關蛋白輕鏈3C抗體　整合樣金屬與樣6蛋白封閉多肽　小鼠白介11(IL-11)試劑盒ELISA

英文名稱: HA Tag　補體C1q腫瘤壞死因子相關蛋白6封閉多肽　小鼠白介15(IL-15)ELISA檢測試劑盒

英文名稱: CD3 gamma　碳酐9封閉多肽　小鼠17羥皮質類固醇(17-OHCS)elisa試劑盒

活化白細胞粘附分子抗體　α-s2酪蛋白封閉多肽　小鼠白介1α(IL-1α)試劑盒elisa

肥大細胞類糜1抗體　免疫球蛋白D重鏈保守區(qū)封閉多肽　小鼠白介2(IL-2)檢測試劑盒elisa

白細胞介-7受體a（CD127）抗體　G蛋白偶聯受體150封閉多肽　小鼠白介4(IL-4)ELISA試劑盒

角質蛋白β抗體　NLE1蛋白封閉多肽　小鼠白介6(IL-6)試劑盒ELISA

β淀粉樣肽（31-35)/Aβ 31-35 抗體　電壓門控性鉀通道Kv1.6封閉多肽　小鼠白介9(IL-9)ELISA檢測試劑盒

英文名稱: Keratin 6　富含亮氨軟骨蛋白封閉多肽　小鼠苗條受體(LR/Ob-R)elisa試劑盒

微管相關蛋白2抗體　胰島樣生長因子2 mRNA 結合蛋白3封閉多肽　小鼠瘦(LEP)試劑盒elisa

核受體結合蛋白2抗體　著絲粒蛋白H封閉多肽　小鼠白血病抑制因子(LIF)檢測試劑盒elisa

人腫瘤抑制蛋白抗體　磷化絲裂原活化蛋白激MKK7封閉多肽　小鼠巨噬細胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA試劑盒

14-3-3τ蛋白抗體　β分泌封閉多肽　小鼠巨噬細胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)試劑盒ELISA

磷化粘著斑激抗體　接觸蛋白封閉多肽　小鼠基質金屬2/明膠A(MMP-2/GelatinaseA)ELISA檢測試劑盒

Toll樣受體6抗體　PYROXD2蛋白封閉多肽　小鼠腺嘌呤二核苷磷(NADPH)elisa試劑盒

細胞角蛋白18單克隆抗體　甘油三磷脫氫1封閉多肽　鼠抗人D-泛(PantothenicAcid)單抗試劑盒elisa

英文名稱: phospho-SMAD5 (Ser463 + Ser465)　細胞粘附分子1封閉多肽　小鼠粘蛋白/粘液5B(MUC5B)檢測試劑盒elisa
小鼠卵泡膜細胞A375人惡性黑色瘤細胞專用培養(yǎng)基英文名稱：A375細胞專用培養(yǎng)基125ML

A375人惡性黑色瘤細胞專用培養(yǎng)基英文名稱：A375細胞專用培養(yǎng)基500ML

A375+EGFP人惡性黑色瘤+EGFP細胞專用培養(yǎng)基英文名稱：A375+EGFP細胞專用培養(yǎng)基125ML

A375+EGFP人惡性黑色瘤+EGFP細胞專用培養(yǎng)基英文名稱：A375+EGFP細胞專用培養(yǎng)基500ML

A431(A-431)人表皮癌細胞專用培養(yǎng)基英文名稱：A431(A-431)細胞專用培養(yǎng)基125ML

A431(A-431)人表皮癌細胞專用培養(yǎng)基英文名稱：A431(A-431)細胞專用培養(yǎng)基500ML

A498人腎癌細胞專用培養(yǎng)基英文名稱：A498細胞專用培養(yǎng)基125ML