[產(chǎn)品介紹:原理]

革蘭氏染色法是細(xì)菌學(xué)中廣泛使用的一種鑒別染色法，通過結(jié)晶紫初染和碘液媒染后，在細(xì)胞壁內(nèi)形成了不溶于水的結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物，革蘭氏陽性菌細(xì)胞壁較厚，肽聚糖網(wǎng)層次較多且交聯(lián)致密，乙醇脫色時(shí)，肽聚糖脫水使孔徑縮小，故保留結(jié)晶紫-碘復(fù)合物在細(xì)胞膜上，呈紫色。革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄且交聯(lián)度差，脫色后類脂外膜迅速溶解，縫隙加大，結(jié)晶紫與碘復(fù)合物溶出，因此乙醇脫色后再經(jīng)番紅復(fù)染，呈紅色。

革蘭染色液使用說明書

【產(chǎn)品名稱】通用名稱：革蘭染色液

            產(chǎn)品型號：JRBGL4S

【包裝規(guī)格】每種染色液的包裝規(guī)格為每瓶50 ml、100ml、250ml或500ml，整組染色液的包裝規(guī)格為：4×50ml、4×100ml、4×250ml或4×500ml。

【預(yù)期用途】用于細(xì)菌或真菌的涂片染色。

【檢測原理】革蘭陽性菌的細(xì)胞壁有一層比革蘭陰性菌厚的肽聚糖，能與結(jié)晶紫緊密結(jié)合，不容易被脫色液洗掉，在此基礎(chǔ)上形成了革蘭染色液試劑。

【主要組成成分】

【儲(chǔ)存條件及有效期】

1、原包裝未開封染色液的有效期為12個(gè)月，在有效期內(nèi)的已開封染色液應(yīng)在開封后6個(gè)月內(nèi)使用完，每次用后應(yīng)及時(shí)擰緊瓶蓋，以免揮發(fā)或變質(zhì)。

2、儲(chǔ)存條件：本試劑應(yīng)貯存在相對濕度不大于80%，無腐蝕性氣體和通風(fēng)良好的10℃～30℃常溫環(huán)境。

3、生產(chǎn)日期和失效日期：詳見外包裝標(biāo)簽。

【樣本要求】待檢標(biāo)本應(yīng)為菌株或有菌株的標(biāo)本。

【檢驗(yàn)方法】

1.涂片

取一潔凈載玻片，滴一小滴生理鹽水于玻片中央，按無菌操作要求，先用接種環(huán)，挑取少量某菌培養(yǎng)物于玻片中央水滴中，涂布均勻。要求涂片薄且均勻，使其自然干燥。

2.固定

菌液涂片干燥后通過火焰 1-2 次即可，不可過熱，以載玻片不燙手為宜。

3.染色

一般包括初染、媒染、脫色、復(fù)染等四個(gè)步驟，具體操作方法是：

（1）初染：滴加結(jié)晶紫染色液（A液）覆蓋玻片涂布區(qū)，染色1分鐘，水洗。

（2）媒染：滴加（B液）碘液后染色1分鐘，水洗。

（3）脫色：甩凈載玻片上水分，傾斜玻片，并襯以白紙，用95%乙醇溶液（C液）滴洗至無紫色褪下時(shí)為宜，時(shí)間20-60s。

（4）復(fù)染：滴加蕃紅染色液（D液）后，染色1-2分鐘，水洗。

（5）吸干或在空氣中涼干后，油鏡鏡檢。

【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】在顯微鏡下觀察染色結(jié)果：

1、在顯微鏡下觀察到紫色或深紫藍(lán)色菌落為革蘭染色陽性菌。  

2、在顯微鏡下觀察到紅色或粉紅色菌落為革蘭染色陰性菌。 

【檢驗(yàn)方法的局限性】有些細(xì)菌有染色嗜變性，不一定*是染色原因，應(yīng)根據(jù)菌體形態(tài)加以確定。

【注意事項(xiàng)】

1、該染色液僅用于體外診斷。      

2、涂片厚薄要均勻，自然干燥后再加熱固定。

3、酒精脫色過度或復(fù)染的時(shí)間不能太長，陽性菌可被誤染為陰性菌；酒精脫色不夠，陰性菌可被誤染為陽性菌。

4、所用標(biāo)本應(yīng)視為具有傳染性物質(zhì)。