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4.細胞簡介：

分離自腎組織；腎臟是機體的重要器官，它的基本功能是生成尿液，借以清除體內代謝產物及某些廢物、毒物，同時經重吸收功能保留水份及其他有用物質，如葡萄糖、蛋白質、氨基酸、鈉離子、鉀離子、碳酸等，以調節(jié)水、電解質平衡及維護酸堿平衡。腎臟同時還有內分泌功能，生成腎素、促紅細胞生成素、活性維生素D3、前列腺素、激肽等，又為機體部分內分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能，保證了機體內環(huán)境的穩(wěn)定，使新陳代謝得以正常進行。腎臟移植是臨床上治療慢性腎功能衰竭的有效方法，然而這種方法受到供體腎短缺的限制。腎細胞移植可部分解決供體腎短缺的問題，是未來可以替代腎臟移植的有效方法。因此，體外腎細胞的培養(yǎng)受到國內外有關專家的密切關注。原代腎細胞作為一種常用的腎臟毒理學研究對象，其分離方法主要有機械研磨分離法和消化法，消化法因對細胞損傷小、分離效果好而優(yōu)于機械研磨分離法；目前常用的消化法主要是胰dan白消化法和膠原消化法。

5.方法簡介：

實驗室分離的采用膠原 - 胰dan白混合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測：

實驗室分離的經檢測，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基  含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    每2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態(tài)  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳1-2代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相：空氣，95%；CO2，5%

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實驗報告：

線粒體絲氨抗體　染色體結構維持蛋白4封閉多肽　人著絲粒蛋白B(CENP-B)ELISA試劑盒

富馬水合單克隆抗體　FBG4蛋白封閉多肽　人巨噬細胞刺激蛋白(MSP)試劑盒ELISA

半胱胺-7抗體　腺苷受體蛋白封閉多肽　人雷帕霉靶蛋白(mTOR)ELISA檢測試劑盒

EGF毒受體7跨膜結構域蛋白1抗體　腎細胞癌抗原nyren39封閉多肽　人核基質蛋白22(NMP-22)elisa試劑盒

英文名稱: Histone H3 (Nuclear Loading Control)　嗅覺受體51B2封閉多肽　人軟骨寡聚蛋白(COMP)試劑盒elisa

環(huán)指蛋白193抗體　鋅指蛋白ZBTB6封閉多肽　人多藥耐藥相關蛋白(MRP)檢測試劑盒elisa

SMAD家族9抗體　萊克多巴胺牛血清白蛋白偶聯(lián)物　人高速泳動蛋白17(HMG-17)ELISA試劑盒

B細胞遷移基因2抗體　SLFN13蛋白封閉多肽　人空泡毒相關蛋白A(VacA)試劑盒ELISA

A-Raf抗體　磷化波形蛋白封閉多肽　人玻連蛋白/體外粘連蛋白(VN/CD51+CD61)ELISA檢測試劑盒

磷化微管相關蛋白抗體　220kDa蛋白激D相互作用蛋白封閉多肽　人波形蛋白(VIM)elisa試劑盒

甲胎蛋白AFP抗體　NDUFB8蛋白封閉多肽　人表面活性蛋白D(SP-D)試劑盒elisa

聚磷肌醇磷5A抗體　電壓依賴性鈣通道Cav1.1封閉多肽　人阿拉伯半乳糖蛋白(AGPs)檢測試劑盒elisa

磷化原癌基因c-Jun抗體　粘著斑蛋白封閉多肽　人β乳球蛋白(β-Lg)ELISA試劑盒

9號染色體開放閱讀框3抗體　磷化α晶狀體球蛋白B/αB-crystallin封閉多肽　人β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白(β-Cat)試劑盒ELISA

泛連接抗體　維甲誘導神經母細胞瘤蛋白1封閉多肽　人淀粉樣前體蛋白(βAPP)ELISA檢測試劑盒

交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian　葡萄糖氧化封閉多肽　人β2糖蛋白(β2-GP)elisa試劑盒

維甲相關孤兒受體β抗體　緊密連接蛋白3封閉多肽　人α乳清蛋白(α-La)試劑盒elisa

細胞角蛋白18抗體　蛋白激C亞性D型封閉多肽　人N-乙?；?絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯氨(AcSDKP)檢測試劑盒elisa
小鼠腎實質細胞95-D人高轉移肺癌 細胞專用培養(yǎng)基英文名稱：95-D細胞專用培養(yǎng)基125ML

95-D人高轉移肺癌 細胞專用培養(yǎng)基英文名稱：95-D細胞專用培養(yǎng)基500ML

A172人膠質母瘤細胞專用培養(yǎng)基英文名稱：A172細胞專用培養(yǎng)基125ML

A172人膠質母瘤細胞專用培養(yǎng)基英文名稱：A172細胞專用培養(yǎng)基500ML

A-204人橫紋肌肉瘤細胞專用培養(yǎng)基英文名稱：A-204細胞專用培養(yǎng)基125ML

A-204人橫紋肌肉瘤細胞專用培養(yǎng)基英文名稱：A-204細胞專用培養(yǎng)基500ML

A2058人黑色瘤細胞專用培養(yǎng)基英文名稱：A2058細胞專用培養(yǎng)基125ML