甜菜堿（Betaine）含量試劑盒說明書

微量法

注意：正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。

測定意義

甜菜堿是一種廣泛分布于動植物及微生物體內(nèi)的季銨型水溶性生物堿，是生物體內(nèi)膽堿的氧化產(chǎn)物，可以增強免疫力、降血脂、抗氧化、抗腫瘤，并可作為甲基供體，參與促進動物蛋

白質(zhì)和脂肪代謝、增進食欲、緩和應激、調(diào)節(jié)滲透壓、穩(wěn)定維生素等多種生物作用，在化工、

醫(yī)藥、食品添加劑等領域有較廣泛的應用。

測定原理

甜菜堿在強酸條件下和雷氏鹽發(fā)生反應產(chǎn)生沉淀，沉淀用丙酮溶解形成紅色溶液，在 525nm處有特征吸收峰，測定525nm處的吸光值，可計算得樣品的甜菜堿含量。

自備實驗用品及儀器

天平、離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、甲醇、、鹽酸和蒸餾水。

試劑組成和配制

提取液（自備）：80%甲醇。取80mL甲醇，加20mL蒸餾水。

標準品：粉劑 1mg×2 支，4℃保存，臨用前加1mL蒸餾水充分溶解。

試劑一：粉劑 0.12g×2 瓶，4℃保存，臨用前根據(jù)用量配制，每瓶加4mL蒸餾水溶解，加78μL濃鹽酸調(diào) pH為1。

試劑二：99%，自備。取無水5.94mL ，加入蒸餾水0.06mL ，混勻。

試劑三：70%丙酮，（ 易揮發(fā)，根據(jù)用量自備，丙酮：蒸餾水=7:3）。

甜菜堿提取

取烘干后過40目篩的樣品約0.2g，加1mL提取液，置于60℃提取30min，期間不斷震蕩。10000g，25℃，離心15min，取上清液。

測定操作表

1、分光光度計/酶標儀預熱30min，調(diào)節(jié)波長至525nm。

2、操作表

注意：標準管只需測定一次。