高靈敏ECL發(fā)光試劑 Western Chemiluminescent HRP Substrate

Cat No. KTSM1901

簡(jiǎn)介：
本ECL試劑盒是基于魯米諾（luminol）的高靈敏底物體系，用于在免疫印跡實(shí)驗(yàn)中檢測(cè)辣根過物氧化酶（HRP）。試劑盒中的增強(qiáng)劑使得本試劑盒能檢測(cè)fg至pg級(jí)抗原，背景干凈?？梢允褂肵光片或化學(xué)發(fā)光成像儀進(jìn)行檢測(cè)。由于本產(chǎn)品靈敏度高，檢測(cè)豐度高的抗原，如actin等時(shí)，應(yīng)適當(dāng)降低一抗及二抗的濃度。

高靈敏ECL發(fā)光試劑運(yùn)輸和保存條件：
室溫運(yùn)輸。收到試劑后請(qǐng)避光，4度保存。室溫保存時(shí)，底物可以穩(wěn)定保存6個(gè)月；4度保存時(shí)，可以保存1年以上。

產(chǎn)品組成：
超敏ECL發(fā)光劑/增強(qiáng)劑，50ml
超敏ECL過氧化物/穩(wěn)定劑，50ml

高靈敏ECL發(fā)光試劑注意事項(xiàng)：
1. 為獲得結(jié)果，請(qǐng)優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件，包括樣品，封閉試劑，洗滌液，一抗，二抗的選擇及孵育時(shí)間等。
2. 在轉(zhuǎn)膜，封閉，洗滌及一抗二抗孵育過程中防止膜干掉。
3. 為保證結(jié)果，請(qǐng)使用使用脫色搖床等設(shè)備，充分洗滌一抗二抗等。
4. 由于抑制HRP的活性，請(qǐng)盡量避免使用,尤其在二抗孵育時(shí)，不能加疊。
5. 與膜接觸時(shí)，請(qǐng)使用干凈的手套或鑷子，避免蛋白污染。
6. 底物盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。在室溫條件下，配制好的底物可以穩(wěn)定8小時(shí)。避免強(qiáng)光照射底物。短時(shí)間日光燈照射不影響配制好的底物的效果。

高靈敏ECL發(fā)光試劑使用方法（X光片）：
1. 根據(jù)樣品中抗原的濃度及一抗的效價(jià)，用一抗孵育印跡膜室溫2小時(shí)或4度過夜。
2. 充分洗滌后，二抗室溫孵育1小時(shí)。再充分洗滌后。
3. 按需要量將發(fā)光劑和過氧化物按1:1比例充分混勻得到發(fā)光物工作液。按1平方厘米印跡膜0.1ml工作液準(zhǔn)備。
4. 棄去洗滌液，將工作液加到印跡膜上，孵育5分鐘。
5. 將印跡膜取出，并吸去多余的工作液。
6. 將印跡膜放置于兩層干凈的保鮮膜或塑料保護(hù)殼之間，去除其中的氣泡。
7. 將印跡膜吸附蛋白的面向上放置，置于X光片盒中，在暗室內(nèi)壓上X光片適當(dāng)?shù)臅r(shí)間。進(jìn)行顯影和定影。

使用方法（化學(xué)發(fā)光成像儀）：
1. 第1-5步與X光片方法相同。
2. 將印跡膜放置于成像儀的合適位置。
3. 選擇信號(hào)累積模式采集信號(hào)。

常見問題，可能原因及解決方案