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小鼠角膜內(nèi)皮細(xì)胞

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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai Bangjing Industrial Co., Ltd.,China)是一家生物企業(yè),主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的銷售。主營產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測試劑盒、分光光度法檢測試劑盒、熒光定量PCR檢測試劑盒、細(xì)胞株、原代細(xì)胞、細(xì)胞培養(yǎng)基、標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)品。代理并銷售進(jìn)口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細(xì)胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。


上海邦景實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai Bangjing Industrial Co., Ltd.,China)先后與天津中醫(yī)學(xué)院、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院、上海交通大學(xué)、華東師范大學(xué)、第二軍醫(yī)大學(xué)、南京大學(xué),暨南大學(xué),南京工業(yè)大學(xué),曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機(jī)研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒,種屬標(biāo)本齊全,有專門針對人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標(biāo)本的試劑盒;另有針對各種動物(鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚)的科研試劑。


公司秉承“專注品質(zhì)、信守承諾、積極溝通、創(chuàng)新服務(wù)”的企業(yè)文化積極參與生物領(lǐng)域的技術(shù)創(chuàng)新和技術(shù)服務(wù),力求為我國科研事業(yè)更好的,更專業(yè)的服務(wù)!


公司售后服務(wù)宗旨:有質(zhì)量問題可申請退換,有技術(shù)疑問可隨時給于解答,一對一的客服服務(wù),客戶的需求也是我們不斷的更新服務(wù)。






進(jìn)口elisa試劑盒,細(xì)胞株,細(xì)胞系,菌種

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 眼角膜組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自眼角膜組織;角膜位于眼球前壁的一層透明膜,約占纖維膜的前1/6,從后面看角膜呈正圓形,從前面看為橫橢圓形。角膜厚度各部分不盡相同,中央部薄。角膜有十分敏感的神經(jīng)末梢,如有外物接觸角膜,眼瞼便會不由自主地合上以保護(hù)眼睛。為了保持透明,角膜并沒有血管,透過外界空氣、淚液及房水獲取養(yǎng)份及氧氣。角膜分為五層,由前向后依次為:上皮細(xì)胞層、前彈力層、基質(zhì)層、后彈力層、內(nèi)皮細(xì)胞層。角膜的高度透明性和光學(xué)性是正常發(fā)揮生理功能的必要條件之一,而角膜內(nèi)皮細(xì)胞(CEC)在維持角膜的正常生理功能方面起重要作用。角膜內(nèi)皮細(xì)胞是角膜內(nèi)層的單層細(xì)胞,構(gòu)成了后彈力層和房水之間的物理屏障,通過離子“泵”功能調(diào)節(jié)角膜中離子濃度和水分,維持角膜的半脫水狀態(tài),保證角膜的正常厚度和透明度。一旦角膜內(nèi)皮細(xì)胞功能出現(xiàn)紊亂,常導(dǎo)致角膜水腫而使角膜部分甚至失去透明性。角膜內(nèi)皮細(xì)胞主要功能有:①角膜是的無血管的組織,具有透明的特性和合成許多蛋白的功能;②角膜內(nèi)皮細(xì)胞對角膜透明性有重要作用;③角膜內(nèi)皮細(xì)胞通過Na+-K+-ATP活性,維持角膜和房水內(nèi)Na+梯度,防止水分滲入角膜內(nèi),維持角膜實(shí)質(zhì)層相對脫水狀態(tài),維持透明性。

5.方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用混合膠原消化結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)NSE(神經(jīng)元特異性烯醇化)免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性  可傳2-3代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

小鼠角膜內(nèi)皮細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

眼角膜組織

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

核糖體蛋白S7抗體 3號染色體開放閱讀框37封閉多肽 人前列腺F2α(PGF2α) ELISA試劑盒

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TRIM16蛋白抗體 G蛋白信號轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子22封閉多肽 人單純皰疹病毒Ⅰ型抗體(HSVⅠAb)ELISA試劑盒

硫酯1抗體 卵母細(xì)胞透明帶糖蛋白3封閉多肽 人雌激誘導(dǎo)蛋白PS2 試劑盒 ELISA

流感病毒H3N7血凝抗體 核仁結(jié)構(gòu)域蛋白NOM1封閉多肽 人乳頭狀瘤病毒抗體IgM(HPV-IgM) ELISA檢測試劑盒

磷化HER3抗體 上皮鋅指蛋白1, 2, 4封閉多肽 人乳頭狀瘤病毒抗體IgG(HPV-IgG) ELISA Kit

三磷腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體 神經(jīng)外營養(yǎng)蛋白4封閉多肽 人單純皰疹病毒抗原2(HSV-Ag2) ELISA試劑盒

磷化結(jié)節(jié)性硬化蛋白抗體 蛋白磷2C亞型α封閉多肽 人游離前列腺特異性抗原(fPSA)試劑盒 ELISA

抗志賀毒大腸桿菌O139抗體(仔豬水腫病志賀毒大腸桿菌O139) PTCHD1蛋白封閉多肽 人前列腺特異性抗原(PSA)ELISA檢測試劑盒

LIN7C蛋白抗體 抑癌蛋白DKK1封閉多肽 人磷脂酰絲氨(PS)ELISA Kit

平滑肌蛋白抗體 24脫氫還原封閉多肽 人磷甘油酯(PC/CPG)ELISA試劑盒

蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)抗體 EMR4蛋白封閉多肽 人總膽汁(TBA) 試劑盒 ELISA
小鼠角膜內(nèi)皮細(xì)胞人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞英文名稱:人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞1×106提供免疫熒光鑒定報(bào)告

人胎盤周細(xì)胞英文名稱:人胎盤周細(xì)胞1×106提供免疫熒光鑒定報(bào)告

人胎盤絨毛膜間質(zhì)細(xì)胞英文名稱:人胎盤絨毛膜間質(zhì)細(xì)胞1×106提供免疫熒光鑒定報(bào)告

人羊水干細(xì)胞英文名稱:人羊水干細(xì)胞1×106提供免疫熒光鑒定報(bào)告

人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞英文名稱:人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

人腦膜細(xì)胞英文名稱:人腦膜細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

人星形膠質(zhì)細(xì)胞英文名稱:人星形膠質(zhì)細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 




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